冷冻组织切片制作
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织实验步骤1. 将未受损伤的组织切剖成小样本,约lcmXIcmX0.4cm。2. 将标本放在卡片的一端。标记该卡片,将带有标本的一端浸入液氮中。60s后,取出标本并放在干冰上。修剪卡片,使其大小刚好比组织块稍大些,转入预冷的(-70℃)带有标记的小瓶中。3. 切片前,用1%明胶包被洁净的载玻片。加热至50℃使明胶溶于水中,冷却,加入0.02%叠氮钠。将玻片浸入明胶溶液中30s,取出,自然干燥。4. 按照仪器使用说明书,用低温恒温器制备冷冻切片。通常切片厚度在5-10gm之间。用包被过的载玻片收集切片。5. 让切片自然干燥。浸入新鲜配制的......阅读全文
冷冻组织切片制作
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
冷冻组织切片的制作
实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇主要设备载玻片,Whatm
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮,干冰,1%明胶,4%多聚甲醛,PBS,含1%NP-40的PBS,3%BSA/PBS稀释抗体,辣根过氧化物酶标记的二抗,DAB/金属盐试剂,3%过氧化氢,0.3%(W/V)氯化镍贮存液,Harris苏木精,乙醇实验设备载玻片,Whatman 1#滤纸,低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
植物组织石蜡切片的制作
一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程,为研究植物的内部结构奠定基础。 3.学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与 试剂1.器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻
病理制片技术——冷冻切片的制作
一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织,因此冷冻切片也是脂肪染色、酶
冷冻切片术的制作方法
以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例,该机的箱面上有电子控制板,装有即时冷冻键和除霜键,启动即时冷冻键,机器马上进行工作状态,并可持续10mins。启动即时除霜键,可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉,并可持续15mins。有照明键一个,启动该键可照明工作间,有利工作及观察组织的
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡,并浸入组织内部,把软组织变为适当硬度的蜡块,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡,并浸入组织内部,把软组织变为适当硬度的蜡块,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡,并浸入组织内部,把软组织变为适当硬度的蜡块,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡,并浸入组织内部,把软组织变为适当硬度的蜡块,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
制作组织切片时包埋的目的
目的浸蜡是组织经过脱水、透明后在熔化的石蜡内浸没的过程称浸蜡。包埋是使石蜡变硬并将组织包埋进去以利于切片和观察的过程。目的是去除组织中的透明剂而代之以石蜡,并浸入组织内部,把软组织变为适当硬度的蜡块,以便切成薄片。1、概念包埋:指用包埋剂支撑组织的过程。2、种类石蜡、火棉胶、树脂、OCT、胶水,其中
LSCM组织的冷冻包埋和切片
组织的冷冻包埋和切片 组织的冷冻方法可根据固定和保存条件不同而不同,尽可能加快冷冻速度以力求减少组织在冷冻 过 程 中 冰晶 的 形 成 。组织冷冻后 ,使用冷冻切片机,将组织切成 5 ~ 15 μm 的切片,粘贴于处理过的载玻片上,室温干燥 1h 后,可进行免疫荧光抗体标记。或放入载玻片盒,- 8
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰磷酸盐缓冲液(PBS) Tek OCT 组织复合物仪器、耗材 封闭容器烧杯 恒冷装置 解剖工具 平盘组织模子载玻片刀片实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液(PBS)Tek OCT 组织复合物(Sakura Finet
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织 试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰 磷酸盐缓冲液(PBS
冷冻组织及切片的准备实验
为了获得较好的结果,应当用新鲜的组织,因为在-80°C 中保存超过 24 h 的样品,其RNA 的产量和完整性将大打折扣。尽管有几个实验小组曾经报道用 LCM 技术从石蜡包埋的组织中获得了没有降解的 RNA, 但作者还是推荐使用冷冻的组织块。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼
冷冻切片的制作方法及注意事项
冷冻切片的方法及注意事项一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状
组织切片标本制作的基本原理
最为广泛应用的方法:石蜡切片 不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺
石蜡切片的制作
以石蜡制作的切片,可以制成极薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蜡切片不但可以达到这个要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。这一点是冰冻切片和火棉胶切片难以获得的结果。另外,石蜡切片还便于制作大批的或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中
石蜡切片的制作
以石蜡制作的切片,可以制成极薄的切片。一般的切片厚度要求在4—6微米。而石蜡切片不但可以达到这个要求,甚至可以切得更薄到2微米以至1微米。这一点是冰冻切片和火棉胶切片难以获得的结果。另外,石蜡切片还便于制作大批的或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块便于长期保存。所以石蜡切片是目前各种切片制作方法中
LSCM冷冻组织切片的免疫荧光标记
冷冻组织切片的免疫荧光标记 将冷冻组织切片从 -80℃ 冰箱中取出,室温放置 10 min,待切片回温并干燥,浸于 PBS 中 10 min洗去OCT,可以无需 Triton 处理,即可进行免疫荧光抗体标记,操作步骤与培养细胞反应方法相同。反应在避光湿盒中进行,反应结束时用无荧光封固剂封片,4℃保存
冷冻切片操作
1.冷冻切片机要始终处于运行状态,即使在不做冷冻切片时也要开着致冷,不能时开时关,以免影响机器寿命。2.手术取下的新鲜组织不要固定,因固定过的组织不利于切片,而且还会影响染色。3. 用OCT做包埋剂,起到支撑的作用。先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上,OCT不要太多,以免流到固定头外,组织表
石蜡切片和半薄切片的制作
实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液),乙醇,二甲苯,纯石蜡,蜂蜡,树脂胶主要设备真空泵,AO手摇式切片机,Olypmus BH-2型显微镜,LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作 1) 取材固定新鲜配置4%戊二醛固定液(pH7.
石蜡切片与冷冻切片的区别
1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳
冰冻切片的制作技巧
这个主要看组织固定包埋技术和冰冻切片机性能吧,固定包埋因人而异,因为需要快速出诊断报告,这一点要求切片机的速冻效果好,机器能马上进入工作状态。这一点我觉得深圳瑞沃德厂家的冰冻切片机设计的很好,可以上班前自动唤醒(无需人员手动),上班了,机器也就可以马上进入工作状态。样本快速制冷,2-3分钟就可以了
冰冻切片的制作步骤
冷冻切片 1、取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上冰冻,用吸热器压住组织,至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片(1~3分种)。 2、将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。 3、调好欲切的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤
显微标本的制作切片
显微标本的制作4.1 横切制片或纵切制片4.1.1 药材的预处理 将应观察的部位、切成适当大小的块或段,一般以宽lcm、长3cm为宜,切面削平整。质地软硬适中的样品可直接进行切片;质地坚硬的则需先使其软化后再切片。制片的预处理——软化 软化方法可采用放在吸湿器中闷润,或在水中浸软或煮软。经
石蜡切片制作基本技术
石蜡切片 石蜡切片(paraffin section) 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中,光镜下观察切片标本多数是石蜡
树脂切片制作过程
一、实验仪器及试剂1.器具电子天平、70℃恒温箱、玻璃制刀机、半/超薄切片机、显微镜、包埋模、制刀用的玻璃条、镊子、刀片。 2.试剂 (1)固定剂:FAA (2)脱水剂:20%、40%、60%、80%、90%、95%、100%的乙醇;丙酮(3)树脂:Spurr树脂(4)染色剂:1%碱性品红二、实验步
冷冻切片应用特点
(1)在手术进行中,突然发现病人的病变与原诊断,原定手术方案不相符合,或者怀疑时,需要病理确定。(2)了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞,或者转移的程度,以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。(3)对于已确定为恶性肿瘤的患者,则需要了解其手术范围是否足够,上下切缘是否有残存的肿瘤组织。(
组织学——组织切片
· Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques, like fixation, dehydration, embedment and subs