详述共聚焦显微镜荧光探针的选择步骤及方法
在用共聚焦显微镜进行的试验中,一些实验指标可以利用样品自身或外源性物质的自发性荧光进行检测,但大多数待测物质不具备可测荧光,需要采用荧光探针标记的方法使其具有可测定的荧光信号。那么,怎样选择共聚焦显微镜荧光探针呢? 1、根据实验目的确定需要检测的指标 一旦检测指标确定,则荧光探针的选择范围也随之确定。可见,实验中选择使用何种荧光探针是由实验目的决定的。例如,实验目的是研究发生房颤时心肌细胞内钙离子的变化情况,则可以确定待测物质为心肌细胞内的钙离子,荧光探针的选择范围就限定为能够标记活细胞的钙离子探针。 2、确定可供选择的荧光探针的范围 对于新的实验物质或指标哦,如果实验目的不是探索新的荧光探针,则可以选择应用成熟的探针和标记方法。可以通过查找权威的文献或国内外知名试剂公司产品目录,确定可以标记待测物质的荧光探针种类或范围。 3、考察荧光探针的特性是否符合荧光样品的制备要求 荧光探针的特性直......阅读全文
详述共聚焦显微镜荧光探针的选择步骤及方法
在用共聚焦显微镜进行的试验中,一些实验指标可以利用样品自身或外源性物质的自发性荧光进行检测,但大多数待测物质不具备可测荧光,需要采用荧光探针标记的方法使其具有可测定的荧光信号。那么,怎样选择共聚焦显微镜荧光探针呢? 1、根据实验目的确定需要检测的指标 一旦检测指标确定,则荧光探针的选
共聚焦荧光探针的选择
共聚焦荧光探针的选择共聚焦激光扫描显微镜是20世纪80年代来发展起来的一种新型高精度显微镜系统,辅以各类荧光探针或荧光染料与被测物质特异性结合,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。荧光探针的发展非常迅速,目前仅美国Molecular Probes公
如何选择合适的共聚焦显微镜荧光探针?
2019-12-03作者:浏览次数:34 来源:北京欧普特科技有限公司 荧光探针的作用是标记待测物质,使之能够利用荧光测定的方法得到检测,并获得正确的实验结果。那么如何选择合适的共聚焦显微镜荧光探针呢? 根据实验目的确定需要检测的指标选择探针一旦检测指标确定,则荧光探针的选择范围也随
共聚焦荧光探针标记方法
(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、M
共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针
一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛,以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1.细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等,前两者为单波长激光探针,利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca
共聚焦显微镜中荧光团的共定位
在多标荧光样品图像中,因两个或多个荧光团在显微结构中距离很近,经常会有发射信号叠加,这种效应就称为共定位。目前,高特异性合成荧光团和经典免疫荧光技术的应用、精密光切技术的应用、共聚焦和多光子显微镜提供的数字图像处理技术等大大提高了生物样品中共定位检测的能力。
共聚焦图中对荧光团共定位
正如上面所讨论的,在共聚焦图中对荧光团共定位的定量测定,可通过散点图和感兴趣区域的信息获得。从整个散点图的信息,可获得很多变量值。Pearson′s 系数就是用于分析整个散点图的诸多变量中的一个,为描述两幅图之间重叠程度,在识别一幅图像和另一幅图像的匹配程度上, Pearson′s, R(r)系数是
原子力显微镜探针选择及常见故障解决方法
基于针尖和样品之间的各种相互作用力,原子力显微镜(AFM)可用于样品表面形貌、摩擦力等各种物理特性的研究,它是纳米科技研究中一个重要工具.影响AFM测量图像质量的因素很多,如振幅参数、积分增益I、比例增益P、衰减增益和扫描速度等,而探针同样是提高样品表面形貌像成像质量的关键.通过采用控制变量法,并以
共激光扫描共聚焦显微镜
共激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)是一种先进的分子生物学和细胞生物学研究仪器。它在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,结合数据化图像处理技术,采集组织和细胞内荧光标记图像,在亚细胞水平观察钙等离子水平的变化,并结合电生理等技术
选择荧光探针的一般考虑
选择荧光探针的一般考虑 选择合适的荧光探针是有效地进行实验并获取理想实验结果的保障。荧光探针的选择主要从以下几个方面考虑。(1)仪器所采用激光器的类型:应根据仪器采用激光器的类型进行探针选择。如共聚焦激光扫描显微镜(Bio-Rad 1024,美国Bio-Rad公司产品)采用氪/氩离子激光器,激发波长
原子力显微镜探针、原子力显微镜及探针的制备方法
原子力显微镜探针、原子力显微镜及探针的制备方法。原子力显微镜探针包括探针本体和设置在探针本体的针尖一侧的接触体,接触体具有连接段和接触段,接触段具有接触端面;接触段为二维材料,且接触端面为原子级光滑且平整的单晶界面。本发明ZL技术的原子力显微镜探针可精确地检测受测样品的各种性质。介绍随着微米纳米科学
扫描探针显微镜及扫描方法
扫描探针显微镜和扫描方法,其能减小或避免因探针尖与样品碰撞而造成的损害,缩短测量时间,提高生产力和测量精确度,不受粘附水层的影响收集样品表面的观测数据,如形貌数据。显微镜具有振动探针尖的振动单元、探针尖与样品表面接近或接触时收集观测数据的观测单元、探针尖与样品表面接近或接触时检测探针尖振动状态变化的
共聚焦显微镜的共焦显微技术
共聚焦显微镜有较高的分辨率,而且能观察到样本随时间的变化。因此,共聚焦显微技术在生物学研究领域起着不可或缺的作用。以下为共焦显微技术的几个主要应用方面: (1)组织和细胞中荧光标记的分子和结构的检测: 利用激光点扫描成像,形成所谓的“光学切片”,进而可以利用沿纵轴上移动标本进行多个光学切片的叠加
双重荧光定量PCR探针荧光基团该怎么选择
有干扰的话,在仪器上面就可以看出来,比如说,FAM和VIC,FAM有信号,单独看VIC也肯定有信号,只是低点而已
详述荧光分光光度计测试步骤
详述荧光分光光度计测试步骤应如何正确使用荧光分光光度计来进行测试呢?以下将由上海旦鼎技术人员为您详述:荧光分光光度计详细测试步骤(一)样品准备1.液体样品根据用户提供的技术指标,检查浓度范围是否合适,如果需要稀释,则要考虑所需溶剂类型和稀释倍数。2.固体样品均匀粉末、片状或具有光滑平面的块状样品,均
荧光探针的分类及应用
受到激发光激发后,从激发态单重态回到基态,在紫外-可见-近红外区有特征发光,称之为荧光。荧光性质(激发和发射波长、强度、寿命、偏振等)可随所处环境的性质,如极性、折射率、粘度等改变而灵敏地改变的一类荧光性分子,被称为荧光探针。荧光探针分类很多,可以根据材料属性分为有机和无机探针,可以根据探针尺寸分为
显微镜的使用步骤及方法
1、简介:显微镜是人类这个时期最伟大的发明物之一。在它发明出来之前,人类关于周围世界的观念局限在用肉眼,或者靠手持透镜帮助肉眼所看到的东西。显微镜把一个全新的世界展现在人类的视野里。人们第一次看到了数以百计的“新的”微小动物和植物,以及从人体到植物纤维等各种东西的内部构造。显微镜还有助于科学家发现新
详述环刀法测量土壤的方法与步骤
(1)用人工取土器测定粘性土及无机结合料稳定细粒土密度 ①擦净环刀,称取环刀质量m ,准确至0.1g。 ②在试验地点,将面积约30cmx 30cm的地面清扫干净。并将压实层铲去表面浮动及不平整的部分,达到一定深度,使环刀打下后,能达到要求的取土深度,但不得扰动下层。 ③将定向筒齿钉固定于铲
细胞骨架的荧光探针标记方法
细胞骨架主要有微管(micmtuble, MT),微丝(microfilament, MF),中间丝(intermediate filament, IF三种类型。它们分别由不同的蛋白单体组装而成,其中微管蛋白(tubulin)、肌动蛋白(actin)、波形蛋白(vimentin)等是细胞骨架的重要组
各荧光检测方法简介(流式、荧光显微镜、共聚焦、全内反...
很多细胞实验都要检测荧光,为方便大家选择合适的方法,在此简单说一下各种荧光检测方法的特点。不足的地方,欢迎大家补充:1、流式,优点是速度快,非常适合做大数量统计,且样品只被检测一次,完全不用担心荧光淬灭的问题。缺点是只能检测荧光的有无、强度大小,无法提供空间定位信息,无法做荧光定位变化的实验;由于样
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项
激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically p
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项
激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically prod
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项
(1)开启仪器电源及光源:一般先开启显微镜和激光器,再启动计算机,然后启动操作软件,设置荧光样品的激发光波长,选择相应的滤光镜组块。以便光电倍增管(photomultipliertube,PMT)检测器能得到足够的信号结果。使用汞灯的注意事项同普通荧光显微镜。 (2)设置相应的扫描方式:在目
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤及注意事项
激光扫描共聚焦显微镜可测定的样品种类很多.包括生物材料、组织(切片)、细胞(亚细胞)结构等。样品中荧光的来源主要有如下几种:自发荧光(autofluorescence)、荧光染色、免疫荧光、荧光蛋白、诱发荧光(induced fluorescence)及酶致荧光(enzymatically pr
扫描探针显微镜和扫描探针显微镜的光轴调整方法
扫描探针显微镜和扫描探针显微镜的光轴调整方法。提供能够使用配置于扫描探针显微镜的物镜来自动地进行光杠杆的光轴调整的扫描探针显微镜和其光轴调整方法。是一种扫描探针显微镜(100),所述扫描探针显微镜(100)具备:悬臂支承部(11),以规定的安装角(θ)安装悬臂(4);移动机构(21),对悬臂的位置进
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤
观察步骤及仪器操作 根据实验要求制备样品完毕后。即可进行观察。基本步骤如下: (1)开启仪器电源及光源:一般先开启显微镜和激光器,再启动计算机,然后启动操作软件,设置荧光样品的激发光波长,选择相应的滤光镜组块。以便光电倍增管(photo multiplier tube,PMT)检测器能得到足够的信
激光扫描共聚焦显微镜操作步骤
1.观察步骤及仪器操作 根据实验要求制备样品完毕后。即可进行观察。基本步骤如下: (1)开启仪器电源及光源:一般先开启显微镜和激光器,再启动计算机,然后启动操作软件,设置荧光样品的激发光波长,选择相应的滤光镜组块。以便光电倍增管(photo multiplier tube,PMT)检测器能得到
钙离子荧光探针:比值型荧光探针
前面我们介绍了荧光指示剂法可以将Ca2+检测的实验与其他技术结合使用,如可以与流式细胞仪、荧光分光光度计、或者荧光显微镜进行联合检测 。紫外光型主要包括Quin-2、Indo-1、Fura-2等,数量较少,可见光型数目较多,包括Fluo-3、钙黄绿素、Rhod-2等。荧光指示剂根据测光原理和数据
详述蒸馏实验的操作步骤
加料:把待蒸馏液通过玻璃漏斗小心倒入蒸馏瓶中,要注意不使液体从支管流出。加入几粒助沸物,安好温度计,温度计应安装在通向冷凝管的侧口部位。再一次检查仪器的各部分连接是否紧密和妥善。 加热:用水冷凝管时,先由冷凝管下口缓缓通入冷水,自上口流出引至水槽中,然后开始加热。加热时可以看见蒸馏瓶中的液体逐
PCR荧光标记选择探针法还是染料法?
特异性荧光标记——探针法: 是目前临床最常用的方法,在加入一对引物的同时再加入一对探针,特异性好,这里列举的是TaqMan水解探针:一段与靶基因特异性结合的序列,分别在5’端加入荧光报告基团,3’端加入荧光淬灭基团。其核心是利用taq酶的5’-3’外切酶活性切断探针,使得使荧光报告基团和荧