PeproTech细胞因子和重组蛋白溶解必读（二）
有用户会问，若想保证溶解液与冻干粉充分混匀，以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解，该怎么办呢？ 答：多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的，一般我们用移液枪的枪头轻吹几下，即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。 对于不易溶解的细胞因子或蛋白，PeproTech会在说明书中进行备注(Note)。如在重组人IL-13(产品编号：200-13)的说明书中您会看到：Slow to dissolve (缓慢溶解)，在重组人IL-11(产品编号：200-11)的说明中会看到： This solution is slow to dissolve.(该溶液溶解缓慢)。这种情况下，您最好能将要溶解的细胞因子或重组蛋白放在水平摇床(shaker)上低速摇一段时间，促使细胞因子或重组蛋白完全溶解。 &n......阅读全文
PeproTech细胞因子和重组蛋白溶解必读（二）
有用户会问，若想保证溶解液与冻干粉充分混匀，以实现细胞因子或重组蛋白的完全溶解，该怎么办呢？ 答：多数细胞因子或重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的，一般我们用移液枪的枪头轻吹几下，即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。 对于不易溶解的细胞因子或蛋白，PeproTech会在说明书中进行备注
PeproTech细胞因子和重组蛋白溶解必读（一）
我们知道，的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20或-80℃条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很多用户在实际使用中
PeproTech细胞因子和重组蛋白溶解正确使用方法
PeproTech的所有细胞因子和蛋白均为冻干粉，这使得运输非常便捷，只要常温即可。而且，细胞因子和蛋白冻干粉非常稳定，在-20o C或-80o C条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解，然后以液体形式加到培养体系或注射入动物体内。溶解步骤非常关键，因溶解不好会导致细胞因子或蛋白的失活，这也是很
peprotech细胞因子的溶解方法
PeproTech细胞因子中不含载体蛋白（Carrier Protein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白
重组细胞因子溶解
1．离心（Centrifuge）：高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。2．溶解（Reconstitution）：用去离子水或其它缓冲液（根据说明书要求进行选择）溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/ml)。溶解时不可
peprotech细胞因子注意事项（二）
四、所需试剂1、细胞表面染色的荧光标记的单抗试剂依据实验需要选择特殊表面标志CD45圈定所有淋巴细胞CD3 圈定T淋巴细胞CD4 圈定T辅助淋巴细胞亚群CD8 圈定T抑制淋巴细胞亚群CD19/或CD20圈定B淋巴细胞CD56圈定NK淋巴细胞CD14圈定单核细胞2、荧光标记的细胞因子抗体R&D提供FI
PeproTech细胞因子溶解使用说明—活性单位篇
PeproTech的细胞因子都是无载体蛋白的冻干粉状态，规格都是质量单位如μg。同时细胞因子又是有生物活性的蛋白，在文献中经常会看到细胞因子的工作浓度用U/mL来表示，比如Human PDGF-BB的使用浓度是120 U/mL。那么，如何对PeproTech的细胞因子进行活性单位U和质量单位的换算呢
重组细胞因子溶解小帖士
1．离心（Centrifuge）：高速离心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速离心 (2, 000 rpm) 5 分钟。 2．溶解（Reconstitution）：用去离子水或其它缓冲液（根据说明书要求进行选择）溶解至说明书要求的浓度 (一般为 0.1-1.0 mg/ml)。溶解时不
peprotech细胞因子注意事项（五）
八、问题与解答问题原因解决注释无CD69胞内染色细胞未激活激活剂制备不当，见激活剂制备储存一节。PMA Ionomycin激活4小时后CD3 T淋巴细胞CD69阳性率应>90%使用了错误的抗凝剂应使用肝素钠，不要使用肝素锂，避免使用ACD与EDTA等络合钙的抗凝剂。淋巴细胞激活需要Ca，络合Ca的抗
peprotech细胞因子注意事项（三）
五、细胞培养和刺激的基本方法细胞活化的最终结果是产生细胞因子，根据检测指标和标本的不同，研究人员需要选择不同的刺激剂和刺激时间，以获得最佳的实验结果。下表提供了检测一些常用细胞因子的推荐的活化方法。表1、细胞内细胞因子流式检测推荐的阳性对照活化方法检测细胞因子阳性对照刺激方法人IFN-g方法2 (4
peprotech细胞因子注意事项（四）
六、流式检测细胞染色基本过程（以全血为例）1、收获细胞肝素钠抗凝的静脉血，按1：1与培养基混匀，加刺激剂，同时加蛋白转运抑制剂（参照说明书）， 混匀后，37℃，5%二氧化碳培养4-6小时2、阻断Fc受体用于消除非特异性的结合染色① 在小鼠，可使用纯化的FcII/III受体的抗体（CD16/32），按
peprotech细胞因子注意事项（一）
目前检测单个细胞特定细胞因子的表达手段包括：ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（limiting dilution analysis，LDA）和单细胞PCR，应用原位杂交技术和免疫组化方法观察细胞因子蛋白表达及mRNA表达可以识别Th1和Th2细胞，此方法可获得较强的细胞
重组人蛋白细胞因子的研究选择细胞因子
．重组蛋白表达体系 MCE 重组蛋白表达体系主要有：大肠杆菌，酵母细胞，昆虫细胞和哺乳动物细胞。 2．重组蛋白纯度和浓度测定 重组蛋白纯度测定方法：a. SDS-PAGE 测定法；b. HPLC 测定法；c. 银染测定法。重组蛋白浓度测定方法：a. Bradford 蛋白定量测定法；b
重组人蛋白细胞因子的研究选择—细胞因子
1．重组蛋白表达体系MCE 重组蛋白表达体系主要有：大肠杆菌，酵母细胞，昆虫细胞和哺乳动物细胞。2．重组蛋白纯度和浓度测定重组蛋白纯度测定方法：a. SDS-PAGE 测定法；b. HPLC 测定法；c. 银染测定法。重组蛋白浓度测定方法：a. Bradford 蛋白定量测定法；b. BCA 蛋白定
重组细胞因子和蛋白常见问题解答(FAQ)
1．PeproTech细胞因子和蛋白产品的稳定性如何？答：除非在产品说明书中特别注明，PeproTech的所有产品均为冻干粉，它们在室温条件下非常稳定(至少1个月)。尽管如此，我们还是建议您在收到我们的产品后保存于-20oC，以确保蛋白100%的活性。对于大多数蛋白，重悬后在4oC仅能短期保存(约1
19亿美元|赛默飞收购重组蛋白界巨头PeproTech
赛默飞世尔科技Thermo Fisher Scientific (TMO + 1.3%) 宣布它于2021年12月30日以价值近19亿美元的全现金交易完成了对PeproTech的收购。 总部位于新泽西州克兰伯里的私营PeproTech 提供称为重组蛋白的生物科学试剂。 此次收购旨在通过Pepr
各种常见缓冲液的配制方法(在线计算)
磷酸盐缓冲液，Tris缓冲液和柠檬酸缓冲液等是生物学实验中常用的缓冲液，也是PeproTech重组细胞因子和蛋白溶解所需的常用缓冲液。然而，这些缓冲液的配制比较麻烦，尤其当要获得特定pH值的缓冲液时，调节pH值是费力、费时的事情。对于Tris等缓冲液等，pH计是无法准确测量其pH值的。那么，有没有简
重组细胞因子的冻干状态
重组细胞因子的冻干状态与市场上已有的其他蛋白产品不同，PeproTech细胞因子不含carrier protein或其他添加物（如BSA、HAS、蔗糖等），而是以低盐的形式做冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。PeproTech的质控过程确保每管装
细胞因子重组要求及状态
重组细胞因子要求： 1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE， RP-HPLC和质谱（MS）检测其真实性。 2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。 3. 生物活性：进行相应的体外（in vitro）或体内（in vivo
重组细胞因子的状态
市场上主流的重组蛋白产品，多在不含载体蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的条件下，以低盐的形式做冻干处理，因此微量(多以微克计量)的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层，所以建议在收到试剂后，务必于开盖前先离心20-30秒，使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于冻干馆的
重组细胞因子的要求
1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。4. 蛋白含量：通过紫
细胞因子重组要求及状态
重组细胞因子要求： 1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。 2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。 3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo
细胞因子重组要求及状态
重组细胞因子要求：1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。4.
特殊物种的细胞因子的选择与攻克难题判断种属交叉反...
特殊物种的细胞因子的选择与攻克难题判断种属交叉反应的关键细胞因子是由免疫细胞（淋巴细胞、单核-巨噬细胞等）和相关细胞（成纤维细胞、内皮细胞等）产生的调节细胞功能的高活性多功能多肽或蛋白质分子，通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学作用。不同哺乳动物在进化过程中其分泌的细胞因子氨基酸序列存在差异，这就告
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
实验方法原理分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶解的包含体，因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法，还是有许多策略适用于包含体蛋白的溶解。本方案描述的就是这些策略
从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验
基本方案 实验方法原理 分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白，因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀，形成难溶
细胞因子的重组要求及状态
重组细胞因子要求： 1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。 2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。 3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo
重组细胞因子分类及应用概述
一、细胞因子的概念 细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质，通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响
细胞因子的重组要求及状态介绍
重组细胞因子要求： 1. 真实性：重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析；必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。 2. 纯度：应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。 3. 生物活性：进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo