LoWry法对可溶性蛋白含量检测原理

LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,使之生成磷钨蓝和磷钼蓝的混合物。这种溶液蓝色的深浅与蛋白的含量成正相关,所以可以用于蛋白质含量的测定。 LoWry法除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键的显色效果更强烈,其显色效果比单独使用酚试剂强3-15倍,约是双缩脲法的100倍。由于肽键显色效果增强,从而减少了因蛋白质种类不同引起的偏差。LoWry法适于微量蛋白的测定,对多个样品同时测定较为方便。但对不溶性蛋白和膜结合蛋白必须进行预处理(如加入少量的SDS)。......阅读全文

细胞总蛋白质含量分析

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含锌蛋白酶的含量与分布

植物正常含锌量为25~150mg·kg-1(干重)。其含量常因植物种类及品种不同而有差异。植物各部位的含锌量也不相同,一般多分布在茎尖和幼嫩的叶片中。据中国科学院植物研究所的试验结果表明,正常番茄植株顶芽含锌量最高,叶片次之,茎最少;整个植株中锌的分布呈由下而上逐渐递增的趋势。植物根系的含锌量常高于

如何选择合适的蛋白含量测定方法

选择一种蛋白测定方法时,需要考虑两个重要因素:缓冲液的化学组成和检测的蛋白量。基于dford方法的Quick Start Bradford和Bio–Rad 蛋白测定灵敏度高,可以兼容糖、巯基乙醇、DTT等。而对于去污剂和NaOH这两种干扰Bradford测定的物质,DC蛋白测定却可以兼容。如果蛋白是

谷朊粉中粗蛋白含量的测定

方案优势       Kll00/Kll00F全自动凯氏定氮仪是基于经典的凯氏定氮法而设计的全自动蒸馏、滴定测氮系统。全新的Kll00/Kll00F开发团队集合了业内顶级的科研精英,作为凯氏定氮仪“98”系列的升级替代机型,Kll00/Kll00F具备了至上统治力的核心控制系统,高端的整机自动化

如何根据标准曲线计算样品蛋白含量

把od值代人回归方程,算出x值为样品浓度,浓度的单位要看看你做标准曲线的标准品浓度单位了,要和标准品的浓度单位一样,计算出来然后乘以样品的稀释倍数,就是你提取蛋白的浓度啦。具体的你自己算一下吧。

细胞总蛋白质含量分析

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如何根据标准曲线计算样品蛋白含量

把od值代人回归方程,算出x值为样品浓度,浓度的单位要看看你做标准曲线的标准品浓度单位了,要和标准品的浓度单位一样,计算出来然后乘以样品的稀释倍数,就是你提取蛋白的浓度啦。具体的你自己算一下吧。

如何根据标准曲线计算样品蛋白含量

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蛋白质含量测定实验——Bradford法

蛋白质含量测定实验可以用于:(1)测定蛋白质浓度;(2)检测所提取的蛋白质含量。实验材料蛋白质试剂、试剂盒牛血清NaCl考马斯亮蓝仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1.  分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 ul,同时以两管

如何根据标准曲线计算样品蛋白含量

把OD值代人回归方程,算出X值为样品浓度,浓度的单位要看看你做标准曲线的标准品浓度单位了,要和标准品的浓度单位一样,计算出来然后乘以样品的稀释倍数,就是你提取蛋白的浓度啦。具体的你自己算一下吧。

快速测定总氮/蛋白质含量

饲料为动物的成长提供必需的蛋白质原料,如肌肉组织,生物酶类,激素类,奶类及毛发类等。动物摄取蛋白质的含量要求非常严格,过多摄取会导致氨基酸缺乏并产生不必要的能量消耗。通过测定氮元素的含量,精确测定动物饲料中蛋白质的含量,可有效保证所饲养动物的高品质生长。 凯氏定氮法已经无法满足国际通用的安

胃蛋白酶的含量测定方法

照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定盐酸溶液取1mol/L盐酸溶液65ml,加水至100ml供试品溶液取本品适量,精密称定,加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2~0.4单位的溶液。对照品溶液取酪氨酸对照品适量,精密称定,加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含0.5mg的溶液。测定

蛋白质含量的测定方法(三)

(二)Bradford法的优缺点1、Bradford法的突出优点是:(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1g。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)测定快速、简便,

Bradford法蛋白质含量的测定

原理:这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下,可配成淡红色的溶液,当与蛋白质结合后,产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm处有最大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可检测595nm的光吸收值的大

细菌胞外蛋白含量的测定方法!

一、实验原理这种蛋白质测定法是的方法之一.过去此法是应用泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难,近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色反应产生深兰色的原因是:在碱性条件下

蛋白质含量的测定方法(二)

(二)试剂与器材1.试剂(1)试剂甲:(A) 10克Na2CO3,2克NaOH和0.25克酒石酸钾钠(KNaC4H4O6·4H2O)。溶解于500毫升蒸馏水中。(B) 0.5克硫酸铜(CuSO4·5H2O)溶解于100毫升蒸馏水中,每次使用前,将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲。(2)试剂乙

蛋白质含量的测定方法(一)

实验原理:蛋白质含量测定法,是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法,即定氮法、双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法,即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法

菠萝蛋白酶的含量测定方法

精密量取供试品溶液1.0ml,置具塞试管(15mm×130mm)中,于(37±0.5)℃水浴预热5分钟,精密加入(37±0.5)℃预热的底物溶液(取硅胶干燥器中干燥至恒重的酪蛋白0.6g,精密称定,置烧杯中,加0.05mol/L磷酸氢二钠溶液80ml,水浴中加热溶解,放冷,用1mol/L盐酸调节pH

细胞蛋白质的含量是多少

应该说不同细胞中含量不同的吧,质量分数在7-10%。但可以这样理解,一般的细胞含量最多的有机化合物是蛋白质,或者说占细胞干重最多的物质是蛋白质,鲜重最多的当然是水。

食品中蛋白质含量怎么测

7种蛋白质含量的测定方法一、直接测定UV法这种方法是在280nm波长,直接测试蛋白。选择Warburg公式,光度计可以直接显示出样品的浓度,或者是选择相应的换算方法,将吸光值转换为样品浓度。蛋白质测定过程非常简单,先测试空白液,然后直接测试蛋白质。从而显得结果很不稳定。蛋白质直接定量方法,适合测试较

紫外吸收法测定蛋白质含量

(一)原 理蛋白质分子中含有酪氨酸、色氨酸及苯丙氨酸等残基,它们的结构中具有共轭双键,对紫外光有吸收作用,其最大值在280nm波长处。在此波长附近,蛋白质溶液的光吸收值与其含量(范围是0.1~1.0mg/ml)成正比,因此,280nm的吸光度可用作蛋白质的定量测定。若将已知不同浓度的蛋白质标准溶液在

胰蛋白酶的含量测定方法

照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定底物溶液制成后应在2小时内使用。取N-苯甲酰L精氨酸乙酯盐酸盐85.7mg,加水溶解使成100ml,作为底物原液;取10ml,用磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液13ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液87ml混合,pH值为7.6)稀释成

紫外吸收法测蛋白质含量

蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm 处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的

大豆蛋白的提取与含量测定

序言 蛋白质化学实验蛋白质是一切生物体内重要的组成成份,蛋白质是由二十多种氨基酸以肽键相互联接而成的复杂的高分子化合物,溶于水时形成亲水胶体溶液。在酸碱和酶的作用下,蛋白质被水解成胶胨肽最后形成氨基酸。蛋白质分子依靠氢键、盐键等副价键维持一定的空间构型。在各种物理化学因素影响下,由于副价键的破裂,使

比色方法的主要类型

一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。Lowry 法:以最早期的Biuret 反应为基础,并有所改进。蛋白质与Cu2 反应,产生蓝色的反应物。但是与Biuret 相比,Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂;反应需要的时间较长;容易受到非蛋白物质的影响;含E

蛋白质含量测定实验——考马斯亮蓝法

实验方法原理考马斯亮蓝显色法的基本原理是根据蛋白质可与考马斯亮蓝G-250 定量结合。当考马斯亮蓝 G-250 与蛋白质结合后,其对可见光的最大吸收峰从 465nm 变为 595nm。在考马斯亮蓝 G-250 过量且浓度恒定的情况下,当溶液中的蛋白质浓度不同时,就会有不同量的考马斯亮蓝 G-250

常用蛋白质浓度测定方法汇总

蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础。目前常用的蛋白测量的方法主要有BCA法、考马斯亮蓝法(Bradford)和Lowry法等。BCA法  原理在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+(biuret reaction)

粗蛋白测定仪参与杂交谷子粗蛋白含量分析

蛋白质含量是谷子营养品质的主要构成成分之一,在谷子品质育种方面,人们希望借助粗蛋白测定仪来提高谷子的蛋白质含量。谷子的蛋白质是一种比较优质的植物蛋白质,不仅氨基酸含量较高,而且氨基酸的组成也比较合理,人体必需氨基酸含量比其他主要粮食作物都高。而且谷子具有营养全面平衡、易消化等优点,是孕妇、儿童和病人

椰子粗蛋白含量检测仪器——蛋白质测定仪

  椰子在海南的种植范围很广泛,也是主要种植的水果之一。但是,对于椰子的开发利用还是远远不够的。要想合理的利用当地的资源,就要对椰子进行详细的了解与研究,从中寻找更为合适的开发项目。对于椰子的粗蛋白含量之前一直没有很明确的检测研究过。就采用蛋白质测定仪对其进行准确的测试。    将两个园底烧瓶编号,