LoWry法对可溶性蛋白含量检测原理
LoWry法是双缩脲法(Biuret)和福林酚法(Folin-酚)的结合与发展。其原理是蛋白质溶液用碱性铜溶液处理后,碱性铜试剂与蛋白质中的肽键作用产生双缩脲反应,形成铜—蛋白质的络合盐。再加入酚试剂后,在碱性条件下,这种被作用的蛋白质上的酚类基团极不稳定,很容易还原酚试剂中的磷钨酸和磷钼酸,使之生成磷钨蓝和磷钼蓝的混合物。这种溶液蓝色的深浅与蛋白的含量成正相关,所以可以用于蛋白质含量的测定。 LoWry法除使肽链中酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸等显色外,还使双缩脲法中肽键的显色效果更强烈,其显色效果比单独使用酚试剂强3-15倍,约是双缩脲法的100倍。由于肽键显色效果增强,从而减少了因蛋白质种类不同引起的偏差。LoWry法适于微量蛋白的测定,对多个样品同时测定较为方便。但对不溶性蛋白和膜结合蛋白必须进行预处理(如加入少量的SDS)。......阅读全文
玉米粗蛋白含量的分析
不同的基因组织是具有不同的蛋白质含量的,整个植株的蛋白质含量和我们的产量之间是存在着很明显的关系的,我们通过粗蛋白测定仪分析得出主要有正相关、负相关以及没有相关这三种。叶片和整个植株的蛋白质含量是会随着生长发育逐渐下降的,并且叶片在前期生长的时候粗蛋白含量是最高的,后期就会慢慢减少。各生
α1—酸性糖蛋白含量测定
中文名称:α1—酸性糖蛋白含量测定 英文名称:α1—AG正常参考值:320—980mg/L 临床意义: α1—AG含量增高:见于烧伤、急慢性炎症、尿毒症、肾病、肺癌、肝病等疾病。 α1—AG含量降低:见于肝细胞严重破坏、鼻咽癌、卵巢Ca、营养不良等病。
蛋白质含量测定实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 牛血清NaCl考马斯亮蓝仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 分别在两组微量离心管中各加入0.5 mg/ml 牛血清白蛋白,以 0.15 mmol/l NaCl补足至100 μl,同时以两管100 μl 的0.15 mmol/l NaCl作空白对照。2. 每管各加
内脏蛋白质含量检测人体内脏蛋白质含量怎样检测
蛋白质测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定。蛋白质是构成人体细胞和组织的重要成分,蛋白质测定是生物化学和分子生物学研究中最常用、最基本的分析方法之一。人体正常值一般是 60~80 g/L。人的身体是由水分、蛋白质、无机盐、脂肪等成分构成,身体成分的不均衡将会导致肥胖、营养不良、骨质疏松、水
肝药酶Lowry比色法测定
Lowry比色法是蛋白质测定最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深
肝药酶Lowry比色法测定
实验材料肝微粒体蛋白试剂、试剂盒碳酸钠无水硫酸铜氢氧化钠蒸馏水Folin 试剂牛血清蛋白铜试剂仪器、耗材分光光度计试管试管架移液枪离心管离心机Lowry比色法是蛋白质测定最灵敏的方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白
影响考马斯亮蓝法测定蛋白质的因素有哪些
1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多.(2)测定快速、简便,只需加一种试剂.完成一个样品的测定,只需要5分钟左右.由于染料与蛋白
考马斯亮兰法的实验方法的优缺点
优点(1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg。这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多。(2)测定快速、简便,只需加一种试剂。完成一个样品的测定,只需要5分钟左右。由于染料
影响考马斯亮蓝法测定蛋白质的因素
1)灵敏度高,据估计比Lowry法约高四倍,其最低蛋白质检测量可达1mg.这是因为蛋白质与染料结合后产生的颜色变化很大,蛋白质-染料复合物有更高的消光系数,因而光吸收值随蛋白质浓度的变化比Lowry法要大的多.(2)测定快速、简便,只需加一种试剂.完成一个样品的测定,只需要5分钟左右.由于染料与蛋白
总蛋白S含量测定或游离蛋白S含量测定正常参考值及临...
总蛋白S含量测定或游离蛋白S含量测定正常参考值及临床意义中文名称:总蛋白S含量测定或游离蛋白S含量测定 英文名称:TPS或FPS 正常参考值:TPS为19.0—26.8ug/ml,FPS为7.2—11.2ug/ml 临床意义: TPS或FPS含量降低:见于肝功能障碍、口服抗凝剂、先天
细菌胞外蛋白含量测定实验
(一)实验原理这种蛋白质测定法是最ling敏的方法之一.过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代.此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度.这两种显色
蛋白质含量的测定实验
实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极不稳定, 易被酚类化合物还原成蓝色(蛋白质中的酚基将磷钼酸-磷钨酸还原成蓝色复合物)。在一定条件下, 蓝色强度与蛋白质的量成正比, 范围约在25~250 μg/ ml 蛋白质浓
大麦蛋白含量测定新方法
麦芽大麦的蛋白质含量很重要,因为它影响到麦芽酿造、酿造和终产品。凯氏定氮法是一种基于传统湿化学的大麦蛋白质测定方法。经典凯氏定氮法的替代方法是杜马斯燃烧技术,创新的干化学,易于使用和高度准确。这两种技术都被批准用于测定大麦中的氮和蛋白质含量。 这两种技术都保证了优良的重复性,低RSD值就
食品中蛋白含量测定的意义
蛋白质(protein)是生命的物质基础,是有机大分子,是构成细胞的基本有机物,是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。人体内酸碱平衡、水平衡的维持,遗传信息的传递、物质的代谢及转运都与蛋白质有关。人及动物只能从食物中得到蛋白质及其分解产物来构成自身的蛋白质,因此蛋白质是人体的重要营养物质
关于钙防卫蛋白的含量介绍
不同部位钙卫蛋白的含量不同。健康成人血浆钙卫蛋白的含量为0.1 ~ 0.6 mg/L;病毒感染者的含量为0.1~ 11.4 mg/L;细菌感染者为0.6~11.0 mg/L [4] 在健康成人中, 男性血浆钙卫蛋白的含量明显高于女性 [5] 粪便钙卫蛋白的含量大约是血浆钙卫蛋白含量的6倍 [6]
蛋白质含量的测定实验
FOLIN酚法 考马斯亮蓝法 实验方法原理 FOLIN 酚法所用的试剂有两部分组成。试剂甲可与蛋白质中的肽键起显色反应, 试剂乙在碱性条件下极
蛋白质的定量测定实验(Lowry法、考马氏亮蓝G-250染色法..
2、血清蛋白质测定稀释血清(或其它蛋白样品溶液),准确吸取0.1ml血清,置入50ml容量瓶中,用生理盐水稀释至刻度(此为稀释500倍,其它蛋白样品酌情而定)。再取三只试管,分别标以1、2、3号,按下表操作。混匀后室温放置15分钟,在595nm波长比色,计算蛋白质浓度。
蛋白质测定方法
蛋白质测定方法在生化研究中经常涉及到,它是很多实验的基础。因此,了解蛋白质测定方法相当重要。目前,常用的蛋白质测定方法有 以下五种方法:凯氏定氮法,双缩尿法(Biuret法)、Folin-酚试剂法(Lowry法)、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford法)。在这 五种测定法中,考马斯亮蓝法(Br
蛋白质定量实验_碱性铜还原分析法
试剂、试剂盒Folin-Ciocalteu 试剂硫酸铜试剂碱性铜试剂实验步骤碱性铜还原分析法 (Lowry 法)(Lowryetal.,1951) 和其他能够增强检测性能的方法都是基于一个包括两个步骤的过程。首先,双缩脲反应涉及蛋白质在碱性溶液环境中将铜还原(由Cu2+到 Cu+); 随后是反应增强
不同食物中蛋白的蛋白质含量有多少
富含高蛋白的食物有大豆,蛋白质含量大约在35%左右,而且都是吸收、利用率很高的优质蛋白质。瘦肉也是富含蛋白质的食物,蛋白质含量大约为15%~25%左右,不同的肉类蛋白质含量有所不同,但含量都很丰富。而说到蛋白质含量最高的还是蛋白粉,因为一般的蛋白粉蛋白质含量都在70%~80%左右,好一点的蛋白粉蛋白
考马斯亮兰法(Bradford法)测定蛋白浓度实验原理
双缩脲法(Biuret法)和Folin―酚试剂法(Lowry法)的明显缺点和许多限制,促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法(Bradford法),是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到
深芬仪器蛋白质含量检测仪专业快速检测食品蛋白质含量
CSY-SD8蛋白质含量检测仪是根据GB 5009.5-2010《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》研制而成,能够快速检测食品中蛋白质的含量; 蛋白质含量检测仪由光源、比色池、高灵敏度集成光电池、微处理器、全汉字大屏幕液晶屏、嵌入式微型热敏打印机、无线传输模块和集成芯片构成,
考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度的原理
实验原理 考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。
血液中胆固醇含量与大脑中淀粉样蛋白含量有关
最近来自加州大学戴维分校、加州大学伯克利分校和南加州大学的研究人员在JAMA Neurology杂志上发表了一篇题为"Associations between Serum Cholesterol Levels and Cerebral Amyloidosis."的研究报告,指出血液中胆固醇的含量
测定球蛋白含量及白蛋白与球蛋白比例的临床意义
(1)增高:多见于炎症、免疫系统疾病和肿瘤。 1)细菌、病毒、寄生虫引起的急慢性感染:结核病、麻风病、疟疾、黑热病、血吸虫病、病毒性肝炎。 2)自身免疫性疾病:系统性红斑狼疮、硬皮病、风湿热、类风湿性关节炎等。 3)多发性骨髓瘤和淋巴瘤:多发性骨髓瘤是由浆细胞恶性增殖造成的异常高的单一Ig
蛋白质印迹法的测定蛋白质含量
1、制作标准曲线(1 )从-20℃取出1mg/ml BSA,室温融化后,备用。(2) 取18个1.5ml离心管,3个一组,分别标记为0μg,2.5μg,5.0μg,10.0μg,20.0μg,40.0μg。(3 )按下表在各管中加入各种试剂。0μg2.5μg5.0μg10.0μg20.0μg40.0
蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝(Coomassie-Brilliant-Blue)...
实验原理考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点,因而正在得到广泛的应用。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。考马斯亮兰G-250染料
蛋白样品的定量
目前常用比色法测定样品蛋白的含量:Bradford法(考马斯亮蓝法)、Lowry法(Folin-酚试剂法)、 BCA法等。但各有优缺点,大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。收集完蛋白样品后,为确保每个蛋白样品的上样量一致,需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所
细胞总蛋白质含量分析
实验步骤 展开
细胞总蛋白质含量分析
实验步骤展开