xCELLigence系统实时监测低毒性XtremeGENEDNA转染实验(一)

前言 X-tremeGENE DNA Transfection Reagent是一种非脂质体、多组分转染试剂,已被证明可有效转染多种细胞。X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP在有无血清条件下均可进行转染,且细胞毒性低,转染后无需更换培养基。 降低转染试剂本身的脱靶效应是非常重要的:■ 在长时间内保证转染目标基因的高表达率■ 减少死细胞数目及其释放的蛋白酶,能高表达未被消化的目的重组蛋白。■ 获得同转染目标基因生物相关的结果 本研究中,在Hela细胞上进行了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HPTransfection Reagent的细胞毒性和转染效率检测,并与其他试剂进行了比较。 步骤 ■ 细胞毒性使用xCELLigence RTCA MP仪......阅读全文

xCELLigence系统实时监测低毒性XtremeGENE-DNA转染实验(一)

前言 X-tremeGENE DNA Transfection Reagent是一种非脂质体、多组分转染试剂,已被证明可有效转染多种细胞。X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP在有无血清条件下均可进行转染,且细胞毒性低,转染后无需更换培养基。 降低转染试剂本身的脱靶效应是非常重要的

xCELLigence系统实时监测低毒性XtremeGENE-DNA转染实验(二)

■  终点法分析,转染约72h后通过细胞增殖试剂盒WST-1分析确定细胞活性(图3)。与X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP Transfection Reagent相比,其他试剂转染细胞后,显著降低代谢活力,显示出细胞毒性效应。图3:比较罗氏X-tremeGENE 9和X-tr

xCELLigence系统实时检测神经毒性(一)

xCELLigence系统持续检测神经细胞培养Sebastian Diemert, Julia Grohm, Svenja,Tobaben, Amalia Dolga, Carsten Culmsee德国,马尔堡大学,药理学与临床药学研究所摘要:为了研究类神经元细胞HT-22,及原代培养大鼠皮质神经

xCELLigence系统实时检测神经毒性(二)

1.5 荧光与光学显微镜    在PEI包被 IbiTreat  µ-Slide 8-孔反应板(德国Munich,Ibidi) 上培养皮质神经元细胞,培养 6 天。然后,将培养细胞固定于 +4°C  磷酸缓冲液(PBS)(pH 7.4) 多聚甲醛中。使用 0.2% Triton X-100/PBS

xCELLigence系统实时检测神经毒性(三)

3.3 原代皮质神经元培养     分离原代大鼠皮质神经元细胞(Primary rat cortical neurons,PCNs),并将其接种于PEI-包被的 E-Plate 96 孔板上,每孔接种的细胞密度不同,接种密度范围为 8000 至 32000 个细胞/孔。如图 3A 所示,PE

转染试剂:Roche

     转染试剂:Roche[选购宝典]现转染市场多个新产品涌现而出,一些旧产品更弦易主。一提起罗氏的转染试剂,大家肯定立马想到Fugene 6/HD。即使Fugene 6/HD不在手,罗氏也毫不畏惧,因为它集合二十年的转染经验,推出了X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP转染试

电穿孔转染-DNA-实验

            实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养液 试剂、试剂盒 Giemsa 染液 甲醇 磷酸盐缓冲液

电穿孔转染-DNA-实验

电穿孔可以有效地转染磷酸钙-DNA 沉淀物等其他方法转染效果不好的细胞系。但是,与其他转染方法一样,未使用过的细胞系进行电穿孔转染的实验条件要经过优化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒Giem

电穿孔转染-DNA-实验

实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒 Giemsa 染液甲醇磷酸盐缓冲液丁酸钠载体 DNA细胞生长培养基仪器、耗材 组织培养皿基因脉冲器 II电穿孔设备与电转化池Sorvall H1000B 转子或类似设备实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

实验材料 指数生长的哺乳动物细胞试剂、试剂盒 DMSO(30%) 含血清培养基Giemsa 染液甲醇Polybrene丁酸钠要转染的 DNA仪器、耗材 最低基础培养基组织培养皿实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度。DMSO(30%)/含血清培养基第 3

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

利用 Polybrene 进行 DNA 转染实验             实验材料 指数生长的哺乳动物细胞

利用-Polybrene-进行-DNA-转染实验

下面讲述的 Polybrene 与 DMSO 转染的方法是 Aubin 等(1997) 方法的改进。利用此方法可以有效地将质粒 DNA 转染中国仓鼠卵巢细胞与角化细胞,产生的转化体比磷酸钙-DNA 沉淀物方法的多 15 倍。但是使用高分子量 DNA 时两种方法的转染效率无明显差别。本实验来源于分子克

Science:实时监测活细胞DNA动态

  来自美国的研究人员开发了一种新方法,研究了活细胞中的DNA损伤及由此造成的染色体易位。这一研究成果发表在8月9日的《科学》(Science)杂志上。   由于正常的细胞过程及辐射等环境因素的影响,活细胞中常常会发生DNA损伤。细胞会不断地修复这些DNA损伤,但是如果修复失败,DNA双链就有可能

xCELLigence-系统内源性GPCRs-细胞功能研究(一)

xCELLigence系统实时评测内源性G-偶联蛋白受体(GPCRs)功能Jeff Irelan 美国圣地亚哥ACEA Biosciences 公司Jonathan H. Morgan 美国弗吉尼亚州Manassas ATCC 产品经理前言    G-偶联蛋白受体(GPCRs),即 7-跨膜蛋白

DNA转染

DNA转染·         Transfection of Mammalian Cells Using Lipofectamine (LTI)·         Guide to Eukaryotic Transfections with Cationic Lipid Reagents (PDF)

生物粒子介导的-DNA-转染实验

下面是拫据 Horch 等(1999)、Sanford 等(1993)、主要基因枪生产商的出版物(US/EG Bulletins 1688 and 2087;Bio-Rad) 以及 Steve Finkbeiner(University of California,San Francisco) 建立

生物粒子介导的-DNA-转染实验

                    生物粒子介导的 DNA 转染实验             试剂、试剂盒 CaCl2 乙醇

生物粒子介导的-DNA-转染实验

试剂、试剂盒 CaCl2乙醇甘油亚精胺质粒DNA细胞生长培养基仪器、耗材 基因枪金或钨粒子镜头纸微量离心管需转染的细胞或组织实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录1。稀释贮存液至所需浓度CaCl2(2.5mol/L)乙醇未曾打开过的纯乙醇一瓶。乙醇有吸湿性,在空气中会吸收水分。在

脂染介导的-DNA-转染实验

            实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养物 试剂、试剂盒 脂染试剂 NaCl 枸橼酸钠

脂染介导的-DNA-转染实验

下述方法是 Mark Evans 所研究的一种方法的改进(Alexion Pharmaceuticals,New Haven,Connecticut)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养物试剂、试剂盒脂染试剂N

固体在线水分实时监测系统简介

  固体在线水分实时监测系统代表了当前水份检测技术的最新科技,它采用高频率波检测技术测量物质中游离水份的含量,介质可视化(介可视),过程自动化,已经成功地被应用到许多工艺过程当中,具体包括:糖、烟草、粮食、麦芽、面粉、煤炭、沙子、刨花、干燥食品、肥料、粉末、颜料、塑料颗粒、工艺环节的填加补充材料、建

环境实时监测系统有哪些特点?

环境实时监测系统主要应用于建筑扬尘、沙石场、堆煤场、桔杆焚烧等无组织烟尘噪声污染源排放及居民区、商业区、道路交通、施工区域等的环境空气质量的在线实时的自动监控,并能通过摄像头抓拍,所得数据均能通过有线或无线网络及时传递到数据平台便于管控。该系统还可与各种污染治理装置联动,以达到自动控制的目的。该系统

全在线VOCs实时监测系统简介

  最近几年,多场罕见的大范围雾霾笼罩着我国,从华北到东南沿海甚至是西南地区,已陆续有25个省份、100多座大中城市不同程度出现雾霾天气,覆盖了我国将近一半的国土。经研究表明,我国的雾霾形成一个主要元凶是来自于大气中具有光化学反应性能的挥发性有机物的“二次污染”。挥发性有机化合物来源广泛,

土壤墒情实时监测系统优点介绍

土壤墒情实时监测系统可以对墒情与旱情进行实时的监测,为农业生产和农业的进一步发展做出重要的贡献。本文主要为大家简单介绍一下,该系统的应用优势。 1.土壤墒情实时监测系统是一种快速测定土壤含水量的方法之一,相对不受土壤类型的影响,不损坏土体,适合于表层和剖面上的重复连续测定,且分辨率高,精度好。 2.

固体在线水分实时监测系统的特点

  *以高分辨率和高精度实现极快速检测  *可测量物料核心部位水分  *集成温度补偿功能  *实现数字测量值的评估与传输  *配件与传感器耐用可靠,操作高度安全  *使用键盘和显示器实现便捷的调节与处置  *在传送带、螺旋输送机、管道、滑槽等上安装较简单

在线实时微生物监测系统优势

OWBA 工作组相信,制药公司可以从在线实时微生物监测系统中获益,包括:♥减少采样人工、常规测试和材料,降低成本♥更少的样品处理、更高的灵敏度♥通过实时监控,实现更好的过程控制和产品安全性♥实时放行生产用水、中间体和过程缓冲液/溶液,实现自动化控制♥通过验证系统性能,减少蒸汽消毒频率

空气质量在线实时监测系统

空气质量监测系统  空气质量监测系统顺应了当前人类对小气候环境下的空气质量进行实时监测的趋势和要求,可实时监测并远传空气质量参数。空气质量监测系统能够存储数据到SD数据卡上,可以通过GSM模块,RF无线电,以太网或其他通讯方式进行数据实时远程传输。  一、空气质量监测系统的系统架构  1 系统结构 

害虫远程实时监测系统性能特点

害虫远程实时监测系统是新一代害虫自动检测系统,系统主要运用电子机械技术、无线传输技术、物联网技术、生物信息素技术,构建出一套害虫监测及预警系统。该系统集害虫诱捕和计数、环境信息采集、数据传输、数据分析于一体,实现了害虫的定向诱集、分类统计、实时报传、远程检测、虫害预警的自动化、智能化。具有性能稳定、

害虫远程实时监测系统监视害虫的“一举一动”

虫害的发生是一个群体性活动,单个的害虫并不能够对农作物造成很大的威胁,但是不少害虫的繁殖能力较强,零星的害虫很有可能最后就会演变成群发事件。因此在农业虫害防控中,展开对害虫的虫情调查和监测,是防止虫害大面积发生,以及实现绿色控害的有效前提。应用害虫远程实时监测系统“监视”害虫的“一举一动”,可以极大

荧光传感器实时监测DNA损伤及修复

荷兰乌得勒支大学研究人员开发出一款全新荧光传感器,可在活细胞乃至活体生物中实时监测DNA损伤及修复过程,为癌症研究、药物安全测试和衰老生物学等领域提供了重要的新工具。相关成果发表于新一期《自然·通讯》杂志。理查德·卡多佐·达席尔瓦博士(左)和乌得勒支大学的图恩凯·鲍贝克教授。图片来源:乌得勒支大学现