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原代细胞核仁的制备

试剂和器材: 1. 悬浮缓冲液:0.34mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl,pH7.5;2. 密度阻滞溶液:0.88mol/L蔗糖、0.05mmol/L MgCl2、10mmol/L Tris-HCl,pH7.5;3. 按要求向溶液中加入蛋白酶抑制剂;4. 吊桶式低温低速或高速离心机;5. 超声发生器;6. 光学显微镜(相差或普通光学显微镜);实验方法: 所有操作须在0—4℃完成。1. 将纯化的原代细胞细胞核溶于悬浮缓冲液中;2. 超声处理悬液10—15s,中间间隔30—40s;3. 用1g/L美蓝染色,通过相差或普通光学显微镜监测核的破裂。通常原代细胞细胞核完全破裂需要40—60s的超声处理;4. 在离心管中,将超声处理物加入到一半体积的密度阻滞......阅读全文

病理名词解释大全(八)

141. 点状坏死(spotty necrosis):肝小叶内散在的灶状肝细胞坏死,每个坏死灶仅累及1个至几个肝细胞。同时在该处伴有炎细胞浸润。142. 碎片状坏死(piecemeal necrosis):坏死的肝细胞呈带片状或灶状连接状,常见于肝小叶周边的肝

浙大长江特聘教授彭金荣PLOS发表新成果

  2016年9月22日,国际著名学术杂志《PLOS Biology》上在线发表浙江大学彭动物科学学院教授金荣实验室的最新学术成果,题为“Phosphorylation of Def Regulates Nucleolar p53 Turnover and Cell Cycle Progressio

细针吸取细胞检查及临床应用

细针吸取细胞学的优点为:①操作简便易行。②安全,副作用少。③诊断快速。④诊断准确率很高。⑤应用范围广泛。细针吸取细胞学的缺陷:不能全部替代病理组织学诊断 ①提供细胞标本量少,但仍有一定假阳性。②对肿瘤的分类和分型仍不够准确。③对某些病变和肿瘤,如交界性肿瘤、淋巴瘤、内分泌器官的肿瘤及病变等的诊断有一

昆明动物所等揭示核仁应激导致脂肪积累机理

  脂滴(lipid droplets)是重要的细胞器,对维持细胞正常的能量代谢和生理功能至关重要。脂滴与其它细胞器相互作用,响应细胞内外环境变化,动态调节细胞的脂类代谢和能量平衡。当细胞器功能改变时,不仅会引起细胞器应激反应(如内质网非折叠蛋白反应、线粒体非折叠蛋白反应),还将导致能量代谢变化(肥

昆明动物所等揭示核仁应激导致脂肪积累机理

  脂滴(lipid droplets)是重要的细胞器,对维持细胞正常的能量代谢和生理功能至关重要。脂滴与其它细胞器相互作用,响应细胞内外环境变化,动态调节细胞的脂类代谢和能量平衡。当细胞器功能改变时,不仅会引起细胞器应激反应(如内质网非折叠蛋白反应、线粒体非折叠蛋白反应),还将导致能量代谢变化(肥

上海生科院发现长非编码RNA对细胞核仁功能重要调控机制

  5月5日,国际学术期刊《细胞》(Cell)杂志发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所陈玲玲研究组关于长非编码RNA的最新研究成果:SLERT regulates DDX21-rings associated with Pol I transcription,该成果揭示了长非

Cell:发现长非编码RNA对细胞核仁功能的重要调控机制

  5月5日,国际学术期刊《细胞》(Cell)杂志发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所陈玲玲研究组关于长非编码RNA的最新研究成果:SLERT regulates DDX21-rings associated with Pol I transcription,该成果揭示了长非

细胞的健康是通过其核仁的两种移动方式来维持?

  最近,科学家发现,细胞的健康是通过其核仁的两种移动方式来维持的。报告称,这种双重运动增加了我们对有助于健康细胞功能的理解,并指出了其机制的破坏如何影响人类健康。  纽约大学物理系助理教授,这项研究的高级作者亚历山德拉·齐多夫斯卡(Alexandra Zidovska)解释说:“核仁功能失调可能导

乳腺针吸细胞检查

  乳腺疾病虽以良性者居多,但乳腺癌的发病就绪亦相当高,且近年来呈上升趋势,用细胞学方法诊断乳腺癌,近10余年来进展较大,确诊率达90%以上,乳腺癌位于体表,较易发现,细胞学检查取材简便,有利于早期诊断为鉴别弥漫性化脓性乳腺炎和伴有炎症的乳腺癌,针吸细胞学检查当然双切取活检为好。还有不少文

Science发文揭示细胞核中核仁的新功能!

  核仁是细胞核中一个众所周知的结构,在光镜下很容易看到。这种核结构被认为是核糖体产生的地方。一项新的研究表明,核仁也是蛋白质质量控制的一个部位。  当细胞受到压力时,蛋白质容易发生错误折叠和聚集。为了防止蛋白质聚集,一些蛋白质被暂时储存在核内。慕尼黑大学实验物理学教授、马克斯·普朗克生物(MPI)

8篇最新Science研究论文揭示生命科学最新研究成果

  1.Science:我国科学家揭示人类早期胚胎发育中的组蛋白修饰重编程  doi:10.1126/science.aaw5118  组蛋白修饰调节基因表达和发育。在一项新的研究中,为了解决在人类早期发育中组蛋白修饰如何发生重编程,中国清华大学生命科学学院的颉伟(Wei Xie)课题组、郑州大学第

胸腔积液的细胞学检查进展

积液是临床常见症状之一。正确鉴别积液的性质对疾病的诊治预后有重要意义。随着实验室诊断技术的提高,近年来胸腔积液的检测在细胞形态学、细胞染色体及免疫细胞化学等方面都有着较大的进展,为临床提供了更可靠的依据。本文对此作一简要综述。  一、沉渣涂片瑞吉氏染色 瑞吉氏染色能清楚地显示细胞浆成份和细胞核染色质

细胞衰老如何应对

  近年来,细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出,所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』,影响其生物寿命长短。从细胞代数学说(也称细胞分裂次数学说)认为,人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说,无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见,但却容易被操作人员忽略,往往

和血益智方对VD大鼠学习记忆和海马的影响

〔 摘要〕目的  观察和血益智方对VD大鼠行为学和形态学的影响。方法  动物随机分为假手术组和模型组。VD模型制作成功后随机分为和血益智方小剂量组和大剂量组、思尔明组、生理盐水(NS)组。用穿梭箱和水迷宫检测大鼠行为学并作海马 常规染色,光镜观察。 和血益智方、思尔明

和血益智方对VD大鼠学习记忆和海马的影响

目的 观察和血益智方对VD大鼠行为学和形态学的影响。 方法 动物随机分为假手术组和模型组。VD模型制作成功后随机分为和血益智方小剂量组和大剂量组、思尔明组、生理盐水(NS)组。用穿梭箱和水迷宫检测大鼠行为学并作海马 常规染色,光镜观察。 和血益智方、思尔明均能缩短VD大鼠穿

植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察实验

实验方法原理:减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。在这个过程中,染色体复制一次,细胞分裂两次,最终形成的配子染色体数目比母细胞减少一半。雌雄配子受精结合后代又恢复正常的染色体数目,从而保持了物种在遗传上的稳定性;同时由于减数分裂中同源染色体的非姊妹染色单体的交换为后代的变异

植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察实验

实验方法原理 减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。在这个过程中,染色体复制一次,细胞分裂两次,最终形成的配子染色体数目比母细胞减少一半。雌雄配子受精结合后代又恢复正常的染色体数目,从而保持了物种在遗传上的稳定性;同时由于减数分裂中同源染色体的非姊妹染色单体的交换为后代的变异

植物花粉母细胞减数分裂的染色体观察实验

实验方法原理减数分裂是性母细胞在分裂形成配子过程中一种特殊的细胞分裂方式。在这个过程中,染色体复制一次,细胞分裂两次,最终形成的配子染色体数目比母细胞减少一半。雌雄配子受精结合后代又恢复正常的染色体数目,从而保持了物种在遗传上的稳定性;同时由于减数分裂中同源染色体的非姊妹染色单体的交换为后代的变异提

细胞衰老如何应对

近年来,细胞体外培养造成细胞衰老的报导中指出,所有动物细胞皆有其本身的『海佛烈克极限』,影响其生物寿命长短。从细胞代数学说(也称细胞分裂次数学说)认为,人体细胞在培养条件下平均可培养60代。也就是说,无论是原代细胞或是细胞株,在细胞培养过程中细胞衰老现象是存在且常见,但却容易被操作人员忽略,往往在细

淋巴细胞转化试验方法

T细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)或特异性抗原刺激后,可出现代谢旺盛、蛋白质和核酸合成增加、细胞体积增大并能进行分裂的淋巴母细胞,此称为淋巴细胞转化现象。淋巴细胞转化率的高低,可以反映机体的细胞免疫水平,因此,可作为测定机体免疫功能的指标之一。本实验采用形态学方法进行淋

水生所银鲫卵子发生和卵母细胞成熟机制研究获进展

  10月1日,《实验动物学杂志—生态遗传学和生理学》发表了中国科学院水生生物研究所桂建芳研究员主持的实验室关于纺锤素(spindlin)在银鲫卵子发生、卵母细胞成熟和受精过程中的动态分布和功能作用的研究论文(Journal of Experimental Zoology Part A

肿瘤细胞培养

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正

细胞冻存方法及目的

把细胞消化下来(同5)并离心。用配好的冻存液把细胞悬浮起来,分装到灭菌的冻存管里,4℃冰箱30min,-20℃30min,-80℃过夜,写明细胞种类,冻存日期。然后放到液氮灌中保存。 冻存液的配制:50%的完全培养基+40%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加,边滴边摇。 培养细

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

实用哺乳动物细胞培养手册(四)

细胞培养无菌操作基本技术无菌操作技术分为三个部分:工作环境及表面的处理,细胞培养所用玻璃及塑料制品的处理及培养液与培养细胞的处理。工作环境的处理 使用层流超净工作台是最经济有效的手段。超净工作台正常工作时,向下的气流可阻挡外界空气污染物进入超净台。(1)实验前,无菌室及无菌操作台用紫外灯照射 30-

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规

细胞培养技术

实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件  1、实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染

培养细胞形态和培养细胞形态分析

 培养细胞形态   体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。   1、成纤维型细胞   在培

也许长生不老不是梦!

  加州大学圣地亚哥分校的分子生物学家和生物工程师揭示了衰老之谜背后的关键机制:他们分离了细胞在衰老过程中的两种不同途径,并设计了一种新的方式对这些过程进行基因编程以延长寿命。图片来源于网络  这一研究成果7月17日公布在Science杂志上。  我们人类的寿命取决于单个细胞的衰老。为了了解不同的细

识别血细胞的方法和要点

    识别血细胞时一定要细心,根据血细胞的结构和发育演变规律,再来定该细胞的类型。一般按以下程序进行,即细胞的大小形态、边缘是否整齐、有无伪足突出、核浆的比例、浆的多少和色泽、颗粒的有无、性质、多少、大小和分布情况;核的大小形态、核染色质结构及核仁的有无、数目、大小、