时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（三）
脑损伤的组织学评估在一些实验中，成像结果通过脑组织的组织学平估来确定。成像后，动物被灌注肝素化盐水和10%的福尔马林，然后使用Vibrotome切片，切成25µm厚的断片。邻近的部分都使用苏木精和曙红进行组织化学染色，来鉴定受损区域，或者使用异硫氰酸荧光素（FITC）（1:100；30min）鉴别脑血管，以及4',6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）(1 mg/mL; 1 min)进行细胞核染色。H&E-染色的部分使用LCM PixCell IIe显微镜观察并记录相位对比。血脑屏障使用Axiovert 200荧光显微镜(Carl Zeiss, Maple Grove, MN)肉眼观察cy5.5从大脑薄壁组织溢出，使用近红外模式（660到680nm激发滤光片和一个700nm的纵向发射滤光片）。成像过程使用AxioVision LE Rel 4.4软件。统计分析数据显示为±SD荧光强度或荧光的浓度。缺......阅读全文
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（三）
脑损伤的组织学评估在一些实验中，成像结果通过脑组织的组织学平估来确定。成像后，动物被灌注肝素化盐水和10%的福尔马林，然后使用Vibrotome切片，切成25µm厚的断片。邻近的部分都使用苏木精和曙红进行组织化学染色，来鉴定受损区域，或者使用异硫氰酸荧光素（FITC）（1:100；30min）鉴别脑
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（五）
表一：经过短暂的左侧MCAO及随后的24小时再注入后前后，体内左右半球ROI的内源荧光强度（FI）和荧光寿命()值。动物在再灌注结束时注入50毫升盐水，注入后15分钟使用 eXplore Optix成像。左 FI [AU] tav [ns]右 FI [AU]
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（二）
TTC组织化学染色为了使经过短暂的MCAO后的局部缺血性损伤更加形象化，大脑被移除，并使用鼠标不锈钢冠状脑模型用四个两毫米厚的花冠状切片剖面，使用有喙的边缘作为一个标志。截面浸泡在2%的TTC溶液中，37 ° C 浸泡15分钟以促进着色。然后从溶液中取出进行数码拍照。缺少TTC着色的梗塞区域使用
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（六）
尽管根据本研究中的数据判断是引人注意的并且可以推断使用小的和大的MW示踪剂的BBB替代半影成像生物标记物的空间分布不同。类似的磁共振成像分析的扩散灌注错配模型，这些研究的缺点会阻碍确切的结论。与Nagaraja和他的同事的研究相比，本研究中使用Cy5.5和BSA-Cy5.5早分组的动物中，不平等交付
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（一）
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑屏障的动态分析摘要脑缺血后血脑屏障可用于传递显像剂和疗法进入大脑。本研究的目的一是建立新的体内光学成像方法，用来纵向评价血脑屏障，二是评价经过短暂的局部脑缺血后血脑屏障的大小选择和时间模式。使用体内时域光学近红外成像技术来评价血脑屏障的渗透性，经过60分钟或
时域体内荧光成像技术应用于实验性脑中风血脑...（四）
短暂的MCAO后BSA-Cy5.5体内成像对比度增强为确认60分钟MCAO后BBB渗透性选择的大小，在MCAO后立即静脉注射50mg BSA-Cy5.5，然后动物在1、3、24小时灌注后成像(图3A)。因为BSA-Cy5.5循环的半衰期远长于Cy5.5，只有一个需要注入进行长达24小时的纵向研究
体内荧光成像技术的进展（三）
成像新策略的出现改进探针亲和性的多种途径探针同靶点的紧密和特异性结合通常是成像成功的关键。因为许多成像靶点都位于细胞表面之外，所以多途径原则可以用来改善探针的结合亲和性。最近有两篇文献报道了用于异种移植肿瘤αvβ3 整合素（integrin）体内成像的RGD（Arg-Gly-Asp ）寡肽的
体内荧光成像技术的进展（一）
体内荧光成像技术利用一架灵敏的照相机，检测活的整体小动物荧光团的荧光发射，从而获得清晰的图像。为了克服活组织的光子衰减，通常优先选取近红外区(NIR)的长波发射荧光团，包括广泛应用的小分子靛炭菁染料。NIR探针的数目最近随着有机、无机和生物荧光纳米颗粒的采用而不断增加。在体内荧光成像领域，成像策略和
体内荧光成像技术的进展（二）
可激活定靶探针可激活定靶探针一般用于酶活的功能成像。它们往往含有两个以上的等同或不同的色素团，两个色素团通过酶特异性多肽接头彼此紧密相连。这类探针主要呈黑色，没有或者很少发射荧光，这主要是由于非常相近（等同色素团）或者共振能的转移(不同色素团 )所造成的淬灭效应所致。多肽接头的切除，使它们的
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用三
4．干细胞及免疫学用荧光素酶标记干细胞有以下几种方法：一种是标记组成性表达的基因，做成转基因动物，干细胞就被标记了，若干细胞移植到另外动物体内，可以用活体生物发光成像技术示踪干细胞在体内的增殖、分化及迁徙的过程；另外一种方法是用慢病毒直接标记干细胞后，移植到体内观测其增殖、分化及迁徙过程，研究其修复
FluorCam叶绿素荧光成像技术应用案例（三）
上海生命科学研究院青年研究组长、博士生导师Chanhong Kim在苏黎世联邦理工学院、康奈尔大学博伊斯汤普森研究所工作期间就已经使用FluorCam叶绿素荧光成像系统进行了大量的研究工作并在PNAS、Plant Cell发表多篇相关文献。2014年，Chanhong Kim到上海生
FluorCam叶绿素荧光成像技术应用于果实品质检测与光合...
FluorCam叶绿素荧光成像技术应用于果实品质检测与光合生理研究 叶绿素荧光成像技术是在通过叶绿素荧光测量技术检测各光合作用指标的同时，对样品进行二维成像，以图像的形式量化并显示整个观测目标的光合生理状态，能直观体现目标整体的光合异质性，测量目标涵盖叶绿体、单个细胞、微藻到叶片、果实、花
活体动物体内光学成像（三）
（2） 免疫学与干细胞研究将荧光素酶标记的造血干细胞移植入脾及骨髓，可用于实时观测活体动物体内干细胞造血过程的早期事件及动力学变化。有研究表明，应用带有生物发光标记基因的小鼠淋巴细胞，检测放射及化学药物治疗的效果，寻找在肿瘤骨髓转移及抗肿瘤免疫治疗中复杂的细胞机制。应用可见光活体成像原理标记细胞，建
活体动物体内成像技术文献
1. 细胞凋亡与白血病Activation of Apoptosis in Vivo by a Hydrocarbon-Stapled BH3 HelixSCIENCE 2004，305:1466-1470 通过对BCL-2蛋白家族BID的BH3结构域进行化学修饰，使其容易穿过细胞膜，在活体内研究其
叶绿素荧光成像应用于茶树育种与生理分析
茶，是中华民族的举国之饮，茶文化源远流长，自远古时期，先人就已发现并利用茶树。我国是茶叶的主要产区，随着茶叶在国内及上的持续风靡，茶叶市场巨大，已成为中国的重要产值来源。茶叶产业链中茶树育种、种植栽培是关键一环，决定着茶叶的品质与产量。温度、水分、光照等因素对茶树表型的影响是茶树遗传育种与良种良方研
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用五
3． 药学研究荧光成像在药物制剂学研究，尤其是药物靶向性研究，药物载体研究中有巨大优势。有关专家正在设计用合适的荧光染料标记小分子药物，观察药物在动物体内的特异性分布和代谢情况，尤其是中药研究方面。 应用透射仪从样本底部激发光源，可以提高活体荧光成像的灵敏度和检测的深度。图11-6是应用NIR荧光染
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用六
（二）荧光成像技术优点在活体动物可见光成像技术中，相对于生物发光成像技术，荧光成像技术的优势主要表现在：1. 荧光染料、蛋白标记能力强荧光标记物种类繁多，包括荧光蛋白、荧光分子、量子点等，可以与基因、多肽、抗体等生物分子标记，作为分子探针使用范围广。同时，不同的荧光蛋白或染料还可对样本进行多重标记
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用七
（二） 实验操作流程1. 细胞标记或动物标记等进行生物发光实验，首先根据实验内容的不同，用荧光素酶基因标记肿瘤细胞、干细胞、病毒、药物载体或动物，或者用Lux操纵子标记细菌。用荧光素酶基因标记可通过质粒、慢病毒或逆转录病毒等方法进行。如果进行荧光实验，就用GFP、EGFP或RFP标记肿瘤细胞、干细
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用一
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用简介 文章目录：一、活体生物发光成像技术二、活体动物荧光成像技术三、生物发光成像与荧光成像的比较四、活体动物可见光成像仪器原理与操作流程活体动物体内成像技术是指应用影像学方法，对活体状态下的生物过程进行组织、细胞和分子水平的定性和定量研究的技术。活体动
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用四
二、活体动物荧光成像技术 （一）技术原理1．标记原理活体荧光成像技术主要有三种标记方法。（1）荧光蛋白标记：荧光蛋白适用于标记细胞、病毒、基因等，通常使用的是GFP、EGFP、RFP（DsRed）等；（2）荧光染料标记：荧光染料标记和体外标记方法相同，常用的有Cy3、Cy5、Cy5.5及Cy7，可以
活体动物体内生物发光和荧光成像技术基础原理与应用二
（二）活体生物发光成像技术应用领域活体生物发光成像技术是一项在某些领域有不可替代优势的技术，比如肿瘤转移研究、药物开发、基因治疗、干细胞示踪等方面。1．肿瘤学活体生物发光成像技术能够让研究人员能够直接快速的测量各种癌症模型中肿瘤的生长、转移以及对药物的反应。其特点是极高的灵敏度使微小的肿瘤病灶（少到
FluorCam多光谱荧光成像技术应用案例—多光谱荧光成像...
FluorCam多光谱荧光成像技术应用案例—多光谱荧光成像是什么1. 多光谱荧光的发现及特性二十世纪八九十年代，植物生理学家对植物活体荧光——主要是叶绿素荧光研究不断深入。激发叶绿素荧光主要是使用红光、蓝光或绿光等可见光。当科学家使用UV紫外光对植物叶片进行激发，发现植物产生了具备4个特征性波峰的荧
活体动物体内成像技术文献3
1. Systemic tumor targeting and killing by Sindbis viral vectorsNATURE BIOTECHNOLOGY 22 (1): 70-77, January 2004本文依据Sindbis病毒对癌细胞表面超量表达的LAMR的识别的机理，以荧
活体动物体内成像技术文献2
12． 药物对蛋白质相互作用的影响Kinetics of regulated protein-protein interactions revealed with firefly luciferase complementation imaging in cells and living anima
多光子显微镜成像技术：大视场多区域脑成像技术
为了了解神经回路的功能以及神经元之间的相互作用,需要对不同区域的大量神经元进行活体成像,我们这里介绍两种显微镜技术,分别针对大视场多区域成像和自由活动小鼠的活体成像。从图1可以看出用于视觉处理的神经元分布在直径约3毫米的区域——小鼠初级视觉皮层和多个较高级的视觉区域。当前的商用双光子显微镜系统通常提
深脑成像技术解码脑干关键结构
日本自然科学研究机构科学家开发出一种创新的深脑成像技术，用于研究大脑中一个关键的脑干结构——孤立管核（NTS）。该成果打开了“脑—身—心”互动研究新窗口，不仅为研究脑—体之间的复杂联系提供了有力工具，也为基础神经科学研究向临床转化搭建了桥梁。相关论文发表于最新一期《细胞报告方法》。“D-PSCAN”
小动物体内可见光三维成像技术研究进展（三）
1.2 单角度三维成像技术 单角度三维成像技术是相对于多角度扫描技术而命名的，是利用不同波长的光对动物组织的穿透性不同这一特性(例如红光在体内的穿透性远远大于绿光)。采用不同的滤光片在560 － 660nm获得多个(至少二个)波长的图像信息。举个例子：绿光波长较红光波长短，相对更难穿透组织。
小动物活体成像系统比较
分子影像产品的研究与发展，是伴随着分子影像成像理论和成像算法的发展而逐步发展的。在荧光标记的分子成像方面，目前世界上仅有少数实验室研制成功可以对小动物进行跟踪性在体荧光断层分子影像的系统，并接连在Nature/Science上发表一系列突破性研究进展。 近年来，国外某些公司改进了现有的体外荧光成像
叶绿素荧光成像应用于花生耐寒相关转录因子挖掘早期...
叶绿素荧光成像应用于花生耐寒相关转录因子挖掘早期表型评估植物通过调节控制细胞和生理性状的基因网络以应对寒冷，其中的转录因子是诱发相关响应的关键，挖掘耐寒相关转录因子有利于作物耐寒育种等研究。沈阳农业大学3月份发表的文章中，通过对花生品种进行耐寒性早期表型评估，利用比较转录组分析的方法，对两个耐寒能力
活体多光谱荧光成像应用实例（三）
总结活体多光谱荧光成像可以扣除组织自体荧光和进行多种荧光团成像。这可以增强信噪比并进行先进的多重荧光成像，实现更强大的研究设计。参考文献[1] Levenson RM, Lynch DT, Kobayashi H, Backer JM, Backer MV (2008). Multiplexing