RapiGestSF试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(一)

Ying Qing Yu 与 Martin Gilar / 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司简介 本应用纪要中,我们介绍了沃特世ZL RapiGest™ SF 试剂的物理化学性质及其应用领域。 2002 年,我们首次推出 RapiGest SF ,这一创新产品是帮助酶消解的有利工具,可促进溶液中蛋白的消解,它能够改善样品制备过程中蛋白的溶解度。RapiGest SF 提高酶解速率与完全程度的机理详见图 1 。温和的蛋白变性可打开蛋白结构并暴露酶切位点,以供酶切。在 RapiGest SF 溶液中,酶对变性的耐受性优于普通蛋白,并能保持活性。在加入酶之前高温加热 RapiGest SF 溶液可使球蛋白更为完全变性,之后需将酶与样品一起进行 37 °C 的孵育。 1,2超过 200 多家行业内杂志引用了使用 RapiGest SF 进行样品溶解的案例,大部分为蛋白组学的应用。最近,许多制药实验室使用 Rapi......阅读全文

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(一)

Ying Qing Yu 与 Martin Gilar  / 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司简介 本应用纪要中,我们介绍了沃特世ZL RapiGest™ SF 试剂的物理化学性质及其应用领域。 2002 年,我们首次推出 RapiGest SF ,这一创新产品是帮助酶消解的有利工具,可促进溶液中蛋

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(三)

与其他的蛋白酶合用 我们测试了 RapiGest SF 与多种蛋白酶的适配性,如 Asp-N, Lys-C 与 Glu-C 。在酶解前使用 RapiGest SF 变性蛋白获得了有效的消解结果。蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF 也用于测试其它酶,如 PNGase F ,该酶用于酶切糖蛋白

RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(二)

胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶,可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加 RapiGest SF 的情况下胰蛋白酶的活性作用,并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导 N-α- 苯甲酰 -L- 精氨酸乙基乙酯( BAEE )在 50 mM 重

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(一)

在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF

在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF

  在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:   ■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。  

蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(二)

RapiGest SF虽然是一种表面活性剂,但其全面适应液质分析的要求。在使用RapiGest SF作为变性剂完成蛋白酶切后,如果只进行色谱分析,则可无需对RapiGest SF进行处理。如进行液质联用分析,则通过简单的加酸步骤就可将RapiGest SF去除。而酸性溶液环境又恰恰是液质

史上最全溶液、试剂、药品有效期汇总一览(一)

实验室常用化学药品、试剂,由于性质的不同,有效期也有所有不同,比如我们常用的缓冲液、有机试剂、标准溶液、流动相、标准品、配制溶液、留样等,都有一定的有效期。如何正确把握使用期限呢? A 如何确定试剂有效期 试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中,人们总是习惯于用生产日

组织学——试剂和溶液

Fixative Preparation10% Formal Saline Preparation (Nottingham Pathology Lab) 4% Paraformaldehyde Preparation (Nottingham Pathology Lab)  Fixatives (XM

细胞培养中的一些试剂

  一、纺锤体阻断剂  在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。  在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量

溶液中锶的测定

  锶只能用火焰法。沾点锶溶液在火焰上燃烧看是否为红色,如果是红色证明是锶离子

实验室试剂当量溶液的定义

当量溶液(Normal solution)为一升溶液中含有一克当量溶质的水溶液,即指浓度是1N的溶液。 指示剂 指示剂(Indicator)是能由某些物质存在的影响而改变自己颜色的物质。主要用于容量分析中指示滴定的终点。一般可分为酸碱指示剂、氧化还原指示 剂、吸附指示剂等。指示剂除分析外,也可用来检

如何测定溶液中的高分子溶液粒径

从溶液结构和线团间的相互作用来看,可以把高分子溶液分为三个浓度区域:①稀溶液,孤立线团、线团间相互作用可以忽视;②亚浓溶液,高分子线团开始感觉到溶液中邻近线团的存在,即线团间的相互作用开始呈现其重要性,线团相互接触不过是更形象化的直观描述;③浓溶液,溶液中链段的空间密度分布趋于均一后的情况。但是这三

史上最全溶液、试剂、药品有效期汇总一览(二)

表2:各种缓冲液、试液、指示液使用期限表  表3.一般溶液有效期一览表名称浓度有效期名称浓度有效期淀粉指示剂5g/L5天硝酸盐氮标准溶液/1个月淀粉指示剂10g/L5天硫酸锌535g/L1个月盐酸氨水缓冲溶液PH=9.6-9.77天硫酸锰380g/L1个月乙醇溶液78%7天硫酸铜溶液20g/L1个月

融合蛋白酶解实验

实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应

融合蛋白酶解实验

基本方案 用 Xa 因子             实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白

实验室检验检测工具​试剂条

试剂条是有干化学试剂的纸条,可检测液体标本中的化学成分。

实验室检验检测工具生化试剂

生化试剂(Biochemical reagent)是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。生化试剂的介绍由于生命科学面广、发展快,因此该类试剂品种繁多、性质复杂。生化试剂的种类主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物

能源统一监管格局形成有利新能源并网

  为统筹推进能源发展和改革,加强能源监督管理,国务院机构改革和职能转变方案将国家能源局、国家电监会的职责整合,重新组建国家能源局。原国家电监会主席吴新雄日前出任新组建的国家能源局局长。   “中国能源需要一个统一的管理、协调机构,所以国家能源局与国家电监会合并是一个好消息。”中国可再生能源学会副

如何测量SF6六氟化硫中的露点

为了保证SF6气体的绝缘特性,降低SF6气体分解物所产生的酸性副产品物质的形成,须将高压电气设备气室中的水气含量保持在尽可能低的水平。虽然注入的是干燥的SF6气体并做到了高压下的密封,没有外界新气流入,但由于气室内外存在较大差距的水气分压,水分子还是有很强的侵入能力,特别是长期运行后的高压电气设备更

可以进一步优化胰蛋白酶解离效果的方法

可以进一步优化胰蛋白酶解离效果的方法:调整胰蛋白酶的纯度和活性选择高纯度和高活性的胰蛋白酶制剂,以提高解离的效率和准确性。优化缓冲液体系使用适合的缓冲液来维持稳定的 pH 和离子强度,有助于胰蛋白酶发挥最佳作用。预消化处理对于较硬或复杂的组织,先进行短时间的温和预消化,如使用低浓度的胰蛋白酶或其他温

全新学习认知工具在神经科学中的应用研究(一)

全世界各个科研大国的脑计划,起因于人们对行为及大脑探秘的高度关注。Nature不久前的一篇报道阐述到,中国脑科学研究所于2018年3月22日正式在北京成立,中国脑计划实体店终开,北京大学饶毅与NIBS北京生命科学研究所罗敏敏共同主管。此举也是继2013年欧美的脑计划、日本2014年的类似小的项目、韩

RIP-技术——研究肿瘤发生和转移中microRNA失调的有力工具-一

microRNAs(miRNA)是一种内源性非编码小分子RNA,一般具有18到25个核苷酸,其序列在进化上高度保守,通过靶向特定mRNA来调节基因的表达。miRNA是越来越受关注的转录后调控网络(post-transcriptional control)中重要的调控因子。首先,miRNA结合

电流时间曲线一定是将电极置入溶液中吗

三电极系统放入溶液中,选i-t curve技术,选择合适的参数,可测得电流随时间变化的曲线。溶液必须导电性良好,其中可有在某些电位下有特殊反应的物质。建议搜索以电化学原理、电化学实验为关键词搜索书籍。

Illumina在英国NIPTZL侵权诉讼中获有利先机

  分析测试百科网讯 2017年11月21日,英国ZL法院高等法院司法审判对Illumina起诉Premaitha对其医生实验室,TDL遗传学和Ariosa诊断的ZL侵权案件表示赞同。  2015年3月,Illumina及其全资子公司Verinata Health针对Premaitha over I

实验室检验检测工具​试剂瓶

广口、细口;磨口、无磨口等多种。广口瓶用于盛固体试剂,细口瓶盛液体试剂;棕色瓶用于避光的试剂,磨口塞瓶能防止试剂吸潮和浓度变化。定义:盛装试剂的玻璃瓶或塑料瓶。颜色:有无色、棕色。品种:分为广口瓶、细口瓶。广口瓶用于盛放固体试剂,细口瓶用于盛放液体试剂。瓶口带有磨口滴管的叫滴瓶。试剂瓶不耐热。用于盛

新一代血细胞分析技术SFCube-2.0-在临床样本检测中的运用

血细胞分析仪是目前医学实验室最常用的仪器之一,经过半个多世纪的发展,血细胞分析仪从对白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白等的单项目检测,发展为具有同时进行多项目联合检测功能的两分群、三分群和五分类血细胞分析仪,某些仪器还具有对网织红细胞、有核红细胞,甚至是C反应蛋白的检测功能。血细胞分析仪采用的分类技术

温胰蛋白酶解离组织

方案12.5 温胰蛋白酶解离组织实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时,每隔半小时收集已分离的细胞,离心后加入含血清的培养基。实验材料组织                                                                  DBSS        

温胰蛋白酶解离组织

            实验方法原理 组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时,每隔半小时收集已分离的细胞,离心后加入含血清的培养基。 实验材料 组织 DBSS

冷胰蛋白酶解离组织

实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ,去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤1. 将组织(1~5 g,预先称重)移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮氏培养皿中