RapiGestSF试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(二)
胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶,可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加 RapiGest SF 的情况下胰蛋白酶的活性作用,并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导 N-α- 苯甲酰 -L- 精氨酸乙基乙酯( BAEE )在 50 mM 重碳酸胺( pH 7.9 )中的室温水解。胰蛋白酶活性的变化通过 UV 253 nm 下测量 BAEE 水解率进行计算。在选择的变性溶液中,胰蛋白酶活性与对照样品进行对比(非变性剂)。结果见于表 1 。表 1 中的数据说明低浓度下( 0.1% ) RapiGest SF 不抑制胰蛋白酶的活性。这与结构上类似的表面活性剂 SDS 不同, SDS 是很强的变性剂,可会使胰蛋白酶失活。尿素、乙腈或盐酸胍也是胰蛋白酶消化的变性剂。但是乙腈是强洗脱剂会干扰消解样品进行反相 LC 分析。正如我们所知,尿素可使蛋白共价修饰,盐酸胍也和 S......阅读全文
RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(二)
胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶,可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加 RapiGest SF 的情况下胰蛋白酶的活性作用,并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导 N-α- 苯甲酰 -L- 精氨酸乙基乙酯( BAEE )在 50 mM 重
RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(三)
与其他的蛋白酶合用 我们测试了 RapiGest SF 与多种蛋白酶的适配性,如 Asp-N, Lys-C 与 Glu-C 。在酶解前使用 RapiGest SF 变性蛋白获得了有效的消解结果。蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF 也用于测试其它酶,如 PNGase F ,该酶用于酶切糖蛋白
RapiGest-SF-试剂:促进溶液中蛋白酶解的有利工具(一)
Ying Qing Yu 与 Martin Gilar / 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司简介 本应用纪要中,我们介绍了沃特世ZL RapiGest™ SF 试剂的物理化学性质及其应用领域。 2002 年,我们首次推出 RapiGest SF ,这一创新产品是帮助酶消解的有利工具,可促进溶液中蛋
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(二)
RapiGest SF虽然是一种表面活性剂,但其全面适应液质分析的要求。在使用RapiGest SF作为变性剂完成蛋白酶切后,如果只进行色谱分析,则可无需对RapiGest SF进行处理。如进行液质联用分析,则通过简单的加酸步骤就可将RapiGest SF去除。而酸性溶液环境又恰恰是液质
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点: ■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。
蛋白酶解的首选变性剂——RapiGest-SF(一)
在生物药肽图分析、蛋白质修饰分析、蛋白质组学研究等诸多工作中,蛋白质的变性与酶解是样品处理的必经之路。RapiGestTM SF正是在这个实验步骤中,用以辅助蛋白酶解的变性试剂[1,2,3]。RapiGest SF有以下优点:■ 综合水相、有机相溶液条件下,最高效的辅助酶解变性剂。■ 作用过程中,不
全新学习认知工具在神经科学中的应用(二)
图1: 图2:图1左边是黑色的是对照组的突触密度,右边黑色的是敲除组的突触密度,明显下降!图2测定的是场兴奋性突触后电位,黑色的是对照组的LTP长时程增强,红色的是敲除组的LTP长时程增强,明显突出的可塑性受损!这些突触密度的下降、突触可塑性的受损,反应到行为学上则是学习认知的问题。 采用荷兰诺达思
圆二色是研究溶液中蛋白质构象
圆二色是研究溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法,远紫外CD 数据能快速地计算出溶液中蛋白质的二级结构;近紫外CD 光谱可灵敏地反映出芳香氨基酸残基、二硫键的微环境变化,蕴含着丰富的蛋白质三级结构信息。随着现代分析仪器的飞速发展,高压液相色谱、停流技术、电化学及荧光等附加装置与CD 光谱仪
组织学——试剂和溶液
Fixative Preparation10% Formal Saline Preparation (Nottingham Pathology Lab) 4% Paraformaldehyde Preparation (Nottingham Pathology Lab) Fixatives (XM
史上最全溶液、试剂、药品有效期汇总一览(二)
表2:各种缓冲液、试液、指示液使用期限表 表3.一般溶液有效期一览表名称浓度有效期名称浓度有效期淀粉指示剂5g/L5天硝酸盐氮标准溶液/1个月淀粉指示剂10g/L5天硫酸锌535g/L1个月盐酸氨水缓冲溶液PH=9.6-9.77天硫酸锰380g/L1个月乙醇溶液78%7天硫酸铜溶液20g/L1个月
溶液中锶的测定
锶只能用火焰法。沾点锶溶液在火焰上燃烧看是否为红色,如果是红色证明是锶离子
实验室试剂当量溶液的定义
当量溶液(Normal solution)为一升溶液中含有一克当量溶质的水溶液,即指浓度是1N的溶液。 指示剂 指示剂(Indicator)是能由某些物质存在的影响而改变自己颜色的物质。主要用于容量分析中指示滴定的终点。一般可分为酸碱指示剂、氧化还原指示 剂、吸附指示剂等。指示剂除分析外,也可用来检
圆二色是研究溶液中蛋白质构象文献
圆二色是研究溶液中蛋白质构象的一种快速、简单、较准确的方法,远紫外CD数据能快速地计算出溶液中蛋白质的二级结构;近紫外CD光谱可灵敏地反映出芳香氨基酸残基、二硫键的微环境变化,蕴含着丰富的蛋白质三级结构信息。另外,CD光谱还能结合紫外、荧光等分析手段,了解蛋白质配体的相互作用,监测蛋白质分子在外界条
RIP-技术——研究肿瘤发生和转移中microRNA失调的有力工具-二
但是miRNA具有成百上千个靶标,所以要完全理解一个miRNA和靶标的特异性反应与肿瘤发生之间的联系,是一项非常具有挑战性的工作,尤其是在癌症研究中鉴别出miRNA的准确靶点仍然是一大难题。现已知道miRNA的调节功能是通过结合不同的蛋白质或RNA来实现的,因此研究miRNA与蛋白的结合情况对于揭示
如何测定溶液中的高分子溶液粒径
从溶液结构和线团间的相互作用来看,可以把高分子溶液分为三个浓度区域:①稀溶液,孤立线团、线团间相互作用可以忽视;②亚浓溶液,高分子线团开始感觉到溶液中邻近线团的存在,即线团间的相互作用开始呈现其重要性,线团相互接触不过是更形象化的直观描述;③浓溶液,溶液中链段的空间密度分布趋于均一后的情况。但是这三
盐酸萘乙二胺法中各试剂的具体作用
硼酸饱和液调节pH值为弱酸性。亚铁氰化钾溶液乙酸锌溶液,使蛋白质沉淀。亚铁氰化钾与乙酸锌生成亚铁氰化锌与蛋白质发生共沉淀现象。对氨基苯磺酸溶液使生物体中的亚硝酸根转化为重氮根,即对重氮基苯磺酸。盐酸萘乙二胺溶液与重氮基苯磺酸形成偶氮类化合物,显色剂。标准亚硝酸钠溶液组制定工作曲线所用。
怎样用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂
用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂的质量和操作技术时,由于每克邻苯二甲酸氢钾的理论CODcr值为 1.176g,所以,溶解0.4251g邻苯二甲酸氢钾于重蒸馏水中,转入1000mL容量瓶,用重蒸馏水稀释至标线,使之成为500mg/L的CODcr标准溶液。用时新配。邻苯二甲酸氢钾:基准试剂级用前需在10
融合蛋白酶解实验
实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白试剂、试剂盒 200 μg Xa 因子/ml 反应缓冲液2 × SDS 样品缓冲液仪器、耗材 沸水浴实验步骤 准备两个小量预试验反应以确定最佳温育时间。反应 1:20 μl 含有 1 μl 200μg /ml Xa 因子的 1 mg/ml 融合蛋白反应
融合蛋白酶解实验
基本方案 用 Xa 因子 实验方法原理 实验材料 1 mg/ml 融合蛋白
实验室检验检测工具试剂条
试剂条是有干化学试剂的纸条,可检测液体标本中的化学成分。
实验室检验检测工具生化试剂
生化试剂(Biochemical reagent)是指有关生命科学研究的生物材料或有机化合物,以及临床诊断、医学研究用的试剂。生化试剂的介绍由于生命科学面广、发展快,因此该类试剂品种繁多、性质复杂。生化试剂的种类主要有电泳试剂、色谱试剂、离心分离试剂、免疫试剂、标记试剂、组织化学试剂、透变剂和致癌物
如何测量SF6六氟化硫中的露点
为了保证SF6气体的绝缘特性,降低SF6气体分解物所产生的酸性副产品物质的形成,须将高压电气设备气室中的水气含量保持在尽可能低的水平。虽然注入的是干燥的SF6气体并做到了高压下的密封,没有外界新气流入,但由于气室内外存在较大差距的水气分压,水分子还是有很强的侵入能力,特别是长期运行后的高压电气设备更
常用贮液与溶液(二)
100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions)可以购买到100mmol/L纯dNTPs贮液,-80℃可贮存至少6个月。10mmol/L dNTP混合液成分及终浓度配制20ul溶液各成分的用量10mmol/L dATP10mmol/L dCTP 10mmol/L dGTP10mm
Illumina在英国NIPTZL侵权诉讼中获有利先机
分析测试百科网讯 2017年11月21日,英国ZL法院高等法院司法审判对Illumina起诉Premaitha对其医生实验室,TDL遗传学和Ariosa诊断的ZL侵权案件表示赞同。 2015年3月,Illumina及其全资子公司Verinata Health针对Premaitha over I
稀戊二醛溶液的类别规格
类别同浓戊二醛溶液规格2%
浓戊二醛溶液的检查方法
pH值应为2.5~3.5(通则0631)。溶液的澄清度取本品10.0ml(25%)或12.5m(20%),加水至100ml,摇匀,溶液应澄清(通则0902第一法)。游离酸精密量取本品5ml,加水5ml与酚酞指示液2滴,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液显粉红色,并持续15秒钟不褪,消耗氢
稀戊二醛溶液的检查方法
pH值应为3.0~4.0(通则0631)装量取本品,依法检查(通则0942),应符合规定。微生物限度取本品,照非无菌产品微生物限度检查微生物计数法(通则1105)和控制菌检查法(通则1106)及非无菌药品微生物限度标准(通则1107)检查,应符合规定。
常见实验用溶液的配制方法(二)
Tris缓冲液(Tris-HCl buffer) 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积(ml)
实验室检验检测工具试剂瓶
广口、细口;磨口、无磨口等多种。广口瓶用于盛固体试剂,细口瓶盛液体试剂;棕色瓶用于避光的试剂,磨口塞瓶能防止试剂吸潮和浓度变化。定义:盛装试剂的玻璃瓶或塑料瓶。颜色:有无色、棕色。品种:分为广口瓶、细口瓶。广口瓶用于盛放固体试剂,细口瓶用于盛放液体试剂。瓶口带有磨口滴管的叫滴瓶。试剂瓶不耐热。用于盛