10mg／ml牛血清蛋白(BSA）配制方法
加100mg的牛血清蛋白（组分V或分子生物学试剂级，无DNA酶）于9.5ml水中（为减少变性，须将蛋白加入水中，而不是将水加入蛋白），盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。......阅读全文
牛血清白蛋白（BSA）选择时需注意这些
牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin, BSA）是牛血清中的一种球蛋白，又称第五组分（需要注意的是，第五组分并不是BSA的一种组份，而是Edwin J. Cohn教授早期从血液中通过特定的分离技术得到5种组份，其中第五种就是白蛋白），CAS号为9048-46-8，包含583个氨基酸
氯霉素（chloramphenicol）（25mg/ml）的配制
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸（nalidixic－acid）（5mg/ml）的配制
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素（streptomycin）（50mg/ml）的配制
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
脂肪酶的测定实验
实验方法原理 实验材料 酶样品试剂、试剂盒 氯化钠氯化钙牛血清蛋白牛磺胆酸钠橄榄油-阿拉伯树胶乳胶脂肪酶NaOH仪器、耗材 自动滴定器实验步骤 实验混合物：5 ml 橄榄油-阿拉伯树胶乳胶5 ml H2O2 m l 3.0 mol/L NaCl1 ml 0.075 mol/L 氯化钙2 ml 0.5
求封闭液中1％的BSA是怎么配制
取1g BSA，加蒸馏水，定容到100ml就行了。最常用的封闭剂是0.05%-0.5%的BSA，封闭是否必要，取决于ELISA的模式及具体的实验条件。并非所有的ELISA 固相均需封闭，封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来，双抗体夹心法，只要酶标记物是高活性的，操作时洗涤彻底，不经封闭也可得到满意
α酮戊二酸脱氢酶的测定
实验方法原理 实验材料 α-酮戊二酸脱氢酶试剂、试剂盒 磷酸钾MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3［Fe（CN）6］牛血清蛋白仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 30℃ 时，于 436 nm 处吸收值发生变化，ε436＝7
怎样用双缩脲法测定蛋白质
（一）实验原理双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓
脂肪酶的测定实验
pH 稳定计（自动滴定器）法 荧光分析法 实验方法原理 实验材料 酶样品
生化实验丨牛血清白蛋白（BSA）注意事项
牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一种球蛋白，包含607个氨基酸残基，分子量为66.446KDa，等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。主要成分： 1.蛋白质——是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白，球蛋白。2.多肽——血小板促生长因子
牛血清白蛋白BSA的等电点是多少
天然牛血清白蛋白（BSA）的等电点为4.6~5.8，经无水乙二胺（EDA）和碳化二亚胺（EDC）反应，改性后的BSA等电点为8.6。
甲氧西林（methicillin）（100mg/ml）的配制
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
SPA夹心ELISA实验检测CIC
实验概要金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。主要试剂1. 5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配
Bradford法测蛋白浓度
原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465－595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的
Bradford法测蛋白浓度
原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在465－595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大小计算蛋白的
Bradford法蛋白质含量的测定
原理：这一方法基于考马斯亮蓝G-250 有红蓝两种不同的形式。在一定浓度的乙醇及酸性条件下，可配成淡红色的溶液，当与蛋白质结合后，产生蓝色化合物，反应迅速而稳定。反应化合物在 465-595nm处有最大的光吸收值，化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系，因此可检测595nm的光吸收值的大
α酮戊二酸脱氢酶的测定实验
实验材料α-酮戊二酸脱氢酶试剂、试剂盒磷酸钾MgCl2α-酮戊二酸焦磷酸硫胺素K3［Fe（CN）6］牛血清蛋白仪器、耗材分光光度计实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品 30℃ 时，于 436 nm 处吸收值发生变化，ε436＝755 l/（mol·c
氨苄青霉素（ampicillin）（100mg/ml）的配制
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中，最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
由戊二醛将碱性磷酸酶与抗体的结合实验
实验材料碱性磷酸酶IgG 溶液试剂、试剂盒戊二醛Tris-HCl牛血清蛋白仪器、耗材透析管实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」透析 25 mg 碱性磷酸酶和 10 mg lgG，分别在 PBS 中 4℃ 过夜，中途换液。在透析后的蛋白质溶液中加入戊二醛，最终浓度达到 2％（体积分数），4℃ 缓慢搅
由戊二醛将碱性磷酸酶与抗体的结合实验
实验材料 碱性磷酸酶IgG 溶液试剂、试剂盒 戊二醛Tris-HCl牛血清蛋白仪器、耗材 透析管实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」透析 25 mg 碱性磷酸酶和 10 mg lgG，分别在 PBS 中 4℃ 过夜，中途换液。在透析后的蛋白质溶液中加入戊二醛，最终浓度达到 2％（体积分数
由戊二醛将碱性磷酸酶与抗体的结合实验
基本方案 实验材料 碱性磷酸酶 IgG 溶液 试剂、试剂
酶标仪测BSA浓度的方法
包被抗原后加入待测抗体，反应后洗板，加入酶标二抗，反应后再洗板，加入底物显色。 间接Elisa方法主要用来检测抗体，例如我们对动物进行免疫后要检测抗血清的效价的话，就可以用间接Elisa方法来测。
脂肪酶的测定实验——pH－稳定计（自动滴定器）法
三酰甘油脂肪酶，三酰甘油酰基水解酶。三酰甘油 → 甘油 ＋ 长链脂肪酸游离羧基的释放引起 pH 的降低，而这可以用来鉴定酶的活性。在实验期间，为了保持一个稳定的 pH，建议 pH 稳定计与自动滴管连接，或者用从合成的底物上释放一个具有荧光的残基，根据其荧光光度测定活度。实验材料酶样品试剂、试剂盒氯化
SPA夹心ELISA实验检测CIC
金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。1、试剂（1）5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制；（2
酶联免疫吸附剂测定葡萄球菌A蛋白CIC
金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。1、试剂（1）5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制；（2
SPA夹心ELISA试验检测循环复合物...
实验概要金黄色葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A，SPA)可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。主要试剂1. 5％与2.5％PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配
金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal－protein－A，SPA）夹心ELIS
金黄色葡萄球菌A蛋白（staphylococcal protein A，SPA）可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。1、试剂（1）5%与2.5%PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配制；（2
SPA夹心ELISA试验检测循环复合物(CIC)
实验概要金黄色葡萄球菌A蛋白(staphylococcal protein A，SPA)可与IC中IgG的Fc段结合。将待测血清用低浓度PEG沉淀后加至SPA包被的固相载体上，再以酶标记的SPA与之反应，即可检测样本中有无IC。主要试剂1. 5％与2.5％PEG用0.02mol/LpH7.4PBS配
考马斯亮兰法（Bradford法）测定蛋白浓度
实验概要双缩脲法（Biuret法）和Folin―酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而
紫外分光光度法测定蛋白质含量
考马斯亮兰G250与蛋白质结合，在0-1000ug/ml范围内，于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速，结合产物在室温下10分钟内较为稳定，是一种较好的蛋白质定量测定方法。 1. 实验部分 1.1 仪器与试剂： Labte