100×Denhardt试剂（Denhardt’sregent）配制方法
100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent）成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分V）水2g2g2g加水至总体积为100ml依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接）成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量0.5mol/L Tris-HCl100mmol/L MgCl2100mmol/L DTT2mmol/L ATP5mmol/L 盐酸亚精胺（可选）0.5mg/ml BSA（组分V）（可选）水5ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液1ml 1mol/L 贮液200ul 100 mmol/L 贮液50ul 1 mmol/L 贮液0.5ml 10 mg/mL 贮液2.25ml将......阅读全文
100×Denhardt试剂（Denhardt’s－regent）－配制方法
100×Denhardt试剂（Denhardt’s regent）成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll，400型）2%聚乙烯吡咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分V）水2g2g2g加水至总体积为100ml依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-
实验常用试剂的制备与储藏（二）
100×Denhardt试剂（Denhardt's regent） 依照上表称取各组分，溶于水中定容。过滤除菌及杂质，分装成小份于-20℃贮存。 10×标准DNA连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer）（粘端、平端连接） 将配制好的缓冲
间接原位PCR（原位杂交PCR）实验
实验材料 组织或细胞样品试剂、试剂盒 SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNARnaseDTT乙醇仪器、耗材 玻片石蜡膜橡皮泥湿盒实验步骤 一、预杂交 1. 试剂与配制 2×SSC 50%去离子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v） 预杂交液：2×SSC，5%硫
间接原位PCR（原位杂交PCR）
间接原位PCR（原位杂交PCR） 实验材料 组织或细胞样品 试剂、试剂盒
间接原位PCR（原位杂交PCR）
与直接原位PCR所不同的是，靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入，而是标记一段与扩增片段互补的探针，在扩增结束后，应用此探针进行原位杂交。因此，此处主要介绍原位杂交，其余方法同原位PCR。实验材料组织或细胞样品试剂、试剂盒SSC硫酸葡聚糖甲酰胺脱脂奶粉Denhardt’s 液SDS变性的鲑鱼精DNAR
小鼠S100蛋白(S100)ELISA试剂盒
小鼠S100蛋白(S100)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 S100 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠S100，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的
人S100蛋白(S100)ELISA试剂盒
人S100蛋白(S100)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 S100 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100与单抗结合，加入生物素化的抗人S100，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Stre
常用贮液与溶液（一）
1mol/L亚精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：
猪S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒
猪S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗猪 S100b 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100b与单抗结合，加入生物素化的抗猪S100b，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标
兔S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒
兔S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗兔 S100b 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100b与单抗结合，加入生物素化的抗兔S100b，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标
人S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒
人S100b蛋白(S100b)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 S100b 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100b与单抗结合，加入生物素化的抗人S100b，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标
小鼠S100A9蛋白(S100A9)ELISA试剂盒
小鼠S100A9蛋白(S100A9)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗小鼠 S100A9 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100A9与单抗结合，加入生物素化的抗小鼠S100A9，形成免疫复合物连接在板上，
大鼠S100B蛋白(S100B)ELISA试剂盒
一、背景 大鼠S100B蛋白(S100B)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠S100B蛋白（S-100B）水平。用纯化的大鼠S100B蛋白（S-100B）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入S100B蛋白（S-100B），再与HRP标记的S100B蛋白（S
人S100A9蛋白(S100A9)ELISA试剂盒
人S100A9蛋白(S100A9)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 S100A9 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 S100A9与单抗结合，加入生物素化的抗人S100A9，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧
放射性标记探针与核酸杂交反应的步一般过程
1、配制所需试剂SSC 溶液(20×):3mol/L NaCl,0.3mol/L 柠檬酸钠。Denhardt’s溶液(50×):聚蔗糖5g,聚乙烯吡咯烷酮5g,牛血清白蛋白(BSA)5g,加水至500mL。预杂交液:6×SSC,5×Denhardt’s溶液,0.5%SDS,100μg/mL 经变性或
核酸探针标记及原位杂交4
(三)试剂配制配制溶液过程中均需戴手套，液体配制均用超净水，所用瓶子均经160℃烘烤4h，主要目的是去除RNA酶。1.DEPC水 将DEPC按1‰浓度加入超净水中，充分混合后静置过夜，15~20min高压消毒，之后室温避尘存放。2.0.1mol PBS pH 7.4A液：0.1mol NaH2PO4
反应条件对杂交的影响
(一)杂交的反应条件 自1975年Southern发明Southern杂交方法以来，人们又发展了许多方法可以使溶液中的放射性探针与固定在滤膜上的核酸杂交，这些方法在原理上都基本相同，所不同之处只是反应条件。反应条件有如下主要区别。 1．所用的杂交溶剂和温度不同，如水溶液中68℃，50％甲
小鼠S100B蛋白(S100B)ELISA试剂盒操作步骤
我司ELISA试剂盒品质保证，质量优，价格实惠，是您生物实验的首选，如有需要可与我司销售人员联系。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清血浆及相关液体样本中小鼠S100B蛋白(S-100B)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠S100B蛋白(S-100B)水平。用纯化的
分子杂交技术Northern杂交的操作步骤
(1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。 (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。 (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。 (4) 用下列两种溶液之一进行
不同的反应条件对杂交结果的影响
(1) 根据杂交液的体积确定杂交的时间：一般来说使用较小体积的杂交液比较好，因为在小体积溶液中，核酸重新配对的速度快、探针用量少，从而使滤膜上的DNA在反应中起主要作用。但在杂交中必须保证有足够的杂交溶液覆盖杂交膜。(2) 根据所用的杂交溶液确定杂交的温度：一般来说，杂交相为水溶液时,则在68℃杂交
分子杂交技术不同的反应条件对杂交结果的影响
(1) 根据杂交液的体积确定杂交的时间：一般来说使用较小体积的杂交液比较好，因为在小体积溶液中，核酸重新配对的速度快、探针用量少，从而使滤膜上的DNA在反应中起主要作用。但在杂交中必须保证有足够的杂交溶液覆盖杂交膜。 (2) 根据所用的杂交溶液确定杂交的温度：一般来说，杂交相为水溶液时,则在6
小鼠S100B蛋白(S100B)ELISA试剂盒使用说明
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清血浆及相关液体样本中小鼠S100B蛋白(S-100B)的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠S100B蛋白(S-100B)水平。用纯化的小鼠S100B蛋白(S-100B)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入S100
Southern－杂交技术1
Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位，可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割，通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段，随后，使DNA在原位变性，并从凝胶转移至固相膜
大鼠S100蛋白(S100)酶联免疫分析试剂盒使用说明
检测范围： 96T15 ng/L -400 ng/L 使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中S100蛋白(S-100)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大
间接原位PCR（原位杂交PCR）
与直接原位PCR所不同的是，靶基因在扩增时不进行标记基团的掺入，而是标记一段与扩增片段互补的探针，在扩增结束后，应用此探针进行原位杂交。因此，此处主要介绍原位杂交，其余方法同原位PCR。一、预杂交1. 试剂与配制2×SSC50%去离子甲酰胺：用4×SSC配制（v/v）预杂交液：2×SSC，5%硫酸葡
原位杂交操作规程
（一）、仪器设备 医用微波炉； 水浴锅。 （二）、试剂 0.2mol/L HCl：HCl 8.2ml，H20 定容0.5L。0.1mol/L三乙醇胺(pH8.0):三乙醇胺 5.33ml，H20 定容0.4L。.5ml/L醋酸-2.5ml/L醋酸酐:三乙醇胺 13.2m
硝酸纤维素膜(NC膜)的简介和生产原理3
NC膜的应用举例分子杂交杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。固相杂交技术目前较为常用，先将待测核酸结合到一定的固相支持物上，再与液相中的标记探针进行杂交。固相支持物常用硝酸纤维素膜。固相杂交包括膜上印迹杂交和原位杂交。前者包括三个基本过程：第一，通过印迹技术将核酸片段转移到固相支持物上；第二，用标记探
人S100钙结合蛋白A8（S100A8）ELISA检测试剂盒
检测原理试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人S100钙结合蛋白A8（S100A8）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品
100mmol/L－PMSF配制方法
溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中，定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20℃。
100％三氯乙酸（TCA）配制方法
在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）