一级菌种培养基的试验方法
一级菌种培养基的试验方法! 一、实验目的 1.了解一级菌种培养基配制的原则; 2.掌握一级菌种培养基配制的工艺流程; 3.学会一级菌种培养基配制的具体方法步骤; 4.学会棉塞的制作方法和手提式高压蒸汽锅的使用方法。 二、实验设备、工具和材料 手提式高压锅、1000~1500W电炉、感量1/10g的粗天平、1000mL量杯、玻璃漏斗、漏斗架各一个,8~10cm长乳胶管一根,止流夹一个,20mm×200mm试管150支左右,铁丝筒两个,小刀和剪子一把,普通棉花250g,牛皮纸、马铃薯、琼脂和葡萄糖或蔗糖适量。 三、实验步骤 (1)取适量马铃薯,削去皮,挖去芽眼。称取200g,切成薄片或小块,用清水淘洗之后,放入锅内,加水1200mL,用文火煮沸20~30min,用四层纱布过滤,取滤液1000mL,如不足加水补足1000mL。 (2)称取琼脂20g,洗净剪碎,加入马铃薯煮......阅读全文
常用实验室菌种保存方法
微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设计的。保藏方法大致可分为以下几种:1.传代培养保藏法又
微生物菌种保藏方法(一)
微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡,因而常常造成菌种的衰退,并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定,确保菌种不死亡、不变异、不被污染,以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。菌种保藏的方法有哪些呢?传代保存法有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理
微生物菌种保藏方法(二)
⑤麸皮保存法 在麸皮内加入60%的水,经灭菌后接种培养,最后干燥保藏。⑥纸片(滤纸)保存法 将灭菌纸片浸入培养液或菌悬液中,常压或减压干燥后,置于装有干燥剂的容器内进行保存。寄主保存法 微生物侵入其寄主后加以保存的方法。冷冻保存法 适用于抗冻力强的微生物。这些微生物可在其菌体细胞外遭受冻结的
菌种的培养
人们采取无菌操作的方法,把某种食用菌从混杂的微生物中,单独地分离开来,这个过程叫做菌种分离。从分离过程中得到的菌丝体纯化后,就是纯菌种。在实验室条件下,以人工使纯菌种大量生长和繁殖的方法,叫做培养。下面由小编带大家了解一下,如何培养菌种。1.1材料1.1.1 菌种 枯草芽孢杆菌。1.1.2 培养基
厌氧培养箱的菌种培养方法
厌氧培养箱菌种培养方法:1.检查取样室内门并关紧;2.打开取样室外门,将菌种放入取样室后即关上外门;3.取样室充氮置换三次过程:打开真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打开氮气阀2进气,使指针回复零位,关掉阀2。第二次重复操作一次。第三次操作时,使真空度500ml汞柱(66
甲基红试验培养基的配制
[用途]检查细菌发酵葡萄糖产酸的能力;用于鉴别某些细菌,如大肠埃希菌(阳性)、产气杆菌(阴性)、阴沟杆菌(阴性),克雷伯菌属一般为阴性,耶尔森茵属阳性,其它革兰阴性非肠道杆菌阴性,单核李斯特菌阳性。[配法]⑴ 葡萄糖蛋白胨水培养基(见前)。⑵ 试剂:甲基红0.1g,95%乙醇300m1,蒸馏水200
培养基的保存方法
第一:培养基灭菌后应立即取出,不得储藏在高压 菌器中,避免影响质量。制备好的应保存在2~25℃、避光的环境。第二:商品化培养基应根据使用说明书上的要求进行储存。标签上应标有批号,生产日期、有效期及有关特性。所采用的保藏和运输条件应使培养基限度失去水分并提供机械保护。第三:保存于密闭容器中,可防止水
微生物菌种的扩大培养技术(一)
微生物菌种的扩大培养技术菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序,该工序又称之为种子制备。种子制备不仅要使菌体数量增加,更重要的是,经过种子制备培养出具有高质量的生产种子供发酵生产使用。因此,如何提供发酵产量高、生产性能稳定、数量足够而且不被其他杂菌污染的生产菌种,是种子制备工艺的关键。一、种子扩大培养
菌种保藏
实验概要学习与比较几种菌种保藏的方法。实验原理 微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素,所以,菌种保藏方法虽多,但都是根据这三个因素而设
制取纤维素酶的菌种和方法
纤维素酶来源非常广泛,昆虫、微生物(细菌、放线菌、真菌等)都能产生纤维素酶,通过微生物发酵方法是大规模制备纤维素酶的有效途径。不同微生物合成的纤维素酶在组成上有显著的差异,对纤维素的酶解能力也不大相同。由于放线菌的纤维素酶产量极低,研究很少。细菌的产量也不高,主要是葡聚糖内切酶,且大多数对结晶纤维素
冷冻保藏菌种有哪些切实可行的方法
冷冻保藏是指将菌种于-20 ℃以下的温度保藏, 冷冻保藏为微生物菌种保藏十分有效的办法。经过冷冻,使微生物代谢活动中止。一般而言,冷冻温度愈低,作用愈好。为了保藏的成果愈加令人满意,通常在培育物中加入一定的冷冻保护剂;一起还要认真掌握好冷冻速度和解冻速度。冷冻保藏的缺陷是培育物运输较困难。*先要给大
分享丨几种菌种的保存及复苏方法!
定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下:1.培养基制备1.1器皿准备培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如,三角瓶、试管、培养皿、烧杯、吸
微生物菌种的扩大培养技术
菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序,该工序又称之为种子制备。种子制备不仅要使菌体数量增加,更重要的是,经过种子制备培养出具有高质量的生产种子供发酵生产使用。因此,如何提供发酵产量高、生产性能稳定、数量足够而且不被其他杂菌污染的生产菌种,是种子制备工艺的关键。 种子扩大培养的任务 工
嗜盐性试验培养基
成分 蛋白胨 2g 氯化钠 按不同量加 蒸馏水 100mL pH7.7制法 配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)不加;(2)3g;(3)7g;(4)9g;(5)11g。待溶解后分装试管。121℃高压灭
蛋白质一级结构的测定方法(一)
研究蛋白质的一级结构从确定组成蛋白质的单元结构棗氨基酸算起,已有150年的悠久历史,直到1955年,Sanger首次阐明胰岛素的氨基酸排列顺序,为研究蛋白质的一级结构开辟了道路。这在分子生物学的发展进程中是一个重要突破。目前关于核酸的一级结构研究,由于Sanger等发明了加减法,可以得到了突
蛋白质一级结构的测定方法(三)
2)酶解法 酶水解法较化学法具有更多的优越性,使用也更广泛。因其具有较高专一性,而且水解产率较高,所以可以选择各种不同专一性的酶进行专一性的断裂。 常用的酶有胰蛋白酶、糜蛋白酶、胃蛋白酶和嗜热菌蛋白酶。 胰蛋白酶专一断裂Lys,Arg的羧基侧肽键,如果对Lys,Arg,CysH进行化学修
蛋白质一级结构的测定方法(二)
2)末端分析 其方法较多,这里我们只介绍较常用的几种。 (1)N-末端测定 A.二硝基氟苯法(FDNB,DNFB):1945年Sanger提出此方法,是他的重要贡献之一。 DNP-氨基酸用有机溶剂抽提后,通过层析位置可鉴定它是何种氨基酸。Sanger用此方法测定了胰岛素的N末端分别为甘
培养基配制方法
配制培养基有两种方法可以选择:一是购买培养基中所有化学药品,按照需要自己配制;二是购买商品的混合好的培养基基本成分粉剂,如MS、B5等。
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
培养基灭菌方法
培养基的灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则
培养基灭菌方法
1.灼烧灭菌将微生物的接种工具,如接种环、接种针或其他金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧,可以迅速彻底地灭菌。此外,在接种过程中,试管口或瓶口等容易被污染的部位,也可以通过火焰灼烧来灭菌。2.干热灭菌将灭菌物品放入干热灭菌箱内,在160~170℃加热1~2h可达到灭菌的目的。能耐高温的、需要
菌种的储运条件
建议可主要用于普通细菌的短期运送,对于厌氧菌在运送时最好让其处于厌氧环境下,2-8℃运送不超过5 天。另外需要说明的是如弧菌属和绿脓杆菌需要常温运送,其对2-8℃温度极其敏感。
菌种保存的原理
菌种保存的原理是预防或减缓DNA 复制时自发突变导致菌种退化,因此要创造代谢不活泼的状态,而菌种保存时使菌种进入休眠态(孢子、芽孢),并创造干燥、低温、缺氧、缺营养的环境,创造的环境越接近此状态,所保存的菌种的时间就越长,所以从原理上讲,所有菌种都可用这种方法保存, 但需要注意的是,苛刻菌(如流感嗜
菌种种类有那些
一、固体菌种 母种→原种→栽培种 1、母种 母种:在试管或平皿琼脂培养基上生长的纯菌种称为母种,因为是用试管制作 的,也称之为试管种,因为是最早一级的菌种,也称之为一级种。 试管的规格一般为22mm×220mm、20mm×200mm、18mm×180mm三种,如果采用液体菌种建议使用18mm×180
特殊细胞试验对培养基的要求
放射性同位素32P常用于细胞信号的转导研究。由于磷酸化是常见的蛋白修饰和信号转导形式,因此,32P标记的磷酸盐可掺入到被磷酸化修饰的蛋白中而被检测到,从而反映出磷酸化蛋白的浓度。在这一过程中,具体位点的磷酸化以及上游的作用信号都是待验证的因素。在该研究中,模型细胞、带有突变位点的转染质粒、捕获蛋白和
氰化钾试验培养基的配制
[用途]主要用于属间的鉴别,生长有:弗氏枸橼酸杆菌、克雷伯菌-肠杆菌菌群、铜绿假单胞菌;不生长:沙门菌-亚利桑那菌群、大肠埃希菌、粪产碱杆菌。[配法]蛋白胨10g,氯化钠5g,磷酸二氢钾 0.225g,磷酸氢二钠 4.5g,蒸馏水lL。将上述成分加热溶解在三角烧瓶中, 121℃灭菌15min,临用时
培养基的制备基本方法
培养基配方的选定 同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对.再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源。 培养基的制备记录 每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源.和各种成份的牌号
培养基的制备基本方法
培养基配方的选定 同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对.再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源。 培养基的制备记录 每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源.和各种成份的牌号
常用的细菌培养基方法
牛肉膏琼脂牛肉膏0.3克,蛋白胨1.0克,氯化钠0.5克,琼脂1.5克,水100毫升在烧杯内加水100毫升,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2
培养基质量控制与保存
一、物理性状的质量控制应包括20℃ -25 ℃时的pH,并应观察以下内容:加入培养基的量和(或)琼脂层的厚度、颜色、透明度、是否存在肉眼可见的杂质、凝胶稳定性/黏稠度(一致性)、湿度。灭菌前后都应测定pH,采用连接可渗透陶器型液体接头的电极测定液体培养基的pH,固体培养基可用平头电极或者连接微型探头