全血基因组提取操作步骤

操作步骤((200ul全血))* 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇! 1. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管。对如果全血起始量小于200μl,则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之间,则后续操作需要按照比例增加试剂用量。如果起始量介于300μl-1毫升之间,则需要先进行红细胞裂解操作(见本说明书后附录)。2. 加入200μl 结合液CB,立刻剧烈颠倒轻摇,充分混匀,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,颠倒轻摇充分混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮(但颜色偏黑色)。3. 加入100μl 异丙醇,剧烈颠倒轻摇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。上述各操作步骤中适当力度充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀,但不可用手剧烈振荡,以免剪切DNA。4. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都......阅读全文

利用CTAB法提取植物基因组DNA

一、实验原理 CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)是一种去污剂,可溶解细胞膜并能与核酸形成复合物,该复合物在高离子强度(0.7mol/L)的溶液里是可溶的,通过离心可将复合物同蛋白质、多糖类物质分开。在酚仿变性的条件下,去除残留的CTAB和蛋白质等杂质,然后利用异戊醇或无水乙醇将DNA分

提取基因组DNA的方法有哪些

1、苯酚氯仿抽提法优点是采用了实验室常见的试剂和药品,做起来成本比较低廉。缺点是由于使用了苯酚、氯仿等试剂,毒性较大,长时间操作对人员健康有较大影响,而且核酸的回收率较低,损失量较大,由于操作体系大,不同实验人员操作重复性差,不利于保护RNA,很难进行微量化的操作。 2、离心柱法离心柱法DNA提取它

基因组所肝癌全基因组合作研究取得新进展

  近日,由中国科学院北京基因组研究所所长吴仲义及其科学团队与国立台湾大学医学院陈定信院士、陈培哲院士共同合作开展的“肝癌癌症基因组合作研究”计划获最新进展,相关学术论文在在最新出版的PNAS杂志上发表。  “肝癌癌症基因组合作研究”计划于2009启动,作为基因组所一项长期的癌症基因

822人末梢全血5种无机元素分析

分析5种无机元素在不同年龄段的变化情况.方法:用原子吸收光谱法测定了822名受试者末梢全血中铜、锌、铁、钙和镁浓度,并将受试者按年龄分为4个组进行统计学分析.结果:婴儿组(A组)微量元素铜与幼儿组(B组)、学龄前儿童组(C组)和学龄儿童及成人组(D组)均存在明显差异;微量元素锌在各组之间均存在明显差

根除结核不是梦:新的全血分析技术

根除结核(TB)的难点之一是难以鉴别潜伏性结核感染(LTBI)。结核菌素皮试(TST)和干扰素-γ释放试验(IGRAs)均不能鉴别潜伏期和活动期结核,也无法预测再次活跃的时机。发表于Journal of Molecular Diagnostics杂志上的一篇研究指出,针对8名个体的免疫标记的多靶点、

临床化学检查方法介绍全血还原黏度介绍

全血还原黏度介绍:  全血黏度随红细胞的压积而变化,红细胞压积越高,全血的表现黏度越大。为了消除红细胞压积影响,便于比较不同血样的黏度,一些学者引入了全血还原黏度的概念。全血还原黏度正常值:  6.65-8.15mPa·s。全血还原黏度临床意义:  (1) 增高:缺血性脑卒中、心肌梗死、冠状动脉粥样

O型全血是万能的吗?

人类的ABO血型系统是最先发现的血型系统,因为具有规律的血型抗体,因此是最重要的血型系统,分为A、B、O及AB四型。其中,只有O型人的红细胞上缺乏A、B抗原,故这种细胞可以输给A型、B型和AB型人。所以,曾把O型全血称为“危险的万能血”。在第二次世界大战期间,由于战地血源紧缺及当时输血科学水平低下,

血液的化学检验项目全血乳酸测定介绍

全血乳酸测定介绍:  乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。全血乳酸测定正常值:  全血乳酸0.5-1.7mmol/L(5-15mg/dl)。全血乳酸测定临

临床化学检查方法介绍全血比黏度介绍

全血比黏度介绍:  全血比黏度不仅检测血液本身(主要是红细胞)的变化,亦可了解血管和心脏的变化。  全血比黏度分为高切变和低切变两种黏度。高发变黏度反映红细胞的变形能力,红细胞变形能力低的血液,其高切变黏度便高;低切变黏度反映红细胞的聚集能力,红细胞相互聚集的血液,其低切变黏度增高。全血比黏度正常值

血液的化学检验项目全血还原黏度介绍

全血还原黏度介绍:  全血黏度随红细胞的压积而变化,红细胞压积越高,全血的表现黏度越大。为了消除红细胞压积影响,便于比较不同血样的黏度,一些学者引入了全血还原黏度的概念。全血还原黏度正常值:  6.65-8.15mPa·s。全血还原黏度临床意义:  (1) 增高:缺血性脑卒中、心肌梗死、冠状动脉粥样

医院全血零库存的可行性分析

【摘要】  目的 正确理解库存全血的概念、纠正错误的思想观念、严格把握全血输注的适应证等。方法 采用列表归纳的方法,分析柳州市人医院2005年9月~2006年9月各科的用血情况,以了解不合理使用全血的程度。结果 全血并不全,备全血没有起到真正意义上的作用。结论 全血零库存是提高成分输血的

临床化学检查方法介绍全血镍(Ni)介绍

全血镍(Ni)介绍:  全血镍的测定,有助于估计急性镍中毒的程度。并且对心肌梗死、脑血管意外等疾病有一定的诊断意义。全血镍(Ni)正常值:  分光光度法(AAS):0.15-7.7μmol/L (0.9-44.5μg/dl)。全血镍(Ni)临床意义:  (1) 升高:急性心肌梗死(镍一过性上升,发作

血液的化学检验项目全血乳酸测定介绍

全血乳酸测定介绍:  乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。全血乳酸测定正常值:  全血乳酸0.5-1.7mmol/L(5-15mg/dl)。全血乳酸测定临

献血小板和献全血究竟啥区别?

 献全血和献血小板有啥区别呢?最直观的答案当然是颜色上的区别啦:献全血所采集的血液是红色的,而捐献血小板所采集的血液可是黄色的~  啥是献全血?   我是红色血液,来自于全血捐献~   献全血:通常我们说的“献血”,基本上指的是就是献“全血”。即抽取300ml或400ml献血者血液的全部成分,只要通

临床化学检查方法介绍全血乳酸测定介绍

全血乳酸测定介绍:  乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨胳,肌肉,脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。全血乳酸测定正常值:  全血乳酸0.5-1.7mmol/L(5-15mg/dl)。全血乳酸测定临

Nature-Genetics:全基因组测序的诊断价值

   根据《Nature Genetics》上发表的一项新成果,全基因组测序有望用于临床上的遗传病诊断。这项研究评估了影响全基因组测序在临床诊断中取得成功的因素。  这个国际研究小组由英国的研究人员领导,对156个病例或家庭开展了临床基因组测序。这些病例有着遗传疾病的特征,但无法通过之前的筛查检测来

全基因组设计培育高产优质抗病粳稻

近日,江苏里下河地区农业科学研究所李爱宏团队联合中国农业科学院植物保护所宁约瑟团队、扬州大学杨泽峰团队在《基因组生物学》发表研究论文。    该研究收集了我国江苏省、浙江省和山东省等地大面积推广的198份粳稻品种并进行基因组重测序分析,解析了华中地区优良粳稻品种的基因组信息和优势基因位点的遗传学

芝麻大规模全基因组关联分析完成

  由中国农科院油料所张秀荣研究员领衔的芝麻与特色油料遗传育种创新团队,与中科院国家基因研究中心等单位合作,在国际上率先完成了芝麻高密度单倍型图谱构建、主要农艺性状大规模全基因组关联分析。10月19日,国际知名期刊《自然·通讯》杂志在线发表了上述研究成果。  该研究得到973、国家自然科学基金、中国

动物全物种基因组测序仍有很大空白

   近日,美国华盛顿州立大学领导的一项研究发现,目前对动物基因组进行的测序多数集中在与人类相似的动物上,研究人员警告称,该现状可能会忽视大量的生物多样性和机会。相关研究结果发表于美国《国家科学院院刊》。  研究人员分析发现,近3300种动物的基因组已被测序。虽然动物物种测序工作一直在进行,但与世界

全基因组测序提高罕见病诊断率

  每4300人中就有1人患有线粒体疾病,并会导致进行性的不治之症。这种疾病是最常见的遗传疾病之一,但对临床医生来说很难诊断,这是因为它们可以影响许多不同的器官,并与许多其他疾病相似。而其中40%的患者未能被目前的基因检测制度诊断。  近日,英国研究人员的一项新研究为尚不能被确诊的患者带来了希望。该

Science:全基因组测序探究疟疾传播机制

  近日,发表在国际杂志Science上的一篇研究论文中,来自加拿大西蒙弗雷泽大学等处的研究人员对可传播疟疾的16种按蚊进行了遗传测序,从而为揭示人类为何对其易感提供了新的思路和线索。  文章中,研究者Cedric Chauve表示,我们利用计算机方法来重新构建蚊子祖先的基因组,并且分析在过去1亿年

全基因组测序提高罕见病诊断率

每4300人中就有1人患有线粒体疾病,并会导致进行性的不治之症。这种疾病是最常见的遗传疾病之一,但对临床医生来说很难诊断,这是因为它们可以影响许多不同的器官,并与许多其他疾病相似。而其中40%的患者未能被目前的基因检测制度诊断。 近日,英国研究人员的一项新研究为尚不能被确诊的患者带来了希望。该研

全基因组及转录组测序案例分析

案例:应用全基因组测序和 RNA 测序来描绘常见的变异型免疫缺陷综合症(CVIDs)的基因图谱 背景:常见的变异型免疫缺陷综合症(CVIDs)是机体免疫应答反应中不能产生抗体的最主要原因。CVIDs 变异度很高,大概 5% 的病人是由基因改变引起的。 目的:利用 Illumina HiSeq25

又一灭绝物种全基因组数据解析

日前,吉林大学考古学院蔡大伟教授团队与西北农林科技大学动物科技学院姜雨教授团队在马属动物古DNA研究领域取得重要进展。该研究在国际上首次成功获取已灭绝马属动物奥氏马的高质量全基因组数据,重建了马属动物的演化历史。  马科动物自古以来就与人们的关系密切,对人类社会文明的发展产生了重大影响。中国家马起源

人类不同祖先的全基因组关联分析

  一项由埃克塞特大学领导的发表在《Nature Genetics》上的研究扩大了人类不同祖先的全基因组关联分析,并最终受益于全球患者护理。到目前为止,近87%的这种类型的基因组研究是在欧洲人身上进行的。  Lundquist研究所翻译基因组学和人口科学研究所研究员和所长,加州大学洛杉矶分校Geff

草鱼全基因组序列图谱绘制完成

  近日,记者从中国科学院水生生物研究所获悉,该所鱼类功能基因组学学科组负责的草鱼全基因组序列图谱绘制完成。该成果由水生生物研究所、中国科学院国家基因研究中心和中山大学等机构合作完成,相关研究成果于5月4日在线发表于《自然—遗传学》杂志。  据该所研究员汪亚平介绍,该研究采用鸟枪法测序策略,分别对一

全基因组测序确定脑瘤的基因变异

  日前,圣犹达儿童研究医院(St. Jude Children's Research Hospital)的研究人员在新研究中鉴别出了一种儿童脑瘤亚型一半以上患者的致病性突变。此外他们还证实这些肿瘤对已经在研发中的一些药物敏感。这项研究论文刊登在了近期出版的《自然-遗传学》(Nature Genet

全基因组测序解密慢性高原病

  8月16日,由加州大学圣地亚哥分校、华大基因等单位共同完成的安第斯高地人慢性高原病全基因组测序及相关研究,在《美国人类遗传学杂志》上发表。研究为探索高原适应性的遗传机制提供了基础理论,也为慢性高山病的机理研究及治疗提供了科学依据。   全球约有1.4亿人世居高原。对于高原低氧环境的不适,通常会

关于全基因组测序的测序指标介绍

  一、全基因组测序的测序指标— 深度  测序深度(Sequencing depth)是指测序得到的碱基总量(bp)与基因组大小的比值,它是评价测序量的指标之一。测序深度与基因组覆盖度之间是一个正相关的关系,测序带来的错误率或假阳性结果会随着测序深度的提升而下降。测序的个体,如果采用的是双末端或Ma

买麻藤类植物全基因组破译

  近日,由深圳市中国科学院仙湖植物园,中科院中-非联合研究中心、武汉植物园、植物研究所,英国皇家植物园邱园等10余家国内外知名院所联合开展的“裸子植物——买麻藤全基因组计划”取得重要进展。  裸子植物和被子植物的起源、分歧及演化,是现代植物学科的基础热点领域。现存35万余种种子植物被分成苏铁类、松