全血基因组提取操作步骤
操作步骤((200ul全血))* 第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇! 1. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管。对如果全血起始量小于200μl,则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于200μl-300μl之间,则后续操作需要按照比例增加试剂用量。如果起始量介于300μl-1毫升之间,则需要先进行红细胞裂解操作(见本说明书后附录)。2. 加入200μl 结合液CB,立刻剧烈颠倒轻摇,充分混匀,再加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,颠倒轻摇充分混匀,70℃放置10分钟,溶液应变清亮(但颜色偏黑色)。3. 加入100μl 异丙醇,剧烈颠倒轻摇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。上述各操作步骤中适当力度充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀,但不可用手剧烈振荡,以免剪切DNA。4. 将上一步所得溶液和絮状沉淀都......阅读全文
病毒-DNA-的提取实验——全血细胞中病毒-DNA-的提取
实验材料全血试剂、试剂盒裂解缓冲液 A裂解缓冲液 B蛋白酶 K仪器、耗材离心机水浴锅实验步骤1. 在 750µl 全血中加入等量裂解缓冲液 A,混匀, 12000 r/min 离心 30 s, 弃上清液。2. 用 1.5mL 裂解缓冲液 A 悬起沉淀,再重复离心 1次,弃上清液。3. 用 117µL
血液的化学检验项目介绍全血铅
全血铅介绍: 铅(plumbum,Pb),原子量207.19,银灰色软金属。比重11.35(20℃),熔点327.4℃,沸点1620℃。化合价2和4。不溶于水、稀盐酸和硫酸。可溶于硝酸、醋酸和碱液。加热到400-500℃时,即产生大量蒸气。铅蒸气在空气中迅速氧化成氧化铅(Pb2O)。常见的无机铅化
在何种情况下可以输全血?
血容量不足且有进行性出血的急性大量失血病人可以考虑输部分全血。全血能同时提高血液携氧能力和补充血容量。临床适用全血的情况并不多见。
临床化学检查方法介绍全血汞介绍
全血汞介绍: 人体内含汞约13mg。汞有两大类化合物,即无机汞及有机汞。经口摄入的汞量,主要来自食用大米和鲜鱼中含汞量,约为总摄入量的一半。无机汞被肠道吸收率约1%,而甲基汞吸收率高达90%。汞主要经尿、毛发排泄。一旦肾排出高浓度汞时,会使肾产生损害。汞对一系列酶产生特异性抑制,致使这些生物酶失去
血液的化学检验项目介绍全血容量
全血容量介绍: 正常人的血液总量约占体重的6%-8%,成人平均约5000ml。妊娠期血量可增加23%-25%。全血容量正常值: 51Cr标记红细胞法:65-90ml/kg。全血容量临床意义: (1) 减少:出血、休克、严重腹泻、黏液性水肿。 (2) 增加:真性红细胞增多症、白血病、肝硬化、充
血液的化学检验项目全血比黏度
全血比黏度介绍: 全血比黏度不仅检测血液本身(主要是红细胞)的变化,亦可了解血管和心脏的变化。 全血比黏度分为高切变和低切变两种黏度。高发变黏度反映红细胞的变形能力,红细胞变形能力低的血液,其高切变黏度便高;低切变黏度反映红细胞的聚集能力,红细胞相互聚集的血液,其低切变黏度增高。全血比黏度正常值
血液的化学检验项目全血锰介绍
全血锰介绍: 人体内含锰12-18mg。锰主要在肠道吸收,通过肝脏随胆汁排入粪便,少量可由肠道再吸收。经尿排泄的锰尚不到总排出量的10%。骨骼中锰积蓄量约占全身总量43%。由于锰参与多种酶的组成和激活作用,既与蛋白质合成有关,又可改善动脉粥样硬化者的脂质代谢。锰还能促进铁吸收和利用,参与黏多糖合成
血液的化学检验项目全血镉介绍
全血镉介绍: 正常成人镉负荷量为30-45mg,从出生后不断蓄积,使体内镉浓度随年龄增长而递增,一直到50岁左右为止。镉的来源是食物、水和空气,因此含镉废渣对土壤、水源的污染,可对人体健康产生危害。经口或呼吸道吸收的镉转移到血液后,大部分浓集在肾、肝,小部分分布在胰腺、甲状腺,胆、睾丸、骨骼中。镉
血液的化学检验项目全血铬介绍
全血铬介绍: 成人体内铬总量约6mg。铬由肠道吸收,进入血浆后与运铁球蛋白结合,将铬运至肝脏及全身。铬主要由尿液排出。铬能增加胆固醇的分解和排泄,降低血中胆固醇,预防动脉硬化形成。铬也是葡萄糖耐量因子(功能为辅助胰岛素利用葡萄糖)的一个有效组成。因此,体内铬的含量与心血管疾病的发病率呈负相关。铬对
血液的化学检验项目全血硒介绍
全血硒介绍: 成人体内硒总量为14-21mg。从肠道吸收的硒进入血浆后,主要与血中球蛋白和脂蛋白结合运往全身组织。其主要贮存于肝、肾、脾、肺、心肌、血液中,其中约1/3的硒存在于谷胱甘肽过氧化物酶中。其含量在体内未饱和前很少排出。进入体内过量的硒,可在肝脏转化为具有挥发性的二甲基硒从呼气中排出。硒
血液的化学检验项目全血砷介绍
全血砷介绍: 成人体内砷总量为15-20mg,主要分布在头发、指甲、骨骼、皮肤中。进入体内的砷先在血中转化,再分布至全身组织,体内砷主要从尿排出。砷中毒与砷对体内巯基有强大结合力有关,使大量含巯基酶类失活。从而阻碍细胞内生化代谢,并使机体抗氧化能力明显减退。全血砷正常值: 全血:0.4-12.0
临床化学检查方法介绍全血铬介绍
全血铬介绍: 成人体内铬总量约6mg。铬由肠道吸收,进入血浆后与运铁球蛋白结合,将铬运至肝脏及全身。铬主要由尿液排出。铬能增加胆固醇的分解和排泄,降低血中胆固醇,预防动脉硬化形成。铬也是葡萄糖耐量因子(功能为辅助胰岛素利用葡萄糖)的一个有效组成。因此,体内铬的含量与心血管疾病的发病率呈负相关。铬对
临床化学检查方法介绍全血硒介绍
全血硒介绍: 成人体内硒总量为14-21mg。从肠道吸收的硒进入血浆后,主要与血中球蛋白和脂蛋白结合运往全身组织。其主要贮存于肝、肾、脾、肺、心肌、血液中,其中约1/3的硒存在于谷胱甘肽过氧化物酶中。其含量在体内未饱和前很少排出。进入体内过量的硒,可在肝脏转化为具有挥发性的二甲基硒从呼气中排出。硒
临床化学检查方法介绍全血砷介绍
全血砷介绍: 成人体内砷总量为15-20mg,主要分布在头发、指甲、骨骼、皮肤中。进入体内的砷先在血中转化,再分布至全身组织,体内砷主要从尿排出。砷中毒与砷对体内巯基有强大结合力有关,使大量含巯基酶类失活。从而阻碍细胞内生化代谢,并使机体抗氧化能力明显减退。全血砷正常值: 全血:0.4-12.0
从全血采样、保存、运输到RNA纯化
血液采集: PAXgene系统提供标准化的BD Vacutainer(真空采血管,室温保存),配合使用一次性消毒采血针作静脉穿刺,采血管内的负压会迫使血液自动吸入管中,当搜集的血液达到2.5毫升刻度线时停止采血。采血管中本身已经预装了6.9毫升的RNA稳定试剂,拔出针头后只要将采血管轻轻颠倒8
对库存全血外观检查应注意什么?
(1)絮状物:在血浆层中呈粘丝状漂浮,有时有少量红细胞粘附,若反复摇动易沉入红细胞层引起红细胞粘附形成凝块。 (2)凝块:如发现凝块不得出库,可离心转做其他血液成分。 (3)溶血:当血液静止沉淀后,血浆部分呈透明均匀红色。 (4)细菌污染:血袋内发现大量气泡井伴有絮状物出现
全血分离获得血清的方法及步骤
材料与方法1.1 血清采集 MG患者全血来自2004~2005年就诊于辽宁中医学院附属医院的门诊患者。根据典型临床表现、新斯的明试验、低频重复电刺激及单纤维肌电图等确诊,无其他自身免疫性疾病,未经其他免疫抑制治疗,并参照1994年版《中医病证诊断疗效标准》辨证为脾肾虚型。正常人血清取自同时期健康志愿
关于全血砷的基本内容介绍
成人体内砷总量为15-20mg,主要分布在头发、指甲、骨骼、皮肤中。进入体内的砷先在血中转化,再分布至全身组织,体内砷主要从尿排出。砷中毒与砷对体内巯基有强大结合力有关,使大量含巯基酶类失活。从而阻碍细胞内生化代谢,并使机体抗氧化能力明显减退。 全血砷的正常值:全血:0.4-12.0;尿液:2
血液的化学检验项目介绍全血铁
全血铁介绍: 铁是必需元素,原子式亚铁原子为Fe2+,正铁原子Fe2+,原子量为55.84。正常成人体内铁总量为71.63-89.54mmol/L,其中2/3左右有生理活性,1/3为贮存铁。全血铁正常值: 男:788-1003μmol/L (44-56mg/dl); 女:752-859μmol
临床化学检查方法介绍全血镉介绍
全血镉介绍: 正常成人镉负荷量为30-45mg,从出生后不断蓄积,使体内镉浓度随年龄增长而递增,一直到50岁左右为止。镉的来源是食物、水和空气,因此含镉废渣对土壤、水源的污染,可对人体健康产生危害。经口或呼吸道吸收的镉转移到血液后,大部分浓集在肾、肝,小部分分布在胰腺、甲状腺,胆、睾丸、骨骼中。镉
血液的化学检验项目全血汞介绍
全血汞介绍: 人体内含汞约13mg。汞有两大类化合物,即无机汞及有机汞。经口摄入的汞量,主要来自食用大米和鲜鱼中含汞量,约为总摄入量的一半。无机汞被肠道吸收率约1%,而甲基汞吸收率高达90%。汞主要经尿、毛发排泄。一旦肾排出高浓度汞时,会使肾产生损害。汞对一系列酶产生特异性抑制,致使这些生物酶失去
全血、血浆和血清有什么区别
1.全血、血浆和血清有什么区别 血液经抗凝处理后的全部血液为全血;离心除去血细胞后所得到的淡黄色液体为血浆。 如血液不经抗凝处理,让他自行凝固,则在抽血后的一段时间内,血液会自动在一系列凝血因子的作用下发生凝集,血液首先凝固成一个整体,再经过一段时间或用离心机离心,血液中凝固的部分会与一些清
基因组所肝癌全基因组合作研究取得新进展
近日,由中国科学院北京基因组研究所所长吴仲义及其科学团队与国立台湾大学医学院陈定信院士、陈培哲院士共同合作开展的“肝癌癌症基因组合作研究”计划获最新进展,相关学术论文在在最新出版的PNAS杂志上发表。 “肝癌癌症基因组合作研究”计划于2009启动,作为基因组所一项长期的癌症基因
质粒dna的提取与基因组dna的提取有何异同
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用。它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单。 而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用SDS裂解和RND酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性细菌
酵母基因组DNA简易高效提取方案
1. 10ml菌液过夜培养至饱和(OD600值为2-3) 2. 离心沉降细胞(Sorvall中以2000rpm的速度),然后以冷的、等体积的无菌蒸馏水洗涤 3. 将细胞沉淀在200μl 裂解缓冲液中重悬浮,然后加入约300μl 玻璃珠和200μl的1:1苯酚:氯仿混和液 4. 漩涡摇匀1-2min
动物组织细胞基因组DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA.真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
动物细胞基因组DNA提取实验
实验原理真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从
单头昆虫基因组DNA的提取
实验概要一种简单快速提取单头小型昆虫基因组DNA的方法。主要试剂1. 蛋白酶K[美国Merck公司]2. 三羟甲基氨基甲烷(Tris)[美国Amresco公司]3. Taq DNA聚合酶及dNTP[NEB公司]4. 琼脂糖及溴化乙锭(EB)[美国Amresco公司]5. 乙二胺四乙酸钠(Na2EDT
动物组织细胞基因组DNA提取
一、实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
基因组DNA提取与PCR扩增技术
一、基因组DNA提取实验目的基因组DNA的制备是基因分析的前提。 本实验要求掌握基因组DNA提取的基本方法。实验原理 DNA在生物体内是与蛋白质形成复合物的形式存在的。核酸与蛋白质之间的结合力包括离子键、氢键、范德华力等,破坏或降低这些结合力就可把核酸与蛋白分开。 DNA、RNA所含有的嘌呤环和嘧啶