常规切片制备的注意事项(二)

6. 包埋 用包埋剂来支持组织的过程称包埋。最常用的是石蜡包埋法。包埋的关键一是平整,二是方位。要求在包埋时,应采用镊子轻压组织块拱起部份,使之平贴于底部,通常采用组织的最大面包埋。囊壁、管腔组织应竖直包埋。小块多颗组织,应尽量放在一起,并保证在一个平面上。修去两边的余蜡(所谓的两边,指切片时与切片刀垂直的两侧)。包埋时还应注意有无缝线,纸絮,如有一定要去除。胃黏膜活检标本,不能按一般的规律取最大包埋面,应采取窄面竖起包埋。包埋的蜡更应过滤,留有杂质的石蜡,容易造成污染或刀口受损。蜡的熔点应在56~58℃之间选择,不提倡在冬天使用软蜡。因为用软蜡包埋的蜡块,到了夏天,会粘在一起,不利于资料的保存,而且即使在冬天,用硬蜡包埋的蜡块也比用软蜡包埋的蜡块要好切。 7. 磨刀 要想切好一张切片,首先要有一把锋利的切片刀。磨刀是从事切片技术人员的一项最基本技术,刀磨......阅读全文

聚焦离子束法制备冷冻含水超薄切片

  低温电子断层成像三维重构(cryo-ET)技术是发展结构生物学和细胞生物学重要的研究手段。该技术可以得到更真实的接近天然状态的细胞内部高分辨率的三维结构以及蛋白质大分子定位及相互作用的信息,是蛋白质组学研究的重要辅助手段被成为“可视化蛋白质组学”(Visual Approach to Prote

详细解读血常规(二)

临床意义:(1)  中性粒细胞:增多见于急性和化脓性感染(疖痈、脓肿、肺炎、阑尾炎、丹毒、败血症、内脏穿孔、猩红热等)、各种中毒(酸中毒、尿毒症、铅中毒、汞中毒等),组织损伤、恶性肿瘤、急性大出血、急性溶血等。减少见于伤寒、副伤寒、麻疹、流感等传染病;化疗、放疗。某些血液病(再生障碍性贫血、粒细胞缺

尿常规的注意事项

  检查前禁忌:检查前一天晚上九点以后不要进食,可喝水,检查当天早上起床后不吃东西也不喝水,便于检查准确。  检查时要求:  1、留尿液标本时预先选好能装20毫升以上的广口玻璃瓶,用前一定要洗干净。  2、最好留取早上第一次尿标本送检。取尿时,最好先尿出一些再取。  3、女性患者在经期一般不宜取尿做

尿常规的注意事项

  检查前禁忌:检查前一天晚上九点以后不要进食,可喝水,检查当天早上起床后不吃东西也不喝水,便于检查准确。  检查时要求:  1、留尿液标本时预先选好能装20毫升以上的广口玻璃瓶,用前一定要洗干净。  2、最好留取早上第一次尿标本送检。取尿时,最好先尿出一些再取。  3、女性患者在经期一般不宜取尿做

连续断层3D重构中的超薄切片制备

当需要以纳米级分辨率观察样品超微结构时,科学家通常借助电子显微镜(观察表面结构的扫描电镜 SEM 和观察内部结构的透射电镜 TEM)——它们是当前科研界可使用的最大显微成像工具。电镜成像要求对样品进行通常 20-150 nm的超薄切片,使用超薄切片机切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且无人为干扰因

连续断层3D重构中的超薄切片制备

当需要以纳米级分辨率观察样品超微结构时,科学家通常借助电子显微镜(观察表面结构的扫描电镜 SEM 和观察内部结构的透射电镜 TEM)——它们是当前科研界可使用的最大显微成像工具。电镜成像要求对样品进行通常 20-150 nm的超薄切片,使用超薄切片机切割的切片厚度薄、表面平整、光滑且无人为干

普通组织石蜡包埋切片的注意事项

  1、固定剂应有足够的量,一般为组织块体积的10∽15倍。  2、根据组织的不同和实验目的的不同,选取不同的固定剂。  3、固定时间依材料大小、固定剂种类而异,可从1小时到几时小时,有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。  4、取材切面要平整,厚度不

冷冻切片术的使用注意事项

新鲜的组织组织尽可能新鲜、骤冷愈快愈好,才能避免冰晶,常用的骤冷剂有:① CO2气(-78℃) ② 丙酮干冰冷却的轻石油醚、乙烷和庚烷(-80℃) ③ 液氮(-190℃)④ 液氮冷却的丙烷(-19℃)。液氮适用于组织化学,较安全。缺点:组织块易发生龟裂。固定组织为防止水解酶和其他物质的移位、弥散,常

扫描电镜样品常规制备规程

  1.取材:根据实验目的取材,要求部位准确  2.清洗:用磷酸缓冲液反复清洗样品表面的灰尘、杂质等附着物  3.固定:用2%-3%的戊二醛固定2小时  4.清洗:用磷酸缓冲液清洗3次,每次10min  5.脱水:用50%、70%、80%、90%乙醇梯度脱水各15min,再用100%乙醇脱水3次,每

正常细胞常规核型的标本制备_肿瘤细胞染色体标本制备

实验方法原理利用肿瘤细胞无限繁殖的特点,掌握其体外生长动态,取处于对数生长期的细胞便可获得丰富的分裂相。肿瘤细胞染色体异常包括两个方面:1.  结构异常  即在肿瘤细胞常出现的染色体畸变,包括双着丝点染色体、环状染色体、断裂的染色体、染色体裂隙及微小体等。2.  数目异常  由于肿瘤细胞分裂失去应有

石蜡切片机操作注意事项

1.刮净组织包埋盒周边的余蜡,以防切片过程中样品松动影响切片质量。2.切片前,把切片机上相关锁杆或螺旋拧紧,否则可能出现跳片、切片厚薄不均现象。3.先粗修,修片厚度大约设置在15-30微米,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些。粗修至组织全暴露后再细修。4.切片时轻握手轮,用力均匀轻柔,摇速不宜过快

石蜡切片机操作注意事项

1.刮净组织包埋盒周边的余蜡,以防切片过程中样品松动影响切片质量。2.切片前,把切片机上相关锁杆或螺旋拧紧,否则可能出现跳片、切片厚薄不均现象。3.先粗修,修片厚度大约设置在15-30微米,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些。粗修至组织全暴露后再细修。4.切片时轻握手轮,用力均匀轻柔,摇速不宜过快

细菌的鞭毛免疫原常规制备方法

百分之0点3至百分之0点5的甲醛处理。首先要选择细菌株,用百分之0点3至百分之0点5的甲醛来对培养基系统消毒,然后进行细菌培养。在细菌的鞭毛免疫原常规制备过程中应注意控制细菌的温度、湿度及浓度,以保证细菌的培养和生长条件。

流式细胞术常规检测时的样品制备

一、流式细胞术常规检测时的样品制备  (一)直接免疫荧光标记法  取一定量细胞(约1X106细胞/ml),在每一管中分别加入50μl的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色,可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入),。孵育20

史上最全血常规解读(二)

临床意义: (1)  中性粒细胞:    增多:见于急性和化脓性感染(疖痈、脓肿、肺炎、阑尾炎、丹毒、败血症、内脏穿孔、猩红热等)、各种中毒(酸中毒、尿毒症、铅中毒、汞中毒等),组织损伤、恶性肿瘤、急性大出血、急性溶血等。   减少:见于伤寒、副伤寒、麻疹、流感等传染病;化疗、放疗。某些血液病(再生

常规体检检查的注意事项

  不合宜人群:怀孕期妇女。  检查前禁忌:静脉血之前,为更准确地测定血脂成分及血清中的酶类,患者应禁食禁水12-14小时,以避免进食对血脂浓度造成影响。  检查时要求:糖尿病患者在体检时最好有人陪伴,并尽量保持安静,减少活动,尽早抽取血标本。在完成所需空腹检查后,可立即按日常习惯进食并服药。待进食

白带常规检查的注意事项

  1.在进行白带检查前的24小时内,避免同房。  2.检查前避免进行盆浴、阴道灌洗及局部用药。  3.不宜在行经前后、妊娠期、应用雌激素药物后进行白带检查。

石蜡切片与冷冻切片的区别

1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片,而有的一抗只能做冰冻切片,关键取决于所要检测的抗原稳定性,有的抗原不稳定,经过组 织固定,脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤,所检测的抗原易被破坏,这时只能用冰冻切片来做,检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片, 而那些稳

石蜡切片和冰冻切片的比较

(1)要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是今天我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。(2)冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细

二甘醇的制备方法

一缩二乙二醇是环氧乙烷制乙醇时的副产品。 工艺流程:用直接水合法 将环氧乙烷与水按1:8混合送入混合反应器,在150℃下,反应40-60min,生成脱水塔进一步脱水;塔底的乙二醇混合液送入乙二醇塔,塔顶可得99.8%以上的乙二醇。塔底液送入一缩精馏塔,在塔顶温度135-140℃,压力4.0KPa下,

抗血清的制备(二)

3、免疫途径,剂量和免疫周期  抗原注射途径可根据不同抗原及试验要求,选用皮内、皮下、肌肉、静脉或淋巴结内等不同途径注入抗原进行免疫。一般常采用背部、足掌、淋巴结周围、耳后等处皮内或皮下多点注射。初次免疫与第二次免疫的间隔时间多为2~4周。常规免疫方案为抗原加CFA皮下多点注射进行基础免疫;再以

固体样品的制备(二)

水泥样品处理 方法一:准确称量0.1克样品到125毫升三角瓶烧杯中,加适量的亚沸水再加10毫升盐酸(1+1)溶解,低温加热待样品完全溶解后微沸5分钟,冷却转移到100毫升容量瓶,水稀释定容。 方法二:准确称量0.1克样品到50毫升塑料王(PTFE烧杯)中,加入10毫升氢氟酸,1毫升高氯酸分解

冷冻切片的制作方法及注意事项

冷冻切片的方法及注意事项一、实验前准备⒈清理实验台及仪器⒉开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)⒊准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品二、取材解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状

石蜡组织切片的保存方法和注意事项

许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。一些研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱,甚至阴性。因此,有学者进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月

脑组织冰冻切片的步骤和注意事项

1.固定。大鼠或小鼠灌注取脑,取脑后用多聚甲醛浸泡固定,即能达到冲洗的目的,又不损害组织。2.脱水。先后用15%,20%,30%的PB蔗糖溶液 进行脑组织梯度脱水,脑组织沉下去就是脱水好了。3.冰冻切片,推荐瑞沃德冷冻切片机。取出脑组织,用OCT胶包埋,一层层的包埋,注意:不能有气泡,否则营销切片;

石蜡切片与冰冻切片

一、组织和细胞标本类型:(一) 组织标本类:1、 石蜡切片:组织形态保存好2、 冰冻切片:抗原性保存好(二)细胞标本类:1、组织印片 2、细胞培养片(细胞爬片) 3、细胞涂片二、组织取材1、脑组织和神经组织应采用灌注固定后,再进行后固定。2、组织取材注意事项:(1)标本新鲜:组织要求离体后30min

用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片-DNA-提取方法

实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上,常规烘片,脱蜡,水化,蒸馏水清洗,无菌蒸馏水浸泡,取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下,放入 300~900 μl 组织裂解液中,并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K(PK)10~15 μl,封口膜封口,置 55℃ 3 h 以

石蜡切片法在切片步骤后为什么二甲苯无法溶掉石蜡

你在粘片后,直接将玻片放入二甲苯里面了么,如果是这样的话,你看看玻片上面是否还存在多余的水分,如果有,我建议你在粘片后,先将之烘干,等水分完全干去,再将玻片投入二甲苯里,

生命科学拉曼测试样品制备篇—冰冻切片

  拉曼光谱是一种无损、无标记、非接触式的的分析检测方法,可以为生命科学/医学研究领域的样品提供丰富的分子层面的信息。生命科学/医学研究样品有许多不同的处理和保存方法,本系列教程将介绍如何对生命科学/医学研究样品进行处理及不同处理方法如何进行拉曼测试准备。  冰冻切片  取材  取新鲜组织进行固定或

常规电极使用注意事项

常规电极使用注意事项1. 聚四氟乙烯(PTFE)(白色)外套的电极通常应在常温下使用,不宜在温度超过40°C的环境下长时间使用。2. 聚醚醚酮(PEEK)(黄褐色)外套的电极不宜在强酸碱中使用,关于PEEK的耐腐蚀性详见www.-----产品说明。3. 如果需要使用超声对电极进行进一步处理,需要注意