双光子显微镜简介

双光子荧光显微镜是结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的一种新技术。双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度,为了不损伤细胞,双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器。这种激光器发出的激光具有很高的峰值能量和很低的平均能量,其脉冲宽度只有 100 飞秒,而其周期可以达到 80 至 100 兆赫。在使用高数值孔径的物镜将脉冲激光的光子聚焦时,物镜的焦点处的光子密度是最高的,双光子激发只发生在物镜的焦点上,所以双光子显微镜不需要共聚焦针孔,提高了荧光检测效率。为形态学、分子细胞生物学、神经科学、和药理学等研究领域中重要的研究手段。市场产品供应商有徕卡(Leica)公司:双光子显微镜Leica TCS MP,蔡司(ZEI......阅读全文

双光子荧光显微镜的技术特点和使用技巧

双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度,为了不损伤细胞,双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器。

(双光子、共聚焦)荧光显微镜和普通显微镜的区别

  最近试着做了一些小鼠的冰冻切片,接下来要使用荧光显微镜看自己打的病毒是否在自己想要的脑区。荧光显微镜的一些基本原理需要简单学习一下,也在此分享一下。  荧光显微镜是利用紫外线为光源,用以照射被检验的物体,使该物体发出光源,然后在显微镜下进行对物体的观察。主要是用于免疫荧光细胞,主要是由光源、滤板

LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像(三)

Fig. 4.THG成像深度与自动化细胞检测 (A–C) 小鼠额前叶皮质的THG图像,成像深度分别为100, 200, and 300 μm 。每幅图像都是3个以2微米深度间隔独立图像的最大密度投影(D) 110 μm深度处神经元细胞的自动检测THG图像。细胞检测的运算法则定义为以红色显示的

Nature子刊:高速双光子显微镜可用于小鼠大脑成像

  近日,美国斯坦福大学Mark J. Schnitzer及其研究小组研发出可用于清醒小鼠大脑成像的千赫兹双光子显微镜。这一研究成果于2019年10月28日在线发表于国际学术期刊《自然—方法学》。  研究人员介绍,双光子显微镜是在散射介质中成像的主要技术,通常可提供约10–30 Hz的帧采集速率。 

LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像(二)

主要结果Fig. 1.无标记活体大脑的三次谐波显微成像(A)脑组织THG成像的epidetection几何学图示。插图:THG原理。注意基质中没有光学激发发生。(B) 树突处的聚焦激光束。通过将激光聚焦体积设定到树突直径的几倍大小,可以获得部分相匹配,显著的THG信号将会产生。(C)细胞

700万!西南大学双光子显微镜采购项目公开招标

公告信息:采购项目名称双光子显微镜采购品目货物/设备/仪器仪表/光学仪器/显微镜采购单位西南大学获取招标文件时间2023年10月18日至2023年10月25日每日上午:9:00 至 12:00 下午:12:00 至 17:00(北京时间,法定节假日除外)招标文件售价¥400获取招标文件的地点《中国政

LaVision双光子显微镜无损伤无标记THG成像(一)

Label-free live brain imaging and targeted patching with third-harmonic generation microscopyStefan Wittea,b,1, Adrian Negreana,b,c, Johannes C. Lodde

光子晶体光纤简介

简介光子晶体光纤简称PCF(Photonic Crystal Fiber),zui早于20世纪90年代中后期开发出来,并迅速进入商用。PCF可分为两大类:基于全内反射的折射率引导型光纤和基于光子带隙效应的光子带隙光纤。前者在结构上,光纤纤芯是固体结构,而光子带隙光纤的纤芯是低折射率材料,比如中空结构

LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(四)

Figure 4.IR-MPM的光漂白,光毒性和组织穿透性. (a)以75mW能量的760, 880, and 1100 nm 激发波长连续扫描的释放光的下降时测量的DsRed2光漂白。样品被进行250次连续扫描,释放光强度以整个扫描区域的平均像素强度量化,并对首幅图像强度归一化。虚线表明了

LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(五)

结论    这些结果表明红外双光子和二次谐波产生显微成像对于无毒害的时间分辨的细胞行为调查的深层组织成像尤其有利。作为与其它脉冲飞秒激光系统相比的优势,如Ch:forsterite (1230 nm) 和 Fianium fiber (1064 nm) 激光器,OPO产生的波长是可调谐的

LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(一)

红外双(多)光子显微镜:亚细胞水平的深层组织成像Volker Andresen1,2, Stephanie Alexander1, Wolfgang-Moritz Heupel1, Markus Hirschberg1, Robert M Hoffman3 and Peter Friedl1,4Cu

LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(三)

Figure 2 NIR和IR双光子激发和释放光谱。通过在同一焦平面对不同波长的Ti:Sa激光和OPO激光获取多幅图像并对扫描间的能量强度和漂白进行校正后的激发光谱。为获取红色和内在荧光团以及SHG的释放光谱,信号通过物镜,光谱仪和CCD相机检测。 (a) 自然状态下,SDS-PAGE前后的

双光子显微镜活体单细胞成像揭示生物钟发育过程

  3月14日,PLOS Biology 期刊在线发表了题为《斑马鱼生物钟的活体单细胞成像》的研究论文。该研究由中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所)、上海脑科学与类脑研究中心、神经科学国家重点实验室严军研究组、何杰研究组与安徽医科大学附属第一医院教授李元海合作完成。该研究成功构建

Lavision双光子共聚焦显微镜应用:毛囊再生过程活体成像

组织的发生与再生依赖于细胞-细胞间相互作用和指向干细胞的信号以及它们的直接增殖。但是,引导组织适当再生的细胞行为还没有被很好的理解。运用一种新的,非侵入的双光子成像技术,我们研究了活鼠随时间推移的生理性毛囊再生。通过这种方法,我们监测了真皮层干细胞和它们的后代在生理性毛囊再生过程中的行为,并指出了间

LaVision双光子显微镜亚细胞水平的深层组织成像(二)

系统性能和Ti:Sa与OPO激光的同时使用    为了同时获取样品Ti:Sa和OPO的激发,一个分光器将Ti:Sa激光分解为泵浦OPO光束和直接成像光束(Figure 1a). 分光比例取决于足够激发所需的光亮,先后依赖于样品特征(光密度,连续性和荧光团吸收截面)和想要的成像深度。在实际应用

我国成功研制出双光子受激发射损耗(STED)复合显微镜

  近日,在国家重点研发计划“数字诊疗装备研发”专项的支持下,由苏州国科医疗科技发展有限公司、吉林亚泰生物药业股份有限公司、中国科学院物理研究所等多家单位共同承担的数字诊疗重点研发专项(项目名称:双光子-受激发射损耗(STED)复合显微镜)获得重要进展,成功研制出国内外首台双光子-STED复合显微镜

双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像

  近日,神舟十五号航天员乘组使用由我国自主研制的空间站双光子显微镜开展在轨验证实验任务并取得成功。空间站双光子显微镜能以亚微米级分辨率清晰呈现出航天员皮肤结构及细胞的三维分布,具备对皮肤表层进行结构、组分等无创显微成像的能力。这是目前已知的世界首次在航天飞行过程中使用双光子显微镜获取航天员皮肤表皮

双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/3/494940.shtm #双光子显微镜首获航天员皮肤三维图像# 【上新!航天员在轨体检新工具】近日,神舟十五号航天员乘组使用由我国自主研制的空间站双光子显微镜开展在轨验证实验任务并取得成功。空间站双光子

三维成像!中国空间站双光子显微镜测试成功

中国空间站双光子显微镜测试成功  去年11月12日,空间站双光子显微镜搭乘天舟五号货运飞船成功运抵中国空间站,成为世界首台进入太空的双光子显微镜。 近日,中国空间站双光子显微镜完成在轨验证,神舟十五号航天员乘组通过该显微镜成功获得皮肤三维图像。  神舟十五号航天员乘组完成了双光子显微镜的安装、调试和

微型化双光子显微镜研制:从幼儿园开始读博士

今年2月上旬,神舟十五号航天员乘组使用空间站双光子显微镜,开展在轨验证实验任务并取得成功。这是目前已知的世界首次在航天飞行过程中,使用双光子显微镜获取航天员皮肤表皮及真皮浅层的三维图像。 “第三次双光子显微镜测试顺利结束!” “无比完美!” “这一次的曲线如此丝滑!” ……

LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...(三)

Fig. 5. 烟草BY-2原生质体中At2g38360-DsRed的定位和平行双光子荧光显微镜对pa-GFP的3D监测(64 foci, 920 nm, 240 mW)。 (a) 双光子荧光下降的量化分析,给出了一个123s的扩散时间常数。Figs. 3 and 4中的数据源于两个不同

370万!清华大学高速双光子显微镜采购项目公开招标

招标文件的发售时间及地点等: 登记报名时间:2022 年 8 月 2 日至 2022 年 8 月 9 日(当日 16:30 截止) 登记报名网址:http://sbcgczxxfb.sysc.tsinghua.edu.cn 申请材料:详见项目要求(营业执照复印件、法人代表授权书等) 13、投

2.2克高速高分辨微型化双光子荧光显微镜现世

   历经3年多的协同奋战,北京大学联合中国人民解放军军事医学科学院组成跨学科团队,成功研制新一代高速高分辨微型化双光子荧光显微镜,重量仅为2.2克。该科研团队通过这一微型显微镜获取了小鼠在自由行为过程中大脑神经元和神经突触活动清晰、稳定的图像。原始论文于5月29日在线发表于《自然》杂志子刊Natu

LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...(二)

3. 结果Fig. 2.含有核输入输出信号的拟南芥转录因子LCL1 (分别为NLS, NES). 由质粒编码GFP融合蛋白转染的烟草BY-2原生质体。通过单光子共聚焦激光扫描显微镜分析的GFP融合蛋白稳定态定位。(a) GFP-LCL1 揭示的核与细胞质间的分区 (b) 使用核输出抑制剂leptom

LaVision双光子显微镜多焦点扫描与光激活蛋白在...(一)

LaVision双光子显微镜-多焦点扫描与光激活蛋白在核转运研究中的应用Multifocal two-photon laser scanning microscopy combined with photo-activatable GFP for in vivo monitoring of intr

我国成功研制出双光子受激发射损耗(STED)复合显微镜

  近日,在国家重点研发计划“数字诊疗装备研发”专项的支持下,由苏州国科医疗科技发展有限公司、吉林亚泰生物药业股份有限公司、中国科学院物理研究所等多家单位共同承担的数字诊疗重点研发专项(项目名称:双光子-受激发射损耗(STED)复合显微镜)获得重要进展,成功研制出国内外首台双光子-STED复合显微镜

LaVision双光子显微镜呼吸道网络中的神经元活动

Glycinergic interneurons are functionally integrated into the inspiratory network of mouse medullary slicesStefan M. Winter & Jens Fresemann & Christi

多光子显微镜成像技术:多光子显微镜用于体内神经元...

多光子显微镜成像技术:多光子显微镜用于体内神经元成像的多种技术与传统的单光子宽视野荧光显微镜相比,多光子显微镜(MPM)具有光学切片和深层成像等功能,这两个优势极大地促进了研究者们对于完整活体大脑深处神经的了解与认识。2019年,Jerome Lecoq等人从大脑深处的神经元成像、大量神经元成像、高

双光子激发的基本原理

双光子激发的基本原理是:在高光子密度的情况下,荧光分子可以同时吸收 2 个长波长的光子,在经过一个很短的所谓激发态寿命的时间后,发射出一个波长较短的光子;其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相同的。双光子激发需要很高的光子密度,为了不损伤细胞,双光子显微镜使用高能量锁模脉冲激光器。

双光子深层光激活成像显微镜落户中科院生物物理所

中国科学院生物物理研究所膜蛋白结晶自动化加样工作站及双光子深层光激活成像显微镜采购项目中标及成交结果公告  采购人名称:中国科学院生物物理研究所   采购代理机构全称:东方国际招标有限责任公司   采购项目名称:中国科学院生物物理研究所膜蛋白结晶自动化加样工作站及双光子深层光激活成像显微镜采购项