在质粒载体中进行定向克隆实验
实验方法原理 大多数常用质粒都含有可被不同内切酶识别的多克隆位点。由于可供选择的克隆位点很多 [ 如 Invitrogen 公司的 PSE280 质粒的克隆位点有 46 个之多，而且还可以设计含有更多克隆位点的多聚接头（Brosius 1992 ) ]，因此一般来说总是能够找到一个带有与某一特定外源 DNA 片段末端相匹配的酶切位点的质粒载体。实验材料 T4 噬菌体 DNA 连接酶限制性内切核酸酶试剂、试剂盒 ATP乙醇苯酚氯仿乙酸钠TE仪器、耗材 琼脂糖凝胶聚丙烯酰胺凝胶旋转柱层析装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液ATP (10 mmol/L)，乙醇，苯酚：氯仿（1:1, V/V)，乙酸钠（3 mol/L，pH 5.2)，TE ( pH 8.0)。2. 酶与缓冲液T4 噬菌体 DNA 连接酶，限制性内切核酸酶3. 凝胶琼脂糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶。4. 核酸和单核苷酸载体 DNA ( 质粒），外源或目的 DNA 片......阅读全文
pTrcHis－C载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis C载体载体基本信息载体名称pTrcHis C载体抗性Ampicillin载体长度4412 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis C载体质粒图谱
pBC－SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBC SK(-)载体载体基本信息载体名称pBC SK(-)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pBluescript－SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript SK(-)载体载体基本信息载体名称pBluescript SK(-)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pBC－SK(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBC SK(+)载体载体基本信息载体名称pBC SK(+)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pEXA载体的基本信息和质粒图谱
pEX-A载体载体基本信息载体名称pEX-A载体抗性Ampicillin载体长度2450 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Eurofins Genomics拷贝数High copy numberpEX-A载体质粒图谱
pEZSeq™Kan载体的基本信息和质粒图谱
pEZSeq™-Kan载体载体基本信息载体名称pEZSeq™-Kan载体抗性Kanamycin载体长度2008 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpEZSeq™-Kan载体质粒图谱
pEZSeq™Amp载体的基本信息和质粒图谱
pEZSeq™-Amp载体载体基本信息载体名称pEZSeq™-Amp载体抗性Ampicillin载体长度2056 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpEZSeq™-Amp载体质粒图谱
pTrcHis－B载体的基本信息和质粒图谱
pTrcHis B载体载体基本信息载体名称pTrcHis B载体抗性Ampicillin载体长度4404 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpTrcHis B载体质粒图谱
pBS－KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBS KS(-)载体载体基本信息载体名称pBS KS(-)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS KS(-)载体质粒图谱
pOSIPTO载体的基本信息和质粒图谱
pOSIP-TO载体载体基本信息载体名称pOSIP-TO载体抗性Tetracycline载体长度6919 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源St-Pierre F, Cui L, Priest DG, Endy D, Dodd IB, Shearwin KE.拷贝数Hig
pBS－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS KS(+)载体载体基本信息载体名称pBS KS(+)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS KS(+)载体质粒图谱
pBluescript－SK(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript SK(+)载体载体基本信息载体名称pBluescript SK(+)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pGEM®T载体的基本信息和质粒图谱
pGEM®-T载体载体基本信息载体名称pGEM®-T载体抗性Ampicillin载体长度3000 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Promega拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpGEM®-T载体质粒图谱
pSMART®－HCAmp载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® HCAmp载体载体基本信息载体名称pSMART® HCAmp载体抗性Ampicillin载体长度1833 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® HCAmp载体质粒图谱
pBS－SK()载体的基本信息和质粒图谱
pBS SK(-)载体载体基本信息载体名称pBS SK(-)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS SK(-)载体质粒图谱
pEZ™－BAC载体的基本信息和质粒图谱
pEZ™ BAC载体载体基本信息载体名称pEZ™ BAC载体抗性Chloramphenicol载体长度7260 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数Low copy numberpEZ™ BAC载体质粒图谱
pBC－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBC KS(+)载体载体基本信息载体名称pBC KS(+)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pSMART®－LCAmp载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® LCAmp载体载体基本信息载体名称pSMART® LCAmp载体抗性Ampicillin载体长度2025 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® LCAmp载体质粒图谱
pBC－KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBC KS(-)载体载体基本信息载体名称pBC KS(-)载体抗性Chloramphenicol载体长度3400 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Agilent Technologies拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引
pRSET－B载体的基本信息和质粒图谱
pRSET B载体载体基本信息载体名称pRSET B载体抗性Ampicillin载体长度2887 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET B载体质粒图谱
pBluescript－KS()载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript KS(-)载体载体基本信息载体名称pBluescript KS(-)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
外源DNA和质粒载体的连接反应
外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导
pBluescript－KS(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBluescript KS(+)载体载体基本信息载体名称pBluescript KS(+)载体抗性Ampicillin载体长度2958 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Short JM, Fernandez JM, Sorge JA, Huse WD.拷贝数High
pBS－SK(+)载体的基本信息和质粒图谱
pBS SK(+)载体载体基本信息载体名称pBS SK(+)载体抗性Ampicillin载体长度2964 bp载体类型Basic Cloning Vectors拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpBS SK(+)载体质粒图谱
pRSET－C载体的基本信息和质粒图谱
pRSET C载体载体基本信息载体名称pRSET C载体抗性Ampicillin载体长度2895 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)拷贝数High copy numberpRSET C载体质粒图谱
pSMART®－LCKan载体的基本信息和质粒图谱
pSMART® LCKan载体载体基本信息载体名称pSMART® LCKan载体抗性Kanamycin载体长度1968 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Lucigen拷贝数High copy numberpSMART® LCKan载体质粒图谱
质粒载体对宿主生存并不是必需的
这点不同于线粒体，线粒体DNA也是环状双链分子，也有独立复制的调控，但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分，质粒也往往有其表型，其表现不是宿主生存所必需的，但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存，例如，细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因，如编码
pZErO®2载体的基本信息和质粒图谱
pZErO®-2载体载体基本信息载体名称pZErO®-2载体抗性Kanamycin载体长度3297 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Invitrogen (Life Technologies)筛选标记Neomycin/G418(Geneticin)拷贝数High cop
用低拷贝质粒作表达载体有什么好处
楼主的qq暂时加不上，我记下了，改天加。以下是个人意见。因为高拷贝质粒稳定性低，而且给宿主细胞的压力大。低拷贝数的质粒DNA在宿主细胞分裂前只能复制1～2次，而多拷贝数质粒可以在细胞分裂前复制成10～200拷贝。高拷贝数的质粒称为松弛型质粒(relaxed plasmid)，独立于细菌细胞而自主复制
质粒载体和外源DNA的连接反应
实验概要掌握DNA体外连接的基本技能，了解连接反应的注意事项。实验原理DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来，该反为需能反应，通常需要加入ATP或NADH，DNA连接酶对粘性末端的连接效率要远