以磁性顆粒为基础纯化PCR产物实验

试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品仪器、耗材 自动定位器吸头液体处理自动机械分离装置平板密封条PCR 纯化系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇,80%2. 核酸和寡核苷酸在 96 孔板中的 PCR 样品(不多于100ul/孔)3. 特殊设备3 台单位置的实验用自动定位器(BeckmanCoulter)4 套 P250 盒装吸头(BeckmanCoulter)4X4 位置实验用自动定位器(BeckmanCoulter)96 孔吸头洗涤自动实验用定位器(BeckmanCoulter)加热和冷却自动实验用定位器(BeckmanCoulter)液体处理自动机械,如 BiomekFx 或 Biomek2000 实验室自动工作平台(BeckmanCoulter)MagnaBot96 磁性分离装置(Promega)无浸透性的平板密封条回旋振荡式自动实验用定位器(BeckmanCoulter)吸头装卸自动实验用定位器(BeckmanC......阅读全文

以磁性顆粒为基础纯化-PCR-产物实验

            试剂、试剂盒 乙醇 PCR 样品 仪器、耗材 自动定位器 吸头

以磁性顆粒为基础纯化-PCR-产物实验

MagneSil 是一种顺磁性硅质顆粒,能够充当可移动的固相物质而用于捕获双链 DNA 片段。通过洗涤黏附于硅质顆粒上的靶复合物来去除残留污染,从而纯化的目的 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材

以磁性顆粒为基础纯化-PCR-产物实验

试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材 自动定位器吸头液体处理自动机械分离装置平板密封条PCR 纯化系统 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 乙醇,80% 2. 核酸和寡核苷酸 在 96 孔板中的 PCR 样品(不多于100ul/孔)

以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法

试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品仪器、耗材 真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂乙醇,80%(75 ml/板;使用前配制)2. 核酸和寡核苷酸在 96 孔板中的 PCR 样品(每样品 20?lOOul)3. 特殊设备Vac-man96 真空装置

以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法

Wizard SV96 PCR 纯化系统提供了一个以膜为基础,用于从 96 孔板中进行高产率 PCR纯化的方法。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇PCR 样品仪器、耗材真空装置真空泵真空废物收集装置真空管PCR 纯化系统实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和

以硅膜为基础纯化-PCR-产物实验方法

            试剂、试剂盒 乙醇 PCR 样品 仪器、耗材 真空装置 真空泵 真空废物收集装置

PCR-产物纯化实验

介绍一个采用 AmiconMicrocon-PCR 滤件(Millipore) 的方法,有效地去除冗余dNTP 和引物的方法纯化 PCR 产物。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒TE 或去离子水PCR 产物仪器、耗材离心机和转子PCR 滤 件微量离心管实验步骤

PCR-产物纯化实验

试剂、试剂盒 TE 或去离子水PCR 产物仪器、耗材 离心机和转子PCR 滤 件微量离心管实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液TE(lOmmol/L Tris-HCl,lmmol/L EDTA,pH7.5) 或去离子水2. 核酸和寡核苷酸待测序的 PCR 产物3. 离心机和转子带有固定倾角转子的小型

PCR-产物纯化实验

            试剂、试剂盒 TE 或去离子水 PCR 产物 仪器、耗材 离心机和转子 PCR 滤 件

以PCR为基础的相关技术

  (一)巢式PCR  定义:  是对靶基因进行二次扩增,第二次扩增用的模板就是第一次的扩增产物。  应用:  可以得到足够和特异性的扩增产物,在靶基因表达量比较低或者一些其他原因导致的,使用常规的PCR无法得到理想的产物得时候。  注意事项:  (1)第二次扩增的时候,必须至少有一条引物是另外设计

染色末端的清洁纯化实验

利用 ABIPRISMRigDye 末端化学法进行自动荧光测序是高效率 DN 八序列测定的方法之一。序列梯度是由标准的 Sanger 方法利用荧光标记链末端的核苷而产生的。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 试剂、试剂盒 乙醇洗脱上样液 仪器、耗

PCR产物纯化方法

Purification of PCR Products in Preparation for CloningJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid

简述PCR-产物纯化

PCR 反应完成目标 DNA 的扩增后,PCR 产物可以用于进一步的研究,例如用于 DNA 测序、克隆、分析基因的功能和表达等。然而,通过 PCR 反应后体系中仍然存在具有活性的 DNA 聚合酶,剩余的 dNTP、引物以及反应缓冲体系中的各种金属离子等。因此,我们必须通过一定的方法从反应体系中提纯

PCR产物常规纯化方法

大批量、廉价、用于测序的PCR产物纯化方法--PEG沉淀 最近,摸索了一下PEG沉淀PCR产物的方法,贴出来,与大家共享。 目的:探索一种方法,能将PCR产物大批量地、廉价地、纯度比较高地纯化出来,并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA,用于DNA测序。 有文献和方法说,不同浓度的PEG能沉淀不

PCR产物的直接纯化

实验概要本实验介绍了PCR产物直接纯化的原理及操作步骤。实验原理PCR产物一般都含有过量的引物、Taq   DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多,商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中

PCR产物的回收纯化

PCR产物的回收纯化的目的是:高质量DNA;除去蛋白(如酶等),RNA,无机盐(NaCl超过150 mM对T4连接酶有抑制作用),小于100 bp的短片段(如引物DNA),有机小分子(如dNTP、Agrose、EB、甘油、矿物油)。

染色末端的清洁纯化实验

            试剂、试剂盒 乙醇 洗脱上样液 仪器、耗材 磁性分离装置 平板夹

染色末端的清洁纯化实验

试剂、试剂盒 乙醇洗脱上样液 仪器、耗材 磁性分离装置平板夹平板架测序反应纯化系统 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 用于测序的胶洗脱/上样液 (见表 9-4) 90% 乙酵洗涤液 2. 特殊设备 MagnaBotⅡ磁性分离装

pcr产物的纯化与回收实验报告

  PCR产物的直接纯化:  一、原理  PCR产物一般都含有过量的引物、 Taq DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸纯化的方法有很多,商用化试剂盒的出现使得DNA的纯化过程变得更加简便快捷。本实验中, Buffer PCR

以PCR为基础的检测工具的优缺点

第一,PCR反应是快速的。整个DNA提取,扩增和检测的过程通常少于6小时,如果反应利用嵌套的引物,过程可能长些。对于一些样本来说,比如来自粪便和表皮,就需要在DNA提取中增加步骤,这样就延长了整个检测的时间到14小时。  用购买的核苷酸提取工具就能缩短检测时间,同时机械进行提取,使PCR方案最优化或

PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理及实验过程

 实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DNA制备膜技

PCR扩增产物鉴定与纯化实验原理及实验过程

实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DNA制

制备克隆用PCR产物的纯化

实验方法原理 PCR 产物经酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法纯化后,DNA 样品内还往往残留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶与另外一些热稳定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。这些残余的 DNA 聚合酶连同一些残余的 dNTP 的持续存

PCR扩增产物鉴定与纯化

实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DNA制

制备克隆用PCR产物的纯化

            实验方法原理 PCR 产物经酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法纯化后,DNA 样品内还往往残留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶与另外一些热稳定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。这些残余的

制备克隆用PCR产物的纯化

PCR 产物经酚:氯仿抽提、乙醇沉淀及其他一些常用方法纯化后,DNA 样品内还往往残留了一些具有酶活性的 Taq DNA 酶与另外一些热稳定 DNA 聚合酶(Cioweetal. 1991; Bamesl992)。这些残余的 DNA 聚合酶连同一些残余的 dNTP 的持续存在,常常妨碍有待进一步克隆

PCR扩增产物鉴定与纯化

  实验原理  琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)  本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DN

PCR扩增产物鉴定与纯化

  实验原理  琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验)  本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purification Kit),该试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收并纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了独特的凝胶融解系统,结合DN

直接从PCR产物回收纯化DNA

1)直接加90-100μl纯化缓冲液于1.5ml离心管,再加入30~300μl PCR反应物,Vortex混合;2)加入1ml树脂轻轻Vortex 3次,每次间隔1分钟;3)将取出拉杆的注射器筒(3ml)装在纯化柱上,加入上述DNA与树脂混合液,然后装上拉杆,慢慢将混合液推进纯化柱内;4)卸下注射器

PCR扩增产物鉴定与纯化

实验概要通过琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物,并对获得的产物进行割胶纯化回收,为接下来的DNA重组和转化实验提供外源DNA片段。实验原理琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR扩增产物。(原理参照琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验) 本实验使用了TaKaRa公司的胶纯化试剂盒(Agarose Gel DNA Purifi