高GC含量片段的PCR扩增实验

试剂、试剂盒 甜菜碱dNTP 溶液二甲基亚砜四甲基砜Taq 酶和酶缓冲引物仪器、耗材 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 试剂甜菜碱(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四种 dNTP, 每种 25 mmol/L)二甲基亚砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶缓冲液Taq 酶Taq 酶缓冲液(Taq 酶制造商提供)3. 核酸和寡核苷酸人类基因组 DNA,每个反应中 20ng,hRF3(hGSPTl) 引物:hRF3f CCGC/CTCT/GTCG/TCGT/CGC hRF3r CCGC/GCTG/AGGT/TCTC/CCKl......阅读全文

高-GC-含量片段的-PCR-扩增实验

            试剂、试剂盒 甜菜碱 dNTP 溶液 二甲基亚砜 四甲基砜 Taq 酶和酶缓冲引物 仪器、耗材

高-GC-含量片段的-PCR-扩增实验

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高-GC-含量片段的-PCR-扩增实验

试剂、试剂盒 甜菜碱dNTP 溶液二甲基亚砜四甲基砜Taq 酶和酶缓冲引物仪器、耗材 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 试剂甜菜碱(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四种 dNTP, 每种 25 mmol/L)二甲基亚砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶缓冲液

GC含量高的PCR小结

xjktony扩增模板的GC 含量为66%,也不算很高,我做过更高的GC 含量(80%)的PCR.对于 这种高GC含量的PCR,要加些DMSO等,以解除其二级结构的影响,当然现在也有专门这种PCR Buffer卖.vanny宝生物有这种做高GC含量的酶和buffer,称为LA TAKARA酶,里面有

PCR进阶——GCRich片段的扩增策略

  PCR早已是分子生物学实验的常规技术,但是GC-rich扩增始终是有难度的应用。  以人基因组为例,大约3%的序列可划为GC-rich序列,尤其是在启动子,增强子等控制元件,GC-rich序列更为常见。因此,GC-rich片段的PCR扩增困难,也就阻碍了有关这类序列的科研进展。  GC-Rich

高GC比模板的PCR扩增

PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程,涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动,比如Platinum Taq DNA聚合酶(Invitrogen)可以达到更高的特异性,降低对镁离子浓度的依赖,并且有利于提高“问题模板”的产量。然而,传统的PCR条件

高GC比模板的PCR扩增

PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程,涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动,比如Platinum Taq DNA聚合酶(Invitrogen)可以达到更高的特异性,降低对镁离子浓度的依赖,并且有利于提高“问题模板”的产量。然而,传统的PCR条件

高GC比模板的PCR扩增

PCR条件的优化是一个麻烦耗时的过程,涉及到温度、时间、镁离子、引物、dNTP、Taq酶、模板等多个因素的调整。一般来说利用热启动,比如Platinum Taq DNA聚合酶(Invitrogen)可以达到更高的特异性,降低对镁离子浓度的依赖,并且有利于提高“问题模板”的产量。然而,传统的PCR条件

高GC含量PCR样本的扩增困难与防止污染与降解的操作方法

       每天做实验小心翼翼,时时担心提取的DNA被污染、被降解。终于,废了九牛二虎之力,好不容易提取到高质量的DNA,然而PCR仍然P不出来条带。是试剂加漏了吗?是酶失活了吗?换上新试剂,冰上重来一次,然并卵,不仅P不出来,更重要的是也不知道为啥P不出来,贝多芬都弹不出我的悲伤!    

终点PCR中的顶配—热启动PCR聚合酶组合的使用方法(二)

       如果您需要热启动PCR预混液,这里有多功能热启动PCR预混液,因为篇幅有限,这里给大家列表展示:  基于热启动酶的PCR类型 英文名称 产品特色 MgCl2 浓度 *扩增片段范围 货号 高GC含量PC

SQ-7000-GCMS-系统高稳定性的设计

赛默飞ISQ 7000 GC-MS 气质联用系统专门设计用于更长时间地提供一致结果,并在几乎 不停机的情况下实现更高的样品通量。当您选择ExtractaBrite或配置AEI时, 您都将受益于其稳定性,以最大限度地提高日常维护周期之间的正 常运行时间,并确保您的系统在需要时随时随地运行。 无线式

维生素A高含量木薯问世

  根据世界卫生组织的统计,全球约有2.5亿儿童维生素A严重不足,导致每年50万名儿童失明。而严重缺乏维生素也会使发展中国家脆弱的儿童和孕妇存在疾病甚至死亡的风险。   特别是在非洲地区,数百万由于缺乏维生素A而营养不良以及许多孩子失明的悲剧,促使科研人员加快培育能够提供更多维生素A的农作物新品种

煤炭硫含量高的几点危害

   煤炭含硫量高的危害主要是两个方面,一是环保问题,煤炭在加工利用燃烧过程中产生二氧化硫.二是使用煤炭对煤炭指标的要求,因为硫分影响黑色冶金产品的质量.。实践表明,炼焦煤中的硫分约有80%~85%转入焦炭,而在高炉炉料中又有80%左右的硫分来自焦炭。当焦炭中的硫分增高时,由于它是酸性物质,就需要增

煤炭硫含量高的几点危害

  煤炭含硫量高的危害主要是两个方面,一是环保问题,煤炭在加工利用燃烧过程中产生二氧化硫.二是使用煤炭对煤炭指标的要求,因为硫分影响黑色冶金产品的质量.。实践表明,炼焦煤中的硫分约有80%~85%转入焦炭,而在高炉炉料中又有80%左右的硫分来自焦炭。当焦炭中的硫分增高时,由于它是酸性物质,就需要增大

水中COD含量高对人体的危害

COD是化学需氧量的代号,表示在强酸性条件下重铬酸钾氧化一升污水中有机物所需的氧量,可大致表示污水中的有机物量。它是表示水中还原性物质多少的一个指标。水中的还原性物质有各种有机物(为主)、亚硝酸盐、硫化物、亚铁盐等。因此,化学需氧量(COD)又往往作为衡量水中有机物质含量多少的指标。COD越高,说明

血中铁的含量高是为什么

美国《神经病学》杂志4月25日Davalos的研究报道:体内铁含量高的人中风后发生严重脑损伤的危险性较高。如果减少饮食中铁的含量,他们能从中受益。曾有研究将铁的含量与中风损伤的严重性联系起来,Davalos和同事于是测量了100名中风患者脑脊液和血液的铁蛋白水平。他们将患者分为两组——症状稳定或开始

GC2020气相色谱仪测定煤气中苯含量

 气相色谱是一种、快速、灵敏的分析装置,在焦化厂得到越来越广泛的应用。苯系物有毒,特别是其的低沸点物质,毒性更大。在焦化生产中,对苯系物的分析具有重要的意义。焦化行业苯系物的分析一直沿用活性炭吸附法:在煤气取样装置中,接人活性炭吸收管,将吸苯后的活性炭管与蒸馏装置连接,通人过热蒸汽进行蒸馏。全部蒸馏

为什么引物中GC含量越高,需要设定更高的退火温度?

GC碱基互补配对时形成三个氢键,非特异性配对后需要较高的温度才能打开氢键,从而促进特异性配对。

GC和GCMS的区别

GC与GC/MS有本质的区别。前者是指气相色谱仪,而后者是气相色谱与质谱连用,也称为气质联用仪。无论是在原理,还是在使用操作上完全是不同的,我不知道您具体问那个方面的内容,您可以补充。

GC和GCMS的区别

GC与GC/MS有本质的区别。前者是指气相色谱仪,而后者是气相色谱与质谱连用,也称为气质联用仪。无论是在原理,还是在使用操作上完全是不同的,我不知道您具体问那个方面的内容,您可以补充。

GC和GCMS的区别

如下:(1)GC-MS方法定性参数增加,定性可靠。GC-MS方法不仅与GC方法一样能提供保留时间,而且还能提供质谱图,由质谱图、分子离子峰的准确质量、碎片离子峰强比、同位素离子峰、选择离子的子离子质谱图等使GC-MS方法定性远比GC方法可靠。(2)GC-MS方法是一种通用的色谱检测方法,但灵敏度却远

玉米粗脂肪含量高光谱估算模型初探

玉米被用作饲料和加工业原料。粗脂肪的含量是判定饲料产品质量和等级的重要指标。目前, 饲料中的粗脂肪一般依据GBY643321986 测定,然而现行的化学分析手段已不能满足农业生产发展的要求,尤其是在精准农业领域,快速、适时、准确的植物营养诊断方法成了植物营养领域中研究的热点。高光谱遥感(hypers

水中COD含量高对人体有哪些危害

  HCA-200 COD在线监测仪将GB11914-89规定的重铬酸钾消解方法与先进的计算机技术结合起来,实现了测定过程的全自动化。 HCA-200在线监测仪主要技术路线:重铬酸钾消解-光度测定法。HCA-200在线监测仪对水中COD的检测很有必要,COD的含量的高低对人身体有一定的影响,具体有哪

JY6100高含量氧分析仪

  JY-6100高含量氧分析仪    高含量氧分析仪采用离子流(界限电流)测量原理,嵌入式安装,可应用于大型空气分离高纯氧、医用及工业制氧机、冶炼行业、医疗卫生、石油化工、环保、电子电力等行业中高浓度氧的实时检测分析。   仪器特点:   采用进口界限电流传感器,具有不通电不消耗、使用寿命长

制氢系统为何氧中氢含量高

氧中氢含量高,你说的应该是水电解制氢设备的氧气纯度,氧中氢分析仪也叫氢量分析仪,是检测氧气中氢气的含量,此分析仪一般属于二元气体分析仪,热导原理的较多,在水电解过程中,氢离子的分子量小,渗透能力强,在一定压力下,温度环境下很活跃,虽然氢氧小室是隔膜隔离的,但扔会有微量渗透。。。所以水电解制氢系统氧气

直链淀粉含量检测仪测定高钙米的直链淀粉含量

      高钙米是近年来比较热销的大米品质,它适合妇、儿童、中老年人等缺钙人群食用。高钙米的优势在于可以通过食用米饭的形式补充钙质,更利于吸收。而在口感方面,直链淀粉的含量则会对其有影响,因此在这里借助直链淀粉含量检测仪测定高钙米的直链淀粉含量,从而研究其口感变化。      通过直链淀粉含量检测

酵母菌的序列测定相关内容

  序列测定揭示了酵母基因组中大范围的碱基组成变化。多数酵母染色体由不同程度的、大范围的GC丰富DNA序列和GC缺乏DNA序列镶嵌组成。这种GC含量的变化与染色体的结构、基因的密度以及重组频率有关。GC含量高的区域一般位于染色体臂的中部,这些区域的基因密度较高;GC含量低的区域一般靠近端粒和着丝粒,

PCR扩增失败是引物的问题吗?

基本不是。当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出,扩增效率低的问题。如槽式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段。有些重复片段的扩增, GC含量高的片段,非要采用特殊扩增手段才能扩增出了。

限制性片段长度多态性的高变区DNA与DNA指纹

人的卫星DNA 或称随体DNA 是由一些短的DNA 片段(10bp 左右)多次重复所构成的。重复片段的组成和拷贝数在不同的个体及基因组的不同位置上不一样。提取不同个体的基因组DNA 后,用其切点能识别序列为4 个碱基而又不切割该重复片段的限制性内切酶在重复片段的两侧切割基因组DNA ,然后将样品进行

气相色谱仪GC测定工业冰乙酸中甲醇的含量

工业冰乙酸为无色澄清液体,有刺激性气味。相对密度1.049,熔点16.7℃,沸点118℃。溶于水、乙醇和乙  mi。无水乙酸在低温时凝固成冰状,俗称冰 乙酸。凝固时体积膨胀可能导致容器破裂。闪点39℃,爆炸极限4.0%~16.0%,空气中zui大允许浓度不超过25mg/m3。甲酸(化学式HCOOH,