高GC含量片段的PCR扩增实验

试剂、试剂盒 甜菜碱dNTP 溶液二甲基亚砜四甲基砜Taq 酶和酶缓冲引物仪器、耗材 PCR 仪实验步骤 一、材料1. 试剂甜菜碱(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四种 dNTP, 每种 25 mmol/L)二甲基亚砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶缓冲液Taq 酶Taq 酶缓冲液(Taq 酶制造商提供)3. 核酸和寡核苷酸人类基因组 DNA,每个反应中 20ng,hRF3(hGSPTl) 引物:hRF3f CCGC/CTCT/GTCG/TCGT/CGC hRF3r CCGC/GCTG/AGGT/TCTC/CCKl......阅读全文

Takara推出PCR领域的全能酶

  幸福的PCR都是相似的,不幸的PCR各有各的不幸。PCR虽说并不是个复杂的过程,但经常会遇到各种各样的问题,比如GC含量过高、片段太长、保真度不够等等。许多DNA聚合酶就是针对这些问题而设计的,以实现“更高更快更强”。然而,PCR扩增的模板千变万化,每次都要换,这确实麻烦。若有一种全能酶,能解决

准备插入片段实验

试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材 专用设备实验步骤 第 1 阶段:DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶(比如,T7、修饰过的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脱氧核苷酸末端转移酶(Tdt) 活性(Clark1988;H

准备插入片段实验

试剂、试剂盒缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸仪器、耗材专用设备实验步骤第 1 阶段:DNA 引物的激酶处理研究表明很多种 DNA 聚合酶(比如,T7、修饰过的 T7、Taq、Vent、Tth 和 Klenow)具有脱氧核苷酸末端转移酶(Tdt) 活性(Clark1988;Hu1993)。

准备插入片段实验

            试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸 仪器、耗材 专用设备

冈崎片段的概念

冈崎片段:相对比较短的DNA链(大约1000核苷酸残基),是在DNA的后随链的不连续合成期间生成的片段,这是ReijiOkazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。DNA复制过程中,2条新生链都只能从5'端向3'端延伸,前导链连续合成,后随链分段合成。这些分段合

PCR疑难解答终点PCR及相关PCR反应的分类

       1.PCR的概念        PCR,即聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即模板DNA先经高温变性为单链,在DNA聚合酶和适宜的温度下,两条引物分别与两条模板DNA链上的一段互

循环水氯离子含量高的危害是什么

氯离子有很高的极性,能促进腐蚀反应,又有很强的穿透性,容易穿透金属表面的保护膜,造成缝隙和空蚀等局部腐蚀。氯离子起着各种生理学作用。许多细胞中都有氯离子通道,它主要负责控制静止期细胞的膜电位以及细胞体积。在膜系统中,特殊神经元里的氯离子可以调控甘氨酸和伽马氨基丁酸的作用。氯离子还与维持血液中的酸碱平

龙高股份:公司高岭土矿中锂含量很低

有投资者在投资者互动平台提问:请问公司高岭土矿的黏土是否有尝试过黏土提锂?此黏土矿和能够黏土提锂的黏土一样吗?龙高股份(605086.SH)3月31日在投资者互动平台表示,公司高岭土矿中锂含量很低,达不到工业生产品位要求。

水分含量高对电池性能的影响有哪些?

电池中的水分含量高对电池性能的影响:高内阻、低容量、高自放电、循环性能差、电池漏液、内部压力大等。 电池水分检测方法:待测样品称重后放入样品瓶,样品瓶在卡式加热炉中均匀加热,蒸发后的水分在高纯惰性气体作为载气引导下,进到滴定池内进行水分含量分析。 常见样品检测:锂离子动力电池行业正负极材料及其原材料

我国出口海藻碘含量高-已销至欧盟多国

  据欧盟食品饲料类快速预警系统(RASFF)消息,2019年8月20日,奥地利通过RASFF通报我国出口海藻碘含量高。具体通报内容如下:通报时间通报国通报产品编号通报原因销售状态/采取措施通报类型2019-8-20奥地利海藻2019.2991碘含量高分销至其他成员国/退出市场预警通报  据通报,以

基因cloning经验指南

我们克隆基因的时候,往往可以通过一些途径(如pcr,EST库或者文库筛选)得到基因的部分片段。然后通过3'race 和 5'race 方法往两端延伸。有时会出现无法延伸的状况,如果你超作没有失误的话,这时候很有可能是你模板GC含量过高的缘故,普通pcr 是没有办法延伸的,可以用扩高g

GCMS中GC、MS的主要作用

GC是气相色谱法利用不同物质在固定相和流动相分配系数的差别,使不同化合物从色谱柱流出的时间不同,以达到分离的目的。质谱法是利用带电粒子在磁场或电场中的运动规律,按其质荷比实现分离分析,测定离子质量及其强度分布。GC是进样系统,MS是检测器,。联用的优势有1、可以有选择地只检测所需要的目标化合物的特征

GCMS中GC、MS的主要作用

GC是气相色谱法利用不同物质在固定相和流动相分配系数的差别,使不同化合物从色谱柱流出的时间不同,以达到分离的目的。质谱法是利用带电粒子在磁场或电场中的运动规律,按其质荷比实现分离分析,测定离子质量及其强度分布。 GC是进样系统,MS是检测器,。联用的优势有1、可以有选择地只检测所需要的目标化合物的特

GC2020毛细管气相色谱测定烟草中亚硝胺含量

  烟草特有的亚硝胺是zui引人注目的N-亚硝胺类化合物。虽然它们的种类不多,但却是致癌性极强的物质。烟草特有亚硝胺的前体化合物都是植物碱 。由于烟草中的亚硝胺含量极微,一般浓度均g/g×10-6或g/g×10-9级,因此给亚硝胺的定量分析带来了相当的难度。1975年,热能分析仪(ThermalEn

移动GC/MS

图1.  硝基苯标准溶液色谱图(1ppm)。 最近,由石油化工厂爆炸引起的紧急水污染案件有所增加,因此对移动式应急监测仪的需求也不断增长。此文介绍了如何使用车载式安捷伦5975T LTM GC / MSD 建立了简单、快速监测水中硝基苯的方法。使用这种方法,在不到5 min的时间

直链淀粉含量仪用于高直链淀粉玉米的选择

虽然说高直链淀粉的玉米在口感上与低直链淀粉的玉米有较大的差异,作为食品可能并不那么受欢迎,但是由于高直链淀粉相对于一般淀粉具有良好的成膜性和强度,因此具有独特的应用价值,很多企业也会专门生产这种高直链淀粉,而高直链淀粉玉米作为高直链淀粉的重要来源,在生产的过程中,企业会采用直链淀粉含量仪选择高直链淀

城市污水进水总氮含量高是什么原因

城市污水进水总氮含量高原因是生活污水多了。例如:洗菜污水,洗澡污水,洗衣服污水-洗衣粉/肥皂(含大量磷和氮)等等。总氮的定义是水中各种形态无机和有机氮的总量。包括NO3、NO2和NH4等无机氮和蛋白质、氨基酸和有机胺等有机氮,以每升水含氮毫克数计算。常被用来表示水体受营养物质污染的程度。水中的总氮含

γ亚麻酸和二高γ亚麻酸含量测定

摘要:建立了γ-亚麻酸和二高γ-亚麻酸含量测定的气相色谱面积归一化方法。γ-亚麻酸和二高γ-亚麻酸在样品处理和色谱条件上是完全一致的,仅是出峰时间上有差别,经精密度、重现性、回收率实验,γ-亚麻酸RSD分别为1.51 、1、89%和0.98%,二高γ-亚麻酸RSD分别为1.45 、1.15%和0

污水废水中COD含量高,都有哪些方法降解COD

污水、河流等水质COD含量降解方法主要有:吸附法(物理吸附、化学吸附和离子交换吸附)、水质混凝法分离法、电化学法(稳定性不好)、臭氧氧化法、生物法等。1.吸附法:吸附法是利用吸附剂表面积大的特点,将废水中的COD吸附去除的方法。吸附的结果就是使COD组分聚集在吸附剂表面,彻底脱离水体。根据吸附剂吸附

城市污水进水总氮含量高是什么原因

城市污水进水总氮含量高原因是生活污水多了。例如:洗菜污水,洗澡污水,洗衣服污水-洗衣粉/肥皂(含大量磷和氮)等等。总氮的定义是水中各种形态无机和有机氮的总量。包括NO3、NO2和NH4等无机氮和蛋白质、氨基酸和有机胺等有机氮,以每升水含氮毫克数计算。常被用来表示水体受营养物质污染的程度。水中的总氮含

研究发现雨后沿海水域诺如病毒含量高

  据外媒报道,研究发现雨后沿海水域诺如病毒、致病菌含量较高,人体受感染的风险加大。   这项研究分析了654名冲浪者的两年间健康数据。根据这项研究,加利福尼亚州的冲浪者受感染,主要是诺如病毒引起的腹泻呕吐。专家分析称,诺如病毒是典型的未经处理的污水污染造成的。   大雨经常导致污水处理厂超载,污水

日“海豚湾”居民体内汞含量高-与饮食有关

       日本和歌山县太地町官员9日说,检测结果显示,当地居民体内平均汞含量是日本其他地区4倍,但没有发现患病迹象。       负责检测的国内水俣病综合研究中心认为,这与居民食用海豚肉的饮食习惯存在关联。       4倍均值       太地町有渔猎、食用海豚的传统。以太地町渔民猎杀海豚为主

PCRDGGE实验原理和操作步骤

【实验目的】 1.了解PCR-DGGE技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-DGGE技术的步骤。 【实验原理】 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm

DNA片段的回收实验

实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法回收的片段可有效的用于重组载体构建。通过15分钟的纯化过程,PCR产物即能被有效地从含引物二聚体、非特异性扩增引物片断等混合物中分离出来,成为高度无盐的、不含其他大分子成分的纯化片断。在较宽的分子量范围内有较高的回收

细胞化学词汇插入片段

将一段DNA序列载入到细菌质粒中,这一段被整合的序列被称为插入片段。

DNA片段的连接技术

一、目的与原理DNA酶切片段的联接是两DNA片段相邻的5‘磷酸和3’羟基间可有连接酶催化形成磷酸二酯键,这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA连接酶和T4DNA连接酶催化,但是分子生物学试验中主要采用T4DNA连接酶,因该酶在正常条件下,即能完成连接反应。本实验拟通过T4DNA连接酶对酶切片断的连

细胞化学词汇冈崎片段

冈崎片段是相对较短的DNA核苷酸序列(真核生物中大约有150到200个碱基对长),它们的合成是不连续的,并随后通过DNA连接酶连接在一起,形成DNA复制过程中的滞后链。冈崎片段是20世纪60年代两位日本分子生物学家、名古屋大学的一对校友夫妇冈崎令治和冈崎恒子共同发现的。

DNA片段的回收实验

树脂回收法 微量柱法 液氮冻融法 常规方法             实验方法原理 本方法特别适合于PCR片段的回收,具有纯度高、操作简洁等特点,经此方法

DNA片段的制备方法

常用以下方法获得DNA片段:①用限制性核酸内切酶将高分子量DNA切成一定大小的DNA片段;②用物理方法(如超声波)取得DNA随机片段;③在已知蛋白质的氨基酸顺序情况下,用人工方法合成对应的基因片段;④从mRNA反转录产生cDNA。

抗体分子的水解片段

在一定条件下,Ig分子肽链的某些部分易被蛋白酶水解为不同片段。木瓜蛋白酶(papain)和胃蛋白酶(pepsin)是最常用的两种Ig蛋白水解酶,并可籍此研究Ig的结构和功能,分离和纯化特定的12多肽片段。(一) 木瓜蛋白酶水解片段木瓜蛋白酶水解Ig的部位是在铰链区二硫键连接的两条重链的近N端,可将I