乙型脑炎病毒RNA提取
试剂、试剂盒 酚氯仿 异戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 处理水 TBE 缓冲液 上样液 KCI。仪器、耗材 透析袋实验步骤 一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 处理水6)TBE 缓冲液7〕上样液:40% 甘油,0.4% 啡叮溴红的 TBE 溶液S) 透析袋9)KCI二 操作方法1. 酚:氯仿:异戊酵提取法1) 蔗糖密度梯度离心纯化的病毒与等体积饱和酚:氯仿:异戊醇(25:24:1) 混合,冰浴中振荡 3〜5 min。2) 在 4℃ 下,8000 g 离心 lOmin,吸出上层水相,再用同样方法处理第二次,获得的上层水相用乙醚洗涤;二次去酚,水相加 1/10◦体积的 2.5mol/LKAc 及 2 倍体积乙醇,在—20℃ 下保存2. 琼脂糖凝胶制备电泳纯化法1) 制备 1.2% 琼脂糖-TBE 凝胶。2) 在离心去乙醇的 RNA 小管中,加入 4......阅读全文
乙型脑炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 酚氯仿 异戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 处理水 TBE 缓冲液 上样液 KCI。仪器、耗材 透析袋实验步骤 一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 处理水6)TBE 缓冲液7〕上样液:40% 甘油,0.
乙型脑炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 酚 氯仿 异戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 处理水 TBE 缓冲
2.8.2-乙型脑炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇乙醚KAc乙醇DEPC 处理水TBE 缓冲液上样液KCI。仪器、耗材透析袋实验步骤一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 处理水6)TBE 缓冲液7〕上样液:40% 甘油,0.4% 啡叮溴红的 TB
乙型脑炎病毒抗体的概述
乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的急性中枢神经系统传染病。本病通过蚊子传播,带病毒的人和动物成为传染源,感染乙脑病毒后,机体最早出现IgM抗体,然后出现IgG抗体。血清中乙型脑炎病毒(EPBV)抗体测定,对早期诊断乙型脑炎有重要意义。
流行性乙型脑炎病毒
本病毒首先(1953年)在日本从患者脑组织中分离获得,因此称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus ,JEV),所致疾病在日本称日本乙型脑炎(JBE)。1950年以来,我国对该病进行了大量病原学和流行病学研究,为了与甲型脑炎相区别,定名为流行性乙型脑炎,简称乙脑
流行性乙型脑炎病毒免疫
7.免疫乙脑病毒产生坚强的持久免疫力,迄今没有见到临床病例在痊愈后第二 次感染发病 的报道。且如上述,乙脑病毒的抗原变异不显著,尚未发现在免疫保护力方面明显不同 的型或亚型,这就为流行性乙型脑炎的特异性预防提供了良好的基础。目前应用的乙脑 疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗两种。灭活疫苗的制造方
乙脑病毒,流行性乙型脑炎病毒介绍(二)
三、微生物学诊断 乙脑早期快速诊断通常采集性期患者血清或脑脊液特异性lgm ,也可做RT—PCR检测标本中的病毒核酸片段,一般6个小时内可初步报告结果。常规血清学试验,(H1、CF、NT)需取双份血清,同时做对比试验,当恢复期血清抗体滴度比急性期≥4倍时,有辅助诊断意义,可用于临床回顾性诊
乙脑病毒,流行性乙型脑炎病毒介绍(一)
流行性乙型脑炎病毒首先(1953年)在日本从患者脑组织中分离获得,因此称日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus ,JEV),所致疾病在日本称日本乙型脑炎(JBE)。1950年以来,我国对该病进行了大量病原学和流行病学研究,为了与甲型脑炎相区别,定名为流行性乙
流行性乙型脑炎病毒的简介
简称乙脑病毒,属于虫媒病毒黄病毒科黄病毒属。主要症状为高热、头痛、呕吐、昏睡、痉挛等。重症者可周身高烧、抽痉不止、脑水肿、呼吸或循环衰竭而死亡,部分患者留有后遗症。消灭蚊子孳生地,并扑灭越冬蚊和新生成蚊是预防乙脑的关键。猪是乙脑病毒的主要中间宿主和传染源,在乙脑流行季节前,应对猪进行预防注射,可
流行性乙型脑炎病毒病理(二)
流行性乙型脑炎病毒(二)4、抵抗力 乙脑病毒在外界环境中的抵抗力不大。56℃加热30分钟或100℃加热2分 钟,均可使 其灭活。但其存活时间又与稀释剂的种类和稀释程度有很大关系。例如在以脱脂乳为稀 释剂时,于30℃放置120小时后还有活存病毒,但如以生理盐水稀释,则迅速灭活。 10
乙型脑炎病毒抗体的注意事项
检测标本,采静脉血2ml,分离血清后进行测定。特异性乙型病毒IgM抗体,可在感染后第4天出现,2-3周内达高峰,阳性率可达70%-90%,可用于早期诊断。
提取病毒RNA方法
一、用异硫氰酸胍提取提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,
病毒RNA提取实验
TE-饱和酚/氯仿提取法 实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获
病毒RNA提取实验
实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料 TMV病毒液试剂、试剂盒 TE-饱和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE缓冲液双菌水仪器、耗材 冷冻台式离心机低温真空干燥仪电泳仪电泳槽实验步骤 一、实验
植物病毒RNA提取
大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液(10mg/ml)。 二、设备 冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。 三、试剂 TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿
病毒RNA提取实验
病毒RNA提取可以:(1)用于RNA病毒复制机制研究;(2)用于反向遗传学研究;(3)用于分子病毒学其他研究。实验方法原理大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料TMV病毒液试剂、试剂盒TE-饱和酚:氯
流行性乙型脑炎病毒的诊断介绍
乙脑早期快速诊断通常采集性期患者血清或脑脊液特异性lgM ,也可做RT—PCR检测标本中的病毒核酸片段,一般6个小时内可初步报告结果。常规血清学试验,(H1、CF、NT)需取双份血清,同时做对比试验,当恢复期血清抗体滴度比急性期≥ 4倍时,有辅助诊断意义,可用于临床回顾性诊断。由于乙脑患者病毒血
流行性乙型脑炎病毒的抗原特性
乙脑病毒抗原性稳定,在同一地区不同年代分离的毒株之间未发现明显的抗原变异。E糖蛋白上有中和抗原表位和血凝抗原表位,可诱发机体产生中和抗体和血凝抑制抗体,在感染与免疫中重要作用。用单克隆抗体做交叉血凝抑制试验证实E糖蛋白上有与黄病毒属成员广泛并叉的属特异性抗原,也有仅与圣路易、墨里谷、西尼罗脑炎病
关于流行性乙型脑炎病毒的简介
流行性乙型脑炎病毒简称乙脑病毒。流行性乙型脑炎的病原体。呈球状,核酸为单链RNA,外层具包膜,包膜表面有血凝素。低温条件下,能自下而上较长时间,在动物、鸡胚及组织培养细胞中均能增殖。幼猪是乙脑病毒的主要传染源和中间宿主,蚊子是乙脑病毒的传播媒介。当人受带病毒的蚊子叮咬后,乙脑病毒进入人体,在血管
流行性乙型脑炎病毒的防治原则
防蚊、灭蚊和易感人群的预防接种是预防本病的关键。尚无有效的药物可以治疗流行性乙型脑炎。 防蚊、灭蚊和动物接种 通过清除蚊虫孳生场所,开展宣传教育,改善环境卫生条件等方式控制蚊虫等传播媒介的数量。由于流行性乙型脑炎病毒的传播主要是在蚊—猪循环中进行,人是偶发感染宿主。所以在流行季节前,通过提前
甲型肝炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 TSES 缓冲液 TSES 缓冲液饱和酚 氯仿 辛醇 乙酸钾 乙醇 缓冲液 A lmol L
流感病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 饱和的酚 氯仿 异戊醇 2mol L 乙酸钠 无水乙醇 TSE 溶液 LiCl 缓冲液平衡酚 TSE 饱和酚 4mol LLiCL实验步骤 一 材料与设备1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LT
RNA病毒类型提取方法
试剂准备1、 TROzlo试剂、氯仿、75%乙醇(0.1% DEPC配制)。2、 塑料器皿需用0.1% DEPC水浸泡。3、 0.1%DEPC水:100ml dd水中加入DEPC0.1ml,充分振荡,37℃孵育12h以上,121℃高压灭菌20min,于4℃保存。操作步骤1、 样品处理(1) 组织:5
流感病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 10×RSB 溶液 10%SDS 蛋白酶 K lOXLiCI 溶液 RSB 饱和的酚 氯仿
甲型肝炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒 TSES 缓冲液TSES 缓冲液饱和酚氯仿辛醇乙酸钾乙醇缓冲液 Almol LNaH2P04 缓冲液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 缓冲液酵母 tRNA蔗糖纤维素柱平衡液三重蒸馏水0.1mol LNaOH5 mmol L
流行性乙型脑炎病毒的特异治疗介绍
乙脑治疗仍采用对症处理及支持疗法,有报道用病毒唑、干扰素、恢复期血清等治疗,可能减轻病势,但已出现脑炎症状者,则无治疗效果。中国采用淋巴细胞杂交瘤技术,制备出高中和活性乙脑单克隆抗体,经系统动物实验治疗证明安全有效,95年经卫生部批准进入 Ⅰ、Ⅱ 期临床试验,是一种特异免疫治疗制剂。
关于流行性乙型脑炎病毒的监测介绍
乙脑的流行规律尚不十分清楚,因此尚无理想的监测方法。下面介绍几种监测方法提供参考 (一)媒介蚊的强度和出现早晚:定期、定地点、定时间、定量捕捉蚊子,特别是定地点最好在牲畜棚(特别是猪圈)内,定时间最好是黄昏7-8点蚊子吸血高峰时,观察三带喙库蚊的出现时间及其在蚊中所占比例。 (二)猪抗体的监
临床化学检查方法介绍乙型脑炎病毒抗体介绍
乙型脑炎病毒抗体介绍: 乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的急性中枢神经系统传染病。本病通过蚊子传播,带病毒的人和动物成为传染源,感染乙脑病毒后,机体最早出现IgM抗体,然后出现IgG抗体。血清中乙型脑炎病毒(EPBV)抗体测定,对早期诊断乙型脑炎有重要意义。乙型脑炎病毒抗体正常值: 阴性。乙型脑炎病
乙型脑炎灭活病毒疫苗的基本信息
中文名称乙型脑炎灭活病毒疫苗英文名称Japanese encephalitis inactivated virus vaccine定 义一种用乙型脑炎病毒或乙型脑炎病毒减毒株病毒制成的预防乙型脑炎的灭活疫苗。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)
流行性乙型脑炎病毒的免疫性
人受乙脑病毒感染后,大多数为隐性感染及部分顿挫感染,仅少数发生脑炎(0.01%),这与病毒的毒力,侵入机体内数量及感染者的免疫力有关。流行区成人大多数都有一定免疫力,多为隐性感染,10岁以下儿童及非流行区成人缺乏免疫力,感染后容易发病。 本病病后4~5天可出现血凝抑制抗体,2~4周达高峰,可维