乙型脑炎病毒RNA提取
试剂、试剂盒 酚氯仿 异戊醇 乙醚 KAc 乙醇 DEPC 处理水 TBE 缓冲液 上样液 KCI。仪器、耗材 透析袋实验步骤 一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 处理水6)TBE 缓冲液7〕上样液:40% 甘油,0.4% 啡叮溴红的 TBE 溶液S) 透析袋9)KCI二 操作方法1. 酚:氯仿:异戊酵提取法1) 蔗糖密度梯度离心纯化的病毒与等体积饱和酚:氯仿:异戊醇(25:24:1) 混合,冰浴中振荡 3〜5 min。2) 在 4℃ 下,8000 g 离心 lOmin,吸出上层水相,再用同样方法处理第二次,获得的上层水相用乙醚洗涤;二次去酚,水相加 1/10◦体积的 2.5mol/LKAc 及 2 倍体积乙醇,在—20℃ 下保存2. 琼脂糖凝胶制备电泳纯化法1) 制备 1.2% 琼脂糖-TBE 凝胶。2) 在离心去乙醇的 RNA 小管中,加入 4......阅读全文
流行性乙型脑炎病毒的分离和鉴定
根据乙型脑炎明显的季节性和地区性及其临床特征,例如高热和狂暴或 沉郁等神 经症状,流行期中不难作出诊断。但是必须与其它的病毒性、细菌性和中毒性脑炎相鉴别。 由于母猪可能发生流产,公猪可能发生睾丸炎,还需注意与布氏杆菌病、细小病毒病以及生 殖和呼吸道综合症等鉴别。为了确诊,必须进行病毒分离
流行性乙型脑炎病毒的免疫性
人受乙脑病毒感染后,大多数为隐性感染及部分顿挫感染,仅少数发生脑炎(0.01%),这与病毒的毒力,侵入机体内数量及感染者的免疫力有关。流行区成人大多数都有一定免疫力,多为隐性感染,10岁以下儿童及非流行区成人缺乏免疫力,感染后容易发病。 本病病后4~5天可出现血凝抑制抗体,2~4周达高峰,可维
流行性乙型脑炎病毒的特异治疗介绍
乙脑治疗仍采用对症处理及支持疗法,有报道用病毒唑、干扰素、恢复期血清等治疗,可能减轻病势,但已出现脑炎症状者,则无治疗效果。中国采用淋巴细胞杂交瘤技术,制备出高中和活性乙脑单克隆抗体,经系统动物实验治疗证明安全有效,95年经卫生部批准进入 Ⅰ、Ⅱ 期临床试验,是一种特异免疫治疗制剂。
临床化学检查方法介绍乙型脑炎病毒抗体介绍
乙型脑炎病毒抗体介绍: 乙型脑炎是由乙型脑炎病毒引起的急性中枢神经系统传染病。本病通过蚊子传播,带病毒的人和动物成为传染源,感染乙脑病毒后,机体最早出现IgM抗体,然后出现IgG抗体。血清中乙型脑炎病毒(EPBV)抗体测定,对早期诊断乙型脑炎有重要意义。乙型脑炎病毒抗体正常值: 阴性。乙型脑炎病
2.8.3-甲型肝炎病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒TSES 缓冲液TSES 缓冲液饱和酚氯仿辛醇乙酸钾乙醇缓冲液 Almol LNaH2P04 缓冲液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 缓冲液酵母 tRNA蔗糖纤维素柱平衡液三重蒸馏水0.1mol LNaOH5 mmol LEDTA0.1
植物病毒(plant-viruses)RNA提取
大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液(10mg/ml)。 二、设备 冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。 三、试剂 TE
2.8.1-流感病毒-RNA-提取
试剂、试剂盒10×RSB 溶液10%SDS蛋白酶 KlOXLiCI 溶液RSB 饱和的酚氯仿异戊醇2mol L 乙酸钠 无水乙醇TSE 溶液LiCl 缓冲液平衡酚TSE 饱和酚4mol LLiCL实验步骤一 材料与设备1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/
病毒RNA提取实验方法
1,用异硫氰酸胍提取提病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取 200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,另取
病毒RNA提取实验方法
实验概要本实验旨在掌握病毒RNA提取的实验方法,包括用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA、TRIzol LS提取病毒RNA及Trizol法提禽流感病毒RNA。实验步骤1. 用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA1) 取200ul样品数 阴性对照 阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管; 2) 加600u
关于流行性乙型脑炎病毒的特异预防介绍
现用的乙脑灭活疫苗是用地鼠肾细胞培养增殖,甲醛灭活制成,初次免疫时,皮下注射2~3次,间隔7-10天,以后每年加强注射一次,免疫力维持半年左右,保护率达66-90%。中国已筛选出乙脑病毒减毒株,用地鼠肾细胞培养制成减毒活疫苗,只需皮下注射一次,安全有效,正作现场观察。疫苗接种对象是10岁以下儿童
流行性乙型脑炎病毒的生物学性状
形态与结构 乙脑病毒为球形,直径50nm[2],内有衣壳蛋白(C)与核酸构成的核心,外披以含脂质的囊膜,表面有囊膜糖蛋白(E)刺突,即病毒血凝素,囊膜内尚有内膜蛋白(M),参与病毒的装配。病毒基因组为单股正链RNA,全长11kb,自5′至3′端依次编码结构蛋白C、M、E以及非结构蛋白NS1—N
概述流行性乙型脑炎病毒的致病性
中国乙脑病毒的传播媒介主要为三带喙库蚊。蚊感染病毒后,中肠细胞为最初复制部位,经病毒血症侵犯唾液腺和神经组织,并再次复制,终身带毒并可经卵传代,成为传播媒介和贮存宿主。在热带和亚热带,蚊终年存在,蚊和动物宿主之间构成病毒持久循环。在温带,鸟类是自然界中的重要贮存宿主。病毒每年或通过候鸟的迁栖而传
关于流行性乙型脑炎病毒的防治原则介绍
防蚊、灭蚊和易感人群的预防接种是预防本病的关键。尚无有效的药物可以治疗流行性乙型脑炎。 防蚊、灭蚊和动物接种 通过清除蚊虫孳生场所,开展宣传教育,改善环境卫生条件等方式控制蚊虫等传播媒介的数量。由于流行性乙型脑炎病毒的传播主要是在蚊—猪循环中进行,人是偶发感染宿主。所以在流行季节前,通过提前
关于流行性乙型脑炎病毒的免疫性
人受乙脑病毒感染后,大多数为隐性感染及部分顿挫感染,仅少数发生脑炎(0.01%),这与病毒的毒力,侵入机体内数量及感染者的免疫力有关。流行区成人大多数都有一定免疫力,多为隐性感染,10岁以下儿童及非流行区成人缺乏免疫力,感染后容易发病。 本病病后4~5天可出现血凝抑制抗体,2~4周达高峰,可维
关于流行性乙型脑炎病毒的形态结构介绍
乙脑病毒为球形,直径50nm,内有衣壳蛋白(C)与核酸构成的核心,外披以含脂质的囊膜,表面有囊膜糖蛋白(E)刺突,即病毒血凝素,囊膜内尚有内膜蛋白(M),参与病毒的装配。病毒基因组为单股正链RNA,全长11kb,自5′至3′端依次编码结构蛋白C、M、E以及非结构蛋白NS1—NS5,病毒RNA在细
流行性乙型脑炎病毒的血清学诊断
(2) 血清学诊断:包括补体结合试验、血凝抑制试验以及中和试验。血凝抑制抗体和 中和抗体存在于IgM和IgG两种免疫球蛋白中,而补体结合抗体只存在于IgG部分内。 ① 补体结合试验:特异性较高,是流行病学上确认乙脑的一种常用方法。 但因补体 结合抗体的出现较晚,动物大多于发病后2周左右才呈阳性反应
乙型脑炎疫苗的简介
流行性乙型脑炎(乙脑)是由乙脑病毒经蚊子传播的急性传染病,在人畜间流行。常累及患者的中枢神经系统,症状轻重不一,重型患者病死率很高,幸存者常残留有明显的后遗症。 乙脑疫苗预防乙脑可收到明显的效果,1960年我国开始使用地鼠肾细胞组织培养灭活疫苗,一直沿用至今。80年代后期,我国又研制成功并使用
病毒RNA提取实验方法(protocol)
1,用异硫氰酸胍提取提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,
禽流感病毒RNA提取protocol
1,用异硫氰酸胍提取1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,另取同样多eppendorf管,加入400ul -20度预冷的异丙
乙型脑炎病毒抗体的正常值及临床意义
正常值 阴性。 临床意义 EPBV-IgM阳性:见于乙型脑炎。
乙型脑炎灭活病毒疫苗的适应症及功能
中文名称乙型脑炎灭活病毒疫苗英文名称Japanese encephalitis inactivated virus vaccine定 义一种用乙型脑炎病毒或乙型脑炎病毒减毒株病毒制成的预防乙型脑炎的灭活疫苗。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)
乙型脑炎病毒抗体的临床意义及注意事项
临床意义 EPBV-IgM阳性:见于乙型脑炎。 注意事项 检测标本,采静脉血2ml,分离血清后进行测定。特异性乙型病毒IgM抗体,可在感染后第4天出现,2-3周内达高峰,阳性率可达70%-90%,可用于早期诊断。
流行性乙型脑炎病毒的敏感动物与细胞
乳鼠是常用的敏感动物,脑内接种乙脑病毒后3~4天发病,一周左右死亡,脑组织内含大量感染性病毒,是分离病毒、大量制备抗原的可靠方法。 BHK细胞系、C6/36细胞系及鸡胚成纤维细胞是常用的敏感细胞,病毒在细胞内增殖引起细胞圆缩、颗粒增多、细胞脱落等CPE。在培养上清中含有传染性病毒,胞浆内胞膜上
流行性乙型脑炎病毒的特异性lgM检测
乙脑病毒感染发病早期即产生特异性lgM ,病后2~3周达到高峰,故单份血清可做出早期诊断。可使用: ① lgM 捕捉ELISA法(见23章); ②2ME—NI法,血凝抑制抗体存在于lgM及lgG中,将早期单份血清分成二份,一份用2巯基乙醇(2ME)处理,以破坏lgM ,另一份不处理,然后同时
流行性乙型脑炎病毒的常规血清学试验
1.血凝抑制试验 对乙脑诊断而言,本法特异性较低,但敏感性高,简便易行。常用于病毒的初步鉴定,确定有无乙脑病毒存在。检测血清标本中的HI抗体,多采用2ME—HI法。 2.补体结合试验 补体结合抗体仅存在于lgG 中,病后出现迟,消失快,适用于诊断感染。 3.中和试验 抗体存在于lgG、 lg
乙型脑炎病毒抗体的临床意义及注意事项
临床意义 EPBV-IgM阳性:见于乙型脑炎。 注意事项 检测标本,采静脉血2ml,分离血清后进行测定。特异性乙型病毒IgM抗体,可在感染后第4天出现,2-3周内达高峰,阳性率可达70%-90%,可用于早期诊断。
关于流行性乙型脑炎病毒的基本信息介绍
简称乙脑病毒,属于虫媒病毒黄病毒科黄病毒属。主要症状为高热、头痛、呕吐、昏睡、痉挛等。重症者可周身高烧、抽痉不止、脑水肿、呼吸或循环衰竭而死亡,部分患者留有后遗症。消灭蚊子孳生地,并扑灭越冬蚊和新生成蚊是预防乙脑的关键。猪是乙脑病毒的主要中间宿主和传染源,在乙脑流行季节前,应对猪进行预防注射,可
乙型脑炎灭活病毒疫苗的适应症和功能
中文名称乙型脑炎灭活病毒疫苗英文名称Japanese encephalitis inactivated virus vaccine定 义一种用乙型脑炎病毒或乙型脑炎病毒减毒株病毒制成的预防乙型脑炎的灭活疫苗。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫预防(三级学科)
流行性乙型脑炎病毒对理化因素的抵抗力
乙脑病毒对热抵抗力弱,56℃30分钟灭活,故应在-70℃条件下保存毒株。若将感染病毒的脑组织加入50%甘油缓冲盐水中贮存在4℃,其病毒活力可维持数月。乙醚、1:1000去氧胆酸钠以及常用消毒剂均可灭活病毒。在酸性条件下不稳定,适宜pH8.5~9.0。
猪乙型脑炎病毒抗体(JEVAb)酶联免疫分析(ELISA
猪乙型脑炎病毒抗体(JEV-Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中乙型脑炎病毒抗体(JEV-Ab)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪乙型脑炎病毒抗体(JEV-Ab)水平。用纯化的猪乙型