从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料 10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 裂解缓冲液 酚氯仿异戊醇 5mol LNaCl 冰冷的无水乙醇 70% 乙醇 DNA 酶消化缓冲液 TE 缓冲液仪器、耗材 离心机 带微探头的超声仪实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解缓冲液:30 mmol/LTris-Cl(PH7.4),100 mmol/LNaCl,5 mmol/LEDTA,1%(M/V)SDS, 使用前加蛋白酶 K 至 100ug/ml4) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1), 酚用 Tris-Cl(pH8.0) 平衡5)24:1 氯仿:异戊醇6)5mol/LNaCl。7) 冰冷的无水乙醇和 70% 乙醇。8)DNA 酶消化缓冲液:20 mmol/LTris-Cl(pH8.0),10 mmol/LMgCI2,2.5 mg/ml无 RNA 酶的 DNA 酶9)TE 缓冲液 (PH8.0)。10......阅读全文

从革兰氏阳性菌中分离RNA

            实验材料 10 ml 细菌培养物 试剂、试剂盒 DEPC 处理的水  裂解缓冲液  酚

从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料 10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 裂解缓冲液 酚氯仿异戊醇 5mol LNaCl 冰冷的无水乙醇 70% 乙醇 DNA 酶消化缓冲液 TE 缓冲液仪器、耗材 离心机 带微探头的超声仪实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解

2.7.2-从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒DEPC 处理的水裂解缓冲液酚氯仿异戊醇5mol LNaCl冰冷的无水乙醇70% 乙醇DNA 酶消化缓冲液TE 缓冲液仪器、耗材离心机带微探头的超声仪实验步骤一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解缓冲液:30 mmol/

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液 原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶 革兰氏阴性菌裂解缓冲液 饱和 NaCl 溶液 DEPC 处理水 乙醇实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

            试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液  原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶  革兰氏阴性菌裂解缓冲液   饱和 NaCl 溶液

2.7.3-从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒10 ml 革兰氏阴性菌培养液原生质体缓冲液50 mg ml 溶菌酶革兰氏阴性菌裂解缓冲液饱和 NaCl 溶液DEPC 处理水 乙醇实验步骤一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol/L 蔗糖,8

从革兰氏阴性菌中分离高质量RNA

            实验材料 大肠杆菌培养物或 蓝细菌培养物 试剂、试剂盒 DEPC 处理的水  终止缓冲液 ST

从革兰氏阴性菌中分离高质量RNA

实验材料 大肠杆菌培养物或 蓝细菌培养物试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 终止缓冲液 STET 裂解液 酚 氯仿 3mol L 乙酸钠缓冲液 0.2mol L 和 l0 mmol L 氧钒核苷复合物 氯化铯 CsCl 塾层 冰冷的无水乙醇 乙醇仪器、耗材 离心机超速离心机实验步骤 一 材料与设备1)

2.7.1-从革兰氏阴性菌中分离高质量RNA

从大胗杆菌或蓝细菌屮制备的高质量RNA适 于 Northern印迹法、S1 核酸酶作图和引物延伸试验。 实验材料 大肠杆菌培养物或 蓝细菌培养物 试剂、试剂盒 DEPC 处理的水终止缓冲液STET 裂解液酚氯仿3mol L 乙酸钠缓冲液0.2mol L 和 l0 mmo

常见的革兰氏阳性菌介绍

  常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等;常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、及霍乱弧菌等。  在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感);而革兰氏阴

常见的革兰氏阳性菌介绍

常见的革兰氏阳性菌有葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。

革兰氏阳性菌的结构特点

  革兰氏阳性菌细胞壁较厚,约20~80nm。肽聚糖含量丰富,有15~50层,每层厚度1nm,约占细胞干重的50~80%。此外,尚有大量特殊组份磷壁酸(teichoic acid)。磷壁酸是由核糖醇(ribitol)或甘油(glycerol)残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸(w

新型革兰氏阳性菌抗药机制揭示

  记者1月17日从中国科学技术大学获悉,该校合肥微尺度物质科学国家研究中心和生命科学学院周丛照教授、陈宇星教授课题组,解析了肺炎链球菌中一种新型ABC转运蛋白(Spr0693和Spr0694-0695)的原子分辨率结构,揭示了革兰氏阳性菌抗药的一种新机制。研究成果日前发表在著名学术刊物《自然·通讯

革兰氏阳性菌的原理学说

  革兰氏染色原理目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。  等电点学说  革兰氏阳性菌的等电点在pH2-3,比阴性菌(pH4-5)低,加之碘为弱氧化剂,可降低革兰氏阳性菌的等电点,致使两类菌的等电点差异扩大,因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌更强。  化学学说  碘液在菌体内与结晶紫结合

革兰氏阳性菌的电转化方案(英文)

Transformation of Gram-Positive Bacteriaan adaptation from Chang, D., Chassy, B., Saunders, J., Sowers, A. 1992.Guide to Electroporation and Electrofu

革兰氏阳性菌的细胞形态和结构

  细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。原生质体位于细胞壁内,包括细胞膜(细胞质膜)、细胞质、核质和内含物。另外细胞还含有有些特殊结构,主要有荚膜、芽孢、鞭毛和菌毛等4种。  1.细胞壁  革兰氏染色的机理主要是抓住了革兰氏阳性细菌与阴性细菌在细胞壁的结构与组成上的不同,具体比较见下表:  进

革兰氏阳性菌的相关内容介绍

  革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌是利用革兰氏染色法来鉴别的两大类细菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。  自然界存在多种多样病菌,如何将这些病菌加以鉴别、分类,并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。  

革兰氏阳性菌和阴性菌是什么?

自然界存在多种多样病菌,如何将这些病菌加以鉴别、分类,并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用龙胆紫(亦称结晶紫)来染细菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的结合,再用95%的酒精来脱色20~30秒钟,有些细菌不

纯化RNA实验——从组织中纯化总RNA

实验材料组织试剂、试剂盒RNA 抽提缓冲液氯仿实验步骤1. 从动物取下组织,直接进行第 2 步或在液氮中快速冷冻新鲜解剖的组织。冷冻后的组织可以贮存在 -70℃。2. 组织(0.05~0.3 g)在 2.0 ml RNA 抽提缓冲液中匀浆。3. 每管加 200 μl 氯仿,混合均匀,冰浴 15 分钟

从外周血淋巴细胞(PBls)中分离RNA

[器材和试剂]● 30m1Corex管,酸洗并硅化● 预冷离心机和吊桶式转头● Ficoll(Amersham Biosciences)● 冰冷磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.4● 裂解缓冲液:5mol/L单巯基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl,

荧光探针BacGo,可精确并及时地检测革兰氏阳性菌

  Gram染色最初是由丹麦科学家Christian Gram于1884年开发的,迄今为止它一直被用作细菌分类的黄金标准。但是,它有几个障碍。例如,使用一组染料如结晶紫和番红,该方法只能应用于固定样品(杀死细菌的化学过程),而不是活细菌。它还涉及通过顺序使用结晶紫和番红染料进行的多个步骤。为了克服这

纯化RNA实验——从培养的细胞中纯化总RNA

实验材料细胞试剂、试剂盒RNA 提取缓冲液变性液水饱和酚仪器、耗材培养皿Falcon 2063 管实验步骤1. 取 1 个细胞已长满的 100 ml 培养皿,吸出培养液,加 2 ml RNA 提取缓冲液,用橡胶刮棒刮下细胞。RNA 提取缓冲液:变性液,20 mlβ-巯基乙醇,0.144 ml2 mo

怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化

真核生物的mRNA分子是单顺反子,是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物,因此,高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA,理论上认为每克细胞可分离出5~10mg RNA。其中

怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化

真核生物的mRNA分子是单顺反子,是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物,因此,高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA,理论上认为每克细胞可分离出5~10mg RNA。其中

怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化

真核生物的mRNA分子是单顺反子,是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物,因此,高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA,理论上认为每克细胞可分离出5~10mg RNA。其中

怎样从总rna中进行mrna的分离和纯化

真核生物的mRNA分子是单顺反子,是编码蛋白质的基因转录产物。真核生物的所有蛋白质归根到底都是mRNA的翻译产物,因此,高质量mRNA的分离纯化是克隆基因、提高cDNA文库构建效率的决定性因素。哺乳动物平均每个细胞含有约1x10-5?g RNA,理论上认为每克细胞可分离出5~10mg RNA。其中

中国科大发现新型革兰氏阳性菌药物外排泵

  中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心和生命科学学院教授周丛照、陈宇星课题组,解析了肺炎链球菌中一种新型ABC转运蛋白(Spr0693和Spr0694-0695)的原子分辨率结构,揭示了革兰氏阳性菌抗药的一种新机制。相关研究成果以Structure of a MacAB-like eff

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

利用-ConcertPlant-试剂从植物组织中纯化-RNA

            实验材料 植物组织 试剂、试剂盒 Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿

利用-Trizol-从植物组织中制备-RNA-实验

实验材料 植物组织试剂、试剂盒 Trizol氯仿异丙醇乙醇DEPC处理过的水液态N2NaCl柠檬酸钠仪器、耗材 转子-定子均化器研钵和杵圆锥形管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂Trizol(Invitrogen)氯仿异丙醇乙醇,70%,用焦碳酸二乙酯(DEPC) 处理过的水配制DEPC 处