革兰氏阳性菌的电转化方案(英文)

Transformation of Gram-Positive Bacteriaan adaptation from Chang, D., Chassy, B., Saunders, J., Sowers, A. 1992.Guide to Electroporation and Electrofusion, Academic Press, Inc., San Diego, CA.Guiding principles: keep the cells as cold as possible at all times; manipulate the cells as gently as possible at all times.1、Making electrocompetent gram positive bacteriaStart a fresh overnight culture with the bacteria of in......阅读全文

革兰氏阳性菌的电转化方案(英文)

Transformation of Gram-Positive Bacteriaan adaptation from Chang, D., Chassy, B., Saunders, J., Sowers, A. 1992.Guide to Electroporation and Electrofu

什么是革兰氏阳性菌?

  革兰氏阳性菌是一类细菌,其细胞壁结构特殊,能够抵抗革兰氏染色剂的脱色作用,因此在显微镜下呈现出紫色或蓝色。革兰氏阳性菌的细胞壁主要由多层的肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,这些结构使得革兰氏阳性菌的细胞壁比革兰氏阴性菌更加厚实和坚硬。  革兰氏阳性菌包括许多重要的致病菌,如葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌等

常见的革兰氏阳性菌介绍

常见的革兰氏阳性菌有葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等。

常见的革兰氏阳性菌介绍

  常见的革兰氏阳性菌有:葡萄球菌(Staphylococcus)、链球菌(Streptococcus)、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等;常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、及霍乱弧菌等。  在治疗上,大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感(结核杆菌对青霉素不敏感);而革兰氏阴

革兰氏阳性菌的结构特点

  革兰氏阳性菌细胞壁较厚,约20~80nm。肽聚糖含量丰富,有15~50层,每层厚度1nm,约占细胞干重的50~80%。此外,尚有大量特殊组份磷壁酸(teichoic acid)。磷壁酸是由核糖醇(ribitol)或甘油(glycerol)残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸(w

如何区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌?

  染色反应:革兰氏阳性菌在染色过程中会保留紫色的晶紫染料,而革兰氏阴性菌则会失去紫色染料,被染成红色或粉红色。  细胞壁结构:革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,主要由多层肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,由一层薄的肽聚糖和外膜组成。  细胞壁通透性:革兰氏阳性菌的细胞壁通透性较低,不

革兰氏阳性菌的原理学说

  革兰氏染色原理目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。  等电点学说  革兰氏阳性菌的等电点在pH2-3,比阴性菌(pH4-5)低,加之碘为弱氧化剂,可降低革兰氏阳性菌的等电点,致使两类菌的等电点差异扩大,因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌更强。  化学学说  碘液在菌体内与结晶紫结合

从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料 10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 裂解缓冲液 酚氯仿异戊醇 5mol LNaCl 冰冷的无水乙醇 70% 乙醇 DNA 酶消化缓冲液 TE 缓冲液仪器、耗材 离心机 带微探头的超声仪实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解

新型革兰氏阳性菌抗药机制揭示

  记者1月17日从中国科学技术大学获悉,该校合肥微尺度物质科学国家研究中心和生命科学学院周丛照教授、陈宇星教授课题组,解析了肺炎链球菌中一种新型ABC转运蛋白(Spr0693和Spr0694-0695)的原子分辨率结构,揭示了革兰氏阳性菌抗药的一种新机制。研究成果日前发表在著名学术刊物《自然·通讯

从革兰氏阳性菌中分离RNA

            实验材料 10 ml 细菌培养物 试剂、试剂盒 DEPC 处理的水  裂解缓冲液  酚

革兰氏阳性菌的细胞形态和结构

  细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。原生质体位于细胞壁内,包括细胞膜(细胞质膜)、细胞质、核质和内含物。另外细胞还含有有些特殊结构,主要有荚膜、芽孢、鞭毛和菌毛等4种。  1.细胞壁  革兰氏染色的机理主要是抓住了革兰氏阳性细菌与阴性细菌在细胞壁的结构与组成上的不同,具体比较见下表:  进

革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌的区别是什么?

  革兰氏染色是一种常用的细菌分类方法,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。  革兰氏阳性菌的细胞壁较厚,主要由多层肽聚糖和肽聚糖间的肽链组成,且细胞壁中含有较多的酸性物质,使得染色时能够保留紫色晶紫染料,呈现出紫色。  而革兰氏阴性菌的细胞壁较薄,主要由单层肽聚糖和脂多糖组成,且细胞壁中含有

2.7.2-从革兰氏阳性菌中分离RNA

实验材料10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒DEPC 处理的水裂解缓冲液酚氯仿异戊醇5mol LNaCl冰冷的无水乙醇70% 乙醇DNA 酶消化缓冲液TE 缓冲液仪器、耗材离心机带微探头的超声仪实验步骤一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物,2)DEPC 处理的水。3) 裂解缓冲液:30 mmol/

革兰氏阳性菌的相关内容介绍

  革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌是利用革兰氏染色法来鉴别的两大类细菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌,它们能产生外毒素使人致病,而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌,它们产生内毒素,靠内毒素使人致病。  自然界存在多种多样病菌,如何将这些病菌加以鉴别、分类,并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。  

革兰氏阳性菌和阴性菌是什么?

自然界存在多种多样病菌,如何将这些病菌加以鉴别、分类,并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。革兰氏染色法,能够把细菌分为两大类:采用这种染色方法,是先用龙胆紫(亦称结晶紫)来染细菌,所有细菌都染成了紫色,然后再涂以革兰氏碘液,来加强染料与菌体的结合,再用95%的酒精来脱色20~30秒钟,有些细菌不

如何根据细胞壁结构区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌?

  革兰氏染色法是一种常用的细菌分类方法,根据细菌细胞壁的结构和组成不同,可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。  革兰氏阳性菌的细胞壁主要由多层厚的肽聚糖和少量的肽聚糖组成,没有外膜。而革兰氏阴性菌的细胞壁则由一层薄的肽聚糖和一层较厚的外膜组成。  在革兰氏染色过程中,革兰氏阳性菌会被染成紫色

荧光探针BacGo,可精确并及时地检测革兰氏阳性菌

  Gram染色最初是由丹麦科学家Christian Gram于1884年开发的,迄今为止它一直被用作细菌分类的黄金标准。但是,它有几个障碍。例如,使用一组染料如结晶紫和番红,该方法只能应用于固定样品(杀死细菌的化学过程),而不是活细菌。它还涉及通过顺序使用结晶紫和番红染料进行的多个步骤。为了克服这

中国科大发现新型革兰氏阳性菌药物外排泵

  中国科学技术大学合肥微尺度物质科学国家研究中心和生命科学学院教授周丛照、陈宇星课题组,解析了肺炎链球菌中一种新型ABC转运蛋白(Spr0693和Spr0694-0695)的原子分辨率结构,揭示了革兰氏阳性菌抗药的一种新机制。相关研究成果以Structure of a MacAB-like eff

电转化流程

一、电转化感受态细胞的制备1.用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照)2.37℃,220rpm,培养14-16个小时。3.第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm,振摇2-3小

电转化流程

一、电转化感受态细胞的制备1.用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照)2.37℃,220rpm,培养14-16个小时。3.第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm,振摇2-3小

电转化流程

            实验方法原理 胞电转染(电转),也叫细胞电穿孔 (electroporation),是把外源大分子物质DNA、RNA、siRNA、蛋白质等以及一些小分子导入细胞膜内部的重要方法。 在瞬间强大电场的作用下,溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性,

电转化流程

一、电转化感受态细胞的制备1.用枪头挑取单克隆菌落,投入盛有10ml LB液体培养基的50ml离心管中。(同时做培养基和枪头的空白对照)2.37℃,220rpm,培养14-16个小时。3.第二天,以1:100的比例将这10ml菌液倒入1000ml LB液体培养基中,37度,220rpm,振摇2-3小

电转化流程

电转化流程适用于(1)转基因(2)基因介导(3)基因修复。实验方法原理胞电转染(电转),也叫细胞电穿孔 (electroporation),是把外源大分子物质DNA、RNA、siRNA、蛋白质等以及一些小分子导入细胞膜内部的重要方法。 在瞬间强大电场的作用下,溶液中细胞的细胞膜具有了一定的通透性,带

重组质粒的电转化法

首先,将0.1cm的电击杯放在冰上进行预冷,冻存的感受态细胞取出冰上溶解。2然后,用100微升的感受态细胞加入1微升纯化的连接液,或者加入0.5微升未纯化的连接液,小心混匀,在冰上放置二十分钟。3然后,将混合液加入预冷的电击杯中,注意擦干杯外的水,防止电火花,放入电转化仪的反应槽内,接上电源。4然后

毕赤酵母电转化

实验概要本实验介绍了毕赤酵母电转化方法。该方法无需产生去壁细胞,是产生毕赤酵母重组子的简便方法。与去壁细胞效率相似。实验步骤1. 细胞准备:   1) 在含5mlYPD 的50ml 离心管中,培养毕赤酵母,30 度过夜。   2) 取0.1-0.5ml 过夜培养物,接种含500ml 新鲜培养基的2L

阳性菌实验室的探讨

一、阳性菌室的功能阳性菌室是与活菌操作有关的实验区域。实现的主要功能包括:(1) 菌株的分离、纯化、接种和传代;(2) 工作菌液的制备;(3) 增菌培养物或阳性污染物中致病微生物的分离和提纯;(4) 阳性对照实验操作及阳性培养;(5) 已知、未知或疑似微生物的鉴定和确认。为防止可能的微生物交叉污染,

革兰氏染色技巧

   何为革兰氏染色:  革兰氏染色是细菌鉴别染色方法中最常使用的,染色结果可区分革兰氏阳性菌及阴性菌,是鉴定细菌最重要的分类依据之一。  染色有4种试剂:  初染剂:结晶紫,步骤中最先使用的试剂,把细菌染成蓝紫色。  媒染剂:革兰氏碘液,可与初染剂结合,形成结晶紫及碘复合物(CV-I),加强染料颜

细菌革兰氏染色

一、目的 了解细菌革兰氏染色原理,并掌握其方法。二、原理革兰氏染色法是一种重要的鉴别细菌的方法,根据各种细菌对这种染色法的反应不同,可把细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。因此,该方法对于细菌的分类,鉴定及生产应用都有重要意义。其染色原理是利用细菌的细胞壁组成成分和结构的不同,革兰氏阳性菌的细胞壁

基因电转化技术的创新介绍

常规的转染包括脂质体,电转化和病毒法。普通的293、Hela等细胞系,脂质体转染也能达到70-80%。而对于其他一些极难转染的细胞,如原代神经元,原代神经干细胞,免疫细胞等来说,脂质体转染不仅转化效率很低(约10%),而且细胞死亡率极高。因此有些研究人员不得不转用更加昂贵而且毒性更大的病毒包被法。病

电转化法的概念和应用

中文名称电转化法英文名称electrotransformation定  义用电脉冲短暂作用于接触外源大分子(如DNA)的细胞,使外源大分子进入细胞,从而使细胞遗传性改变的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)