从新鲜和冰冻血液中提取RNA

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 淋巴细胞分离液 RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿异丙醇乙醇 氯化钠 DFPC 处理的水 离心管1.5X 溶 液 D: 6 mol L 硫氰酸胍柠檬酸钠十二烷基肌氨酸钠 2-巯基乙醇 酚 乙酸钠仪器、耗材 离心管实验步骤 一 材料与设备1. 鲜血中 RNA 提取1)磷酸盐缓冲液 (PBS)2)淋巴细胞分离液3)RNAzolB (Biogencsis,UK)4)氯仿5)异丙醇7)乙醇8)5mol/L 氯化钠9)DFPC 处理的水10)10 ml 离心管2. 冰冻血液中 RNA 提取1)1.5X 溶液 D:6mol/L 硫氰酸胍,37.5 mmol/L 柠檬酸钠 pH7.0,0.75% 十二烷基肌氨酸钠 H0.15mol/L2-巯基乙醇2) 酚:氯仿(5:I,pH 约 4.0)3)4,2mol/L 乙酸钠 pH4-0.4) 异丙醇。5) 乙醇。6)30 ml 离心管二 操作方法1. 鲜......阅读全文

从新鲜和冰冻血液中提取RNA

            试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 淋巴细胞分离液  RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿 异丙醇 乙

从新鲜和冰冻血液中提取RNA

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液 淋巴细胞分离液 RNAzol B( Biogencsis UK) 氯仿异丙醇乙醇 氯化钠 DFPC 处理的水 离心管1.5X 溶 液 D: 6 mol L 硫氰酸胍柠檬酸钠十二烷基肌氨酸钠 2-巯基乙醇 酚 乙酸钠仪器、耗材 离心管实验步骤 一 材料与设备1. 鲜血中 R

2.1.7-从新鲜和冰冻血液中提取RNA

全血中含有有核白细胞,因此从血液中抽提 RNA 比较方便,但是红细胞富含核糖核酸酶,所以从血液中分离 RNA 奋其持殊的难度。因此若能先将有核白细胞与红细胞分离开来,从血液中抽提 RNA 更易成功。下述方法是酸-酚. 胍法•硫氰酸胍吋裂解细胞,并有效地灭活核糖核酸酶。试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液淋巴细胞

冰冻血浆和新鲜冰冻血浆区别

新鲜冷冻血液与一般冷冻血液的差别取决于规定的标准不一样。新鲜冷冻血液在有限的时间与温度下产生,而一般冷冻血液在保存期内当然沉定而成。抗凝全血于6-8钟头以内在4℃标准下抽滤将血液分离出来,并快速在-30℃下列冷冻成块,即是新鲜冷冻血液,冷冻情况一直持续到应用以前,有效期限为1年,产品内带有所有的凝血

用于提取RNA新鲜组织如何保存

市场上有一种非冰型RNA样品保存液.有些公司叫RNAwait,或者还有别的名称,你可以了解一下.很多公司都有的.非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液,它能迅速渗入细胞内,通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。产品特点1

新鲜冰冻血浆中凝血因子检测结果与分析

【关键词】  新鲜冰冻血浆; 凝血因子; 活性 根据卫生部临床输血技术规范要求,新鲜冰冻血浆(fresh frozen plasma,FFP)自血液采集后6~8 h之内经分离放入-50℃速冻成块,在-30℃保存1年内几乎含有全部凝血因子,包括不稳定因子Ⅴ和Ⅷ[12]。而血液凝血因子易受血浆制备、储

RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)

一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

CsCl法从组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液   乙酸钠 酚 氯仿

怎样从总RNA中提取mRNA

大多数真核细胞mRNA的3’端通常具有由20-30个腺苷酸组成的polyA尾巴,寡聚胸腺嘧啶脱氧核糖核苷(OligoT)可以与之配对结合,这就是提取mRNA最基本的原理。具体到实验手段上,现在磁珠法、纤维素柱层析法都有在用。磁珠法一般是用生物素标记OligoT,亲和素标记磁珠(生物素和亲和素间具有高

CsCl法从组织中提取RNA

试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠酚 氯仿 异戊醇 异戊醇 无水乙醇仪器、耗材 组织捣碎机 离心机实验步骤 一 材料与设备1)液氮2)组织胍溶液:590.8 g 异硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 处理的水中,加入 25 mmol/LTris-Cl(p

从富含多糖的植物组织中提取和纯化-RNA

            实验方法原理 硫氰酸胍能溶解细胞并使蛋白变性. 当用于抽提缓冲液时,可产生无 RNase 的环境□组织抽提后,以中等转速离心匀浆液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿将上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白质位于苯酚相和两相交界面

从富含多糖的植物组织中提取和纯化-RNA

实验方法原理 硫氰酸胍能溶解细胞并使蛋白变性. 当用于抽提缓冲液时,可产生无 RNase 的环境□组织抽提后,以中等转速离心匀浆液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿将上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白质位于苯酚相和两相交界面。用乙酸钾将位于水相的多糖选择件的沉淀出来,然后用氯化锂选

从果蝇胚胎中提取总-RNA-或-poIy(A)-+RNA

            试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH  乙醇  3mol L 乙酸钠   苯酚  无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲

从果蝇胚胎中提取总-RNA-或-poIy(A)-+RNA

试剂、试剂盒 0.lmol LNaOH 乙醇 3mol L 乙酸钠 苯酚 无 SDS 的结合缓冲液 含 SDS 的结合缓冲液 TE 缓冲液 SEVAG 漂白剂(Bleach) 含 MgCl2 的 PBS(pH7.2) 果蝇勻浆缓冲液实验步骤 一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/

多位专家指导:如何提取和研究血液DNA,RNA与蛋白

  血液是唯一与所有器官都有接触的组织,携带着有关机体的大量宝贵信息。在理论上,检测血液携带的 DNA、RNA、囊泡和细胞残骸可以帮助人们诊断和监控各种疾病。  产前基因筛查是血液检测的一个重要应用,通过分析孕妇血液中的胎儿DNA来鉴定染色体异常(比如唐氏综合症)。此外,越来越多的研究者开始关注血液

2.2.2-从富含多糖的植物组织中提取和纯化-RNA

实验方法原理硫氰酸胍能溶解细胞并使蛋白变性. 当用于抽提缓冲液时,可产生无 RNase 的环境□组织抽提后,以中等转速离心匀浆液,以除去小溶性多搪。用苯酚:氯仿将上清液抽提出,RNA 位于水相,DNA 和蛋白质位于苯酚相和两相交界面。用乙酸钾将位于水相的多糖选择件的沉淀出来,然后用氯化锂选择性地将

2.3.1-从果蝇胚胎中提取总-RNA-或-poIy(A)-+RNA

试剂、试剂盒0.lmol LNaOH乙醇3mol L 乙酸钠苯酚无 SDS 的结合缓冲液含 SDS 的结合缓冲液TE 缓冲液SEVAG漂白剂(Bleach)含 MgCl2 的 PBS(pH7.2)果蝇勻浆缓冲液实验步骤一 材料与设备1)0.lmol/LNaOH2)70%(V/V) 乙醇3)3mol/

CsCl法从培养细胞中提取RNA

            试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲溶液 硫氰酸胍溶液 CsCl TES 缓冲液 乙酸钠缓冲液 无水乙醇 经 DEFC 处理的水

CsCl法从培养细胞中提取RNA

试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲溶液 硫氰酸胍溶液CsClTES 缓冲液 乙酸钠缓冲液无水乙醇 经 DEFC 处理的水。仪器、耗材 离心机 注射器及20W针头实验步骤 一 材料与设备1) 磷酸盐缓冲溶液 (PBS)2) 硫氰酸胍溶液:4mol/L 硫氰酸胍,0.lmmol/LTris-HClpH7.5,1%

从有限的细胞中提取-RNA-实验

实验材料 LCM 帽子试剂、试剂盒 乙醇 糖原RNA 提取试剂盒 超纯水仪器、耗材 移液器实验步骤 一、材料1. 缓冲液、试剂和溶液75% 乙醇 (超纯水配制)糖原,5 mg/ml(Ambion,Austin,TX)StratageneRNA 提取试剂盒(200345,StratageneCloni

2.1.6-CsCl法从组织中提取RNA

由于一些组织(如胰脏和睥脏)含有高浓度的内源性 RNA 酶,因此纯化源于组织的 RNA 须更加小心。试剂、试剂盒液氮组织胍溶液十二烷基肌氨酸钠CsCl组织重悬液乙酸钠酚氯仿异戊醇异戊醇无水乙醇仪器、耗材组织捣碎机离心机实验步骤一 材料与设备1)液氮2)组织胍溶液:590.8 g 异硫氰酸胍溶于 40

从有限的细胞中提取-RNA-实验

RNA 样品可以在-80°C 中保存 6 个月。总细胞 RNA 采用 StratageneRNA 提取试剂盒,按照说明书进行。另外,也可选用 PicoPureRNA 提取试剂盒,尤其是细胞较少时。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料LCM 帽子试剂、试剂盒乙醇糖原R

从有限的细胞中提取-RNA-实验

            实验材料 LCM 帽子 试剂、试剂盒 乙醇 糖原 RNA 提取试剂盒  超纯

从外周血淋巴细胞中提取RNA

实验概要本实验从外周血淋巴细胞(PBls)中分离得到RNA样品。主要试剂1. Ficoll(Amersham Biosciences)2. 冰冷磷酸盐缓冲液(PBS),pH 7.43. 裂解缓冲液:5mol/L单巯基氰酸胍,10mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA),50mmol/L Tris—HCl

如何从冻存的细胞提取RNA

1). 将冻存管从液氮或冰箱中取出;2). 不待细胞溶解,将Trizol500ul-1ml直接放入冻存管中,此时Trizol会冻成冰状;3). 将冻存管缓慢融化,并用加样器吹打混匀;4). 将细胞裂解液移至Eppendorf管中,16000′g离心1min,吸出管底絮状沉淀;注释:该步骤并非必要,多

从RNA中提取mRNA的方法步骤

从总RNA中分离mRNA采用Promega公司的PolyATract® mRNA Isolation System III。 使用该试剂盒,mRNA产量极低,因此下述方法是以Promega公司试剂盒操作手册为基础,并采用储昭晖硕士(作物遗传改良国家重点实验室植物分子生物学水稻分室)所建议的改进方

2.1.5-CsCl法从培养细胞中提取RNA

通过硫氰酸胍提取和氯化铯离心法制备 RNA,适于分离细胞质和细胞核难分开的细胞以及富含 RNase 的细胞中的 RNA。试剂、试剂盒磷酸盐缓冲溶液硫氰酸胍溶液CsClTES 缓冲液乙酸钠缓冲液无水乙醇经 DEFC 处理的水。仪器、耗材离心机注射器及20W针头实验步骤一 材料与设备1) 磷酸盐缓冲溶液

如何从脂肪组织中高效提取RNA?

前言RNA 的提取是肿瘤研究的重要内容。在乳腺癌的研究中,乳腺癌样品通常含有较高含量的脂肪组织和结缔组织,而脂肪组织由于密度小,通常漂浮于液面,使样品难以被充分研磨。若研磨不充分,会导致样品离心后不能得到明确清晰的分层,多数老师都会选择牺牲提取量以保证提取效果。深圳大学医学院的老师们正是遇到了上述的

从微量样本中同时提取mRNA和天然蛋白

  有时,细胞就是那么少,但又要开展多项分析,着实让人为难。丹麦哥本哈根大学的研究人员开发出一种新方法,能从微量的样本中同时提取mRNA和天然蛋白。这项成果发表在《BioTechniques》5月刊上。  在生物学研究的许多领域,样本量往往很有限,特别是人体细胞和组织,如卵泡和胚胎干细胞。但是,研究