细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期，加入1/20体积终止缓冲液，置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3. 用2 ml STET裂解液重悬细胞，加入100 μl 0.2 mol/l 的VRC，移入15 ml 聚丙烯管子。4. 加入1 ml 缓冲液平衡酚，振荡1 min 再加1 ml 氯仿，振荡1 min，于4℃用JA-17转子10 000 g 离心10 min，收集水相。5. 加入1/10体积3 mol/l 乙酸钠和2倍体积冰冷无水乙醇，于4℃ 10 000 g 离心10 min。6. 用2 ml 0.2 mol/l VRC溶液重溶沉淀。7. 用1：1酚/氯仿抽......阅读全文
RNA干扰制备方法
化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高，定制周期长，特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高，为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了，比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于：已经找到最有效的siRNA的情况
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品 试剂、试剂盒 甲酰胺 消化缓冲液 乙醇 肝糖
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
实验材料 石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒 甲酰胺消化缓冲液乙醇肝糖异丙醇苯酚 氯仿蛋白酶 KTrizol二甲苯仪器、耗材 微量离心管恒温箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂去离子化的甲酰胺焦碳酸二乙酯（DEPC) 处理过的水消化缓冲液（lmol/L 异硫氰酸胍,25 mmol/Lβ-巯基乙醇
从石蜡包埋固定的组织中制备－RNA－实验
该方案是由 Godfrey 等改进 Fisher 的方案发表的。此前已有从固定组织中纯化 RNA 的方案发表。Ambion 和 Roche 发明了从石蜡包埋的组织中纯化 RNA 的商品化试剂盒。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。实验材料石蜡包埋的组织样品试剂、试剂盒甲酰胺
RNAi实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程
RNAi 实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程，本实验方法来自于加州大学Jim教授实验，很权威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
酵母菌RNA制备实验—玻璃珠法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。 3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒储
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。 实验材料 N-表达质粒 E.coi
抑制细菌转录终止检测技术筛选RNA结合蛋白实验
实验方法原理 一种通过筛选重组 cDNA 文库研究多肽与 RNA 相互作用的细菌抗转录终止检测系统。实验材料 N-表达质粒E.coil N567 感受态细菌试剂、试剂盒 储存液缓冲液仪器、耗材 蛋白胨培养基蛋白胨平板N-表达质粒组合文库培养板实验步骤 ―、材料与设备1. 通过比较 β-半乳糖苷酶表达
酵母菌RNA制备实验—热酸性酚抽提法
实验材料酵母菌试剂、试剂盒TES酸性酚氯仿乙酸钠乙醇仪器、耗材离心管离心机摇床实验步骤1. 酵母细胞在10 ml 培养基中生长至指数中期（OD600=1.0）。 2. 将培养液转移到50 ml，离心管，于4℃，1 500 g 离心3 min。 3. 弃上清，菌体沉淀用1 ml 冰冷的水重悬，转
真菌总－RNA－的制备
试剂、试剂盒 酚氯仿异戊醇 12mol L 氯化锂 3mol L 乙酸钠 乙醇 DEPC 处理的水仪器、耗材 水浴 低温高速离心机实验步骤 一 材料与设备1) 酚：氯仿：异戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：异戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化锂。4)3mol/L 乙酸钠。5)70% 乙醇。
酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase
真菌总－RNA－的制备
真菌总 RNA 的制备 试剂、试剂盒 酚 氯仿 异戊醇 12mol L 氯化锂
酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒 AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase 的水仪器、耗材 髙速离心机实验步骤 一 材料与设备1)AE 缓冲液：50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡）。3)
细菌细胞的制备实验实验——多核糖体的纯化
实验材料真细菌多核糖体植物多核糖体试剂、试剂盒多核糖体蔗糖梯度缓冲液蔗糖梯度缓冲液实验步骤一、真细菌多核糖体1. 含有多核糖体（每管 0.6 ml ) 的上清铺到 15%~30% 蔗糖梯度的上面，在该蔗糖梯度的下面为 0.5 ml 的 60% 蔗糖铺垫液，内含如下缓冲液：多核糖体蔗糖梯度缓冲液：20
质粒DNA导入细菌细胞实验——一步法制备感受态细菌实验
试剂、试剂盒TSS仪器、耗材培养基平板实验步骤1. 准备新鲜的过夜菌。按1:100的比例将过夜培养的菌液加入到新鲜的LB培养液中，于37 °C培养至OD600为0.3~0.4。2. 加人等体积冰冷的2 X TSS于菌液中，在冰上温和地混匀。3. 可以将菌液分成小份用干冰/乙醇浴冻存，于-70
兔肝RNA的制备及测定实验原理和操作步骤
实验原理细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起，并且多以核蛋白的形式存在。因此，分离制备RNA 时，首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离，并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同，所用的制备方法各异，一般常用的方法有，盐酸胍法，去污剂法和苯酚法。其中，以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高，适合
细菌细胞的制备实验实验——70S核糖体的纯化
实验材料核糖体试剂、试剂盒致密偶联缓冲液仪器、耗材Beckman Vti50 转头实验步骤1. 采用 Beckman Vti50 转头和 7% 至 30% (w/v) 的线性蔗糖梯度沉降来纯化 70S 真细菌的核糖体。这一步可以确保大的蛋白质聚集物不会与 70S 核糖体一起沉淀下来。并可以产生致密偶
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）1
从细胞中分离RNA的纯度于完整性对于许多分子生物学实验至关重要。如Northern印迹与杂交分析、寡聚（dT）纤维素选择分离 mRNA，cDNA合成及体外翻译等实验的成败，在很大程度上决定于RNA的质量。RNA分离的最关键因素是尽量减少RNA酶的污染。快速一步法提取总RNA组织及有核细胞在匀浆过程中
真核细胞总RNA的制备（Total－RNA－Isolation）2
Total RNA Isolation Guanidine-based isolation Objective: To obtain total RNA from zebrafish embryos. Required Materials Denaturing Solution
小规模快速制备果蝇RNA
小规模快速制备果蝇RNA 试剂、试剂盒 Northern 样品缓冲液 lmol L 乙酸
2.5.1－酵母总RNA的制备
试剂、试剂盒AE 缓冲液。 苯酚10%SDS酚氯仿 无水乙醇乙醇. 3mol L 乙酸钠无 RNase 的水仪器、耗材髙速离心机实验步骤一 材料与设备1)AE 缓冲液：50 mmol/L 乙酸钠 (PH5.3)，lOmmol/LEDTA。2) 苯酚 (用 AE 缓冲液预先平衡）。3)10%SDS4)
酚/SDS法制备植物RNA
试剂、试剂盒 液氮 研磨缓冲液 TLE 缓冲液平衡酚) 氯仿 IiCl 溶液 (DEPC 处理） 乙酸钠 (DEPC 处理）
小规模快速制备果蝇RNA
试剂、试剂盒 Northern 样品缓冲液 lmol L 乙酸 酚氯仿 DEPC 处理的水 GHCL 溶液 无水乙醇实验步骤 一 材料与设备1)Northern 样品缓冲液：2.2mol/L 甲醛，1mol/LMOPS，50% 甲酰胺2)lmol/L 乙酸3) 酚：氯仿（1:1)4)DEPC 处理的
组织和细胞RNA的制备
一、 组织和细胞总RNA提取：异硫氰酸胍法（一）试剂准备1．CSB缓冲液：42mM柠檬酸钠；0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基，N甲基甘氨酸钠)；0.2 mM β-巯基乙醇。2．变性液：异硫氰酸胍（终浓度 4 M）25g、CSB缓冲液 33ml，混合直至完全溶解，可在65℃助
2.6－真菌总－RNA－的制备
试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇 12mol L 氯化锂3mol L 乙酸钠乙醇DEPC 处理的水仪器、耗材水浴低温高速离心机实验步骤一 材料与设备1) 酚：氯仿：异戊醇 (25：24:1)。2) 氯仿：异戊醇 (2：1)3)12mol/L 氯化锂。4)3mol/L 乙酸钠。5)70% 乙醇。6)DEPC
RNA的制备方法步骤1
来源于任何细胞的RNA都可以通过反转录酶的作用拷贝成双链DNA并克隆化，获得相应的于特定细胞来源的cDNA文库。因此，RNA制备的意义有两个方面* 获得特定细胞来源的cDNA文库，克隆目的基因* 分析基因的表达，阐明基因调控的特性，了解从基因转录产生RNA的结构，数量，水平及合成的速率抑制RNA酶活
酚/SDS法制备植物RNA
试剂、试剂盒 液氮 研磨缓冲液TLE 缓冲液平衡酚)氯仿IiCl 溶液 (DEPC 处理）乙酸钠 (DEPC 处理） 无水乙醇DEPC 处理水仪器、耗材 Folytron 匀浆器（BrinkmarmPT10 35)实验步骤 一 材料与设备1) 液氮2) 研磨缓冲液 18mol/LTris，0.09m
RNA制备的问题与解答
1、塑料制品、玻璃和金属物品的处理(a)塑料制品：尽可能使用无菌，一次性塑料制品。已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过，通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理方法如下：(1)在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEPC的终浓度为0.1%。注意：
FFPE样本核酸（DNA/RNA）制备
福尔马林固定、石蜡包埋（FFPE）组织切片的存档代表了珍贵且来源广泛的生物医学研究材料。随着越来越多的研究人员转向 FFPE 样品的分子分析，开发特定的操作步骤，考虑这些样品的独特性质就变得越来越重要。QIAGEN 在 FFPE 样本纯化及下游检测整个流程中都提供完善的解决方案。QIAamp