绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心,线粒体 RNA 沉淀下来。最后用 LiCl 沉淀法,将 CsCl 梯度离心中共沉淀下来的单链 DNA 是从线粒体 RNA 中除去。试剂、试剂盒 5.7moI LCsCl 溶液 10 mmol LEDTApH7.5 DEPC 水 变性缓冲液 EB 抽提缓冲液 4mol L 硫氰酸胍 7.5mol L 盐酸胍 2mol L 和 4mcL LLiCl 上样缓冲液 10XMOPS 缓冲液 2mol L 乙酸钾 2mol L 乙酸钠 5% 十二烷基肌氨酸钠 TE 缓冲液 洗脱缓冲液仪器、耗材 匀浆器实验步骤 一 材料与设备溶液均用 DEPC 水配......阅读全文
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心,线粒体 RNA 沉
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核
2.2.3-绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理利用差速离心,将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来,再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA,然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A,硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心,线粒体 RNA 沉淀下来。最
植物RNA的分离(总RNA的分离和mRNA的分离)
1. 总RNA的分离总RNA分离的方法很多,常采用的是异硫氰酸胍和b-巯基乙醇这两种RNase 抑制剂来抑制RNase的活性,同时,异硫氰酸胍与十二烷基肌氨酸钠(sarcosyl)共同作用可以破坏核蛋白复合体,使RNA顺利地解脱出来溶进缓冲液。由于RNA在碱性条件下不稳定,因而在整个提取过程中体
分离植物总RNA
实验概要认识真核生物RNA的组成及分离的原理;学习RNA提取过程中抑制RNA酶活性的方法。实验原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一个典型的真核细胞约含有10-5~10-6mg的RNA,其中80-85%为rRNA,其余15-20%主要由各种低分子量RNA组成(如tRNA、核内小分子
植物总RNA的分离
实验概要认识真核生物RNA的组成及分离的原理;学习RNA提取过程中抑制RNA酶活性的方法。实验原理真核生物的RNA包括rRNA、tRNA和mRNA。一个典型的真核细胞约含有10-5~10-6mg的RNA,其中80-85%为rRNA,其余15-20%主要由各种低分子量RNA组成(如tRNA、核内小分子
植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)
实验试剂三氯乙酸、石蜡。实验设备剪刀,分析天平,称量皿(或铝盒),烘箱,刀片,金属(有机玻璃也可)模板(或打孔器),纱布,夹子,有盖搪瓷盘,锡纸等。实验材料生长于田间的植株。实验步骤1.选择测定样品:实验可在晴天上午8~9点钟开始,预先在田间选定有代表性的叶片(如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等
植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)
光合速率测定是植物生理学的基本研究方法之一,在作物丰产生理、作物生态、新品种选育、以及光合作用基本理论研究方面都有着广泛的用途。根据光合作用的总反应式:C022H2O→ (CH2O)O2H2O光合强度原则上可以用任何一反应物消耗速度或生成物的产生速度来表示。由于植物体内水分含量很高,而且植物随时都在
植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)
实验概要光合速率测定是植物生理学的基本研究方法之一,在作物丰产生理、作物生态、新品种选育、以及光合作用基本理论研究等方面都有着广泛的用途。 根据光合作用的总反应式 CO2 2H2O→ (CH2O) O2 H2O 光合强度原则上可以用任何一反应物消耗速度或生成物的产生速度来表示。由于植物体内水
植物叶片光合速率的测定(改良半叶法)
实验试剂三氯、石蜡。实验设备剪刀,分析天平,称量皿(或铝盒),烘箱,刀片,金属(有机玻璃也可)模板(或打孔器),纱布,夹子,有盖搪瓷盘,锡纸等。实验材料生长于田间的植株。实验步骤1.选择测定样品:实验可在晴天上午8~9点钟开始,预先在田间选定有代表性的叶片(如叶片在植株上的部位、年龄、受光条件等)1
线粒体分离实验—从组织中分离线粒体
实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的
线粒体分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210
线粒体分离实验
从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体 实验材料 细胞
植物叶片水势范围
叶片水势(一般以晴天上午7~9时所测结果较为准确)在供水不足时变小,干旱越重,叶片水势越小。玉米在需水临界期前后,若叶片水势降至-0.7~-0.8MPa时,应立即进行灌溉。当叶片水势为-l.OMPa时,叶片出现暂时性萎蔫;叶水势在-1.5MPa时,叶片出现永久性萎蔫,叶水势在-2.4MPa时,可能造
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗 试剂、试剂盒匀浆缓冲液 清洗缓冲液
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后,接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等(见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法,或者
RNA分离与分析实验_分离RNA
实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60
线粒体的分离与观察
一、实验目的1. 初步掌握用差速离心法分离大鼠肝细胞线粒体的方法。2. 学习并掌握高速离心机和匀浆器的使用方法。二、实验原理线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验(一)
实验材料 黄化苗试剂、试剂盒 匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 在选好植物材料和匀浆缓冲液后,接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等(见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验(二)
3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性;叶绿体可以用叶绿素含量,白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性;乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性;内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
改良半叶法测定叶片光合速率
【原理】植物进行光合作用形成有机物,而有机物的积累可使叶片单位面积的干物重增加,但是,叶片在光下积累光合产物的同时,还会通过输导组织将同化物运出,从而使测得的干重积累值偏低。为了消除这一偏差,必须将待测叶片的一半遮黑,测量相同时间内叶片被遮黑的一侧单位面积干重的减少值,作为同化物输出量(和呼吸消耗量
线粒体的分级分离实验
实验材料 线粒体仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 将装有上清液的高速离心管,从装有冰块的烧杯中取出,配平后,以17 000 rpm 离心20分钟,弃上清,留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0.003 mol/L 氯化钙液1 ml,用吸管吹打成悬液,以17 000 rpm 离心20
线粒体的分级分离实验
高速离心法实验材料线粒体 仪器、耗材离心机 实验步骤 1. 将装有上清
人参叶的植物栽培
生物学特性:喜寒冷、湿润气候,羽强光直射,搞寒力强。种子可阴干贮藏,种胚有形态后熟和生理后熟特性;前者要求20-10℃变温,后者需要2-4℃低温,需时各为3-4个月,没有完成后熟的种子不能发芽。对土壤要求严格,宜在富含有机质,通透性良好的砂质壤土、腐殖质壤土栽培,忌连作。 栽培技术:用种子繁殖
植物叶片测温仪概述
产品简介 植物叶片测温仪为手持型便携式设备,主要用于测量植物的叶片表面与叶片附近的环境空气的温度差。可以实现自动、手动测量,并且可以实现多达8路同时测量。 植物叶片测温仪主要特点: 1、一体化设计,液晶屏幕显示,可正点定时或自由设定间隔时间采集信息、测量精度高,相应速度快。 2.体积小,
植物叶片温度测量仪
植物水分状况直接反映植物生长,测量植物水分含量能够实现农业的灌溉,是当今节水灌溉的由之路。研究表明,叶气温差(叶面温度与空气温度之差)可以很好地反映植物水分盈亏状态。此外,环境温度对植物开花等重要生长过程的影响已有很多研究,为进一步揭示植物本身与环境温度之间的耦合机理,就须对植物的“体温”进行测量。
植物细胞线粒体DNA的提取
实验方法原理分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。在
植物细胞线粒体DNA的提取
实验方法原理 分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。
植物叶片养分的检测离不开这款植物生理仪器
植物有6大器官,根、茎、叶、花、果实、种子,它们的生长状况综合起来就是植物的生长状况,测定它们的生长状况就需要用到各种植物生理仪器,其中分析根的生长状况可以使用根系分析仪,分析叶子的营养状况就需要使用植物养分测定仪,分析植物茎秆强度就需要使用茎秆强度测定仪,这些都是非常重要的植物生理仪器,今天小编