植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（二）
3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性；叶绿体可以用叶绿素含量，白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性；乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性；内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞色素 C 还原酶；质膜可以用 K+/ATPase 活性等来确定各种细胞器对线粒体的污染程度。经过仔细地密度梯度离心后，一般来自胞质的污染比较少，即使有污染，也可以通过测定乙醇脱氢酶的活性来确定。有关各种标志酶活性的测定方法可以参考文献 [ 1 ] 和文献 [7]。其他线粒体纯度相关事项可以参考注释 7。3.6 线粒体完整性鉴定分离出的线粒体可以通过各种方法来确定其结构的完整性。外膜的完整性通过其对外源细胞色素 C 的不通透性来确定。施加非离子变性剂（0.05% m/V Triton X-100 ) 前后细胞色素 C 氧化酶......阅读全文
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（二）
3.5 纯度鉴定可以通过各种细胞器标志性酶的活性来确定线粒体的污染程度。过氧化物酶体可以鉴定过氧化氢酶、羟基丙酮酸还原酶或者乙二醇氧化酶的活性；叶绿体可以用叶绿素含量，白色体可以用类胡萝卜素的含量或碱性焦磷酸酶的活性；乙二醛循环体可以用异柠檬酸裂解酶的活性；内质网可以用对抗霉素 A 不敏感的细胞
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗试剂、试剂盒匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材分光光度计实验步骤在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方法，或者
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验
实验材料黄化苗 试剂、试剂盒匀浆缓冲液 清洗缓冲液
植物线粒体制备及其亚结构分级分离实验（一）
实验材料 黄化苗试剂、试剂盒 匀浆缓冲液清洗缓冲液Percoll 梯度溶液仪器、耗材 分光光度计实验步骤 在选好植物材料和匀浆缓冲液后，接下来关键的因素包括匀浆方法、缓冲液的 pH、使用的缓冲液与植物组织之间的比例、研磨时间及温度等（见注释 5) 。3.1 匀浆根据植物组织的不同可以采取不同的匀浆方
线粒体的分级分离实验
高速离心法实验材料线粒体 仪器、耗材离心机 实验步骤 1. 将装有上清
线粒体的分级分离实验
实验材料 线粒体仪器、耗材 离心机实验步骤 1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20
线粒体的分级分离实验——高速离心法
实验材料线粒体仪器、耗材离心机实验步骤1. 将装有上清液的高速离心管，从装有冰块的烧杯中取出，配平后，以17 000 rpm 离心20分钟，弃上清，留取沉淀物。2. 加入0.25 mol/L 蔗糖-0．003 mol/L 氯化钙液1 ml，用吸管吹打成悬液，以17 000 rpm 离心20分钟。
桥粒的制备实验_分级分离桥粒
实验材料桥粒试剂、试剂盒尿素溶液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 在最终的桥粒沉淀中加 20 ml 尿素溶液，用玻璃/Teflon 匀浆器匀浆，用尿素溶液稀释匀浆物使蛋白质浓度为 0.15 mg/ml，用 1 mol/L 的 Tris-HCl 调节溶液的 pH 值到 9.0 在室温至少搅拌 1 小时。尿
植物茎的结构及其功能的观察实验
一、实验目的 1. 了解芽的构造。2. 了解双子叶植物茎的初生构造，次生构造及单子叶植物茎的构造。3．认识植物茎的输导功能。二、实验原理 芽是处于幼态而未伸展的枝、花或花序，也就是枝、花或花序尚未发育前的雏体。以后发展成枝的芽称为枝芽；发展成花或花序的芽称为花芽。枝芽的结构决定着主干和侧枝的关系与数
植物的根的结构及其功能观察实验
一、实验目的 1．了解根尖的内部构造。2．了解根的初生结构、初次生结构。3．掌握被子植物根尖的吸收分泌功能。二、实验原理 从根的顶端到着生根毛的部位，叫做根尖，主根、侧根和不定根都具有根尖。根尖是根中生命活动最活跃的部分，根的生长和根内组织的形成都是在根尖进行的。根尖一般分为根冠、分生区、伸长区和成
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
植物的根的结构及其功能的观察实验
一、实验目的 1．了解根尖的内部构造。 2．了解根的初生结构、初次生结构。 3．掌握被子植物根尖的吸收分泌功能。 二、实验原理 从根的顶端到着生根毛的部位，叫做根尖，主根、侧根和不定根都具有根尖。根尖是根中生命活动最活跃的
植物整体结构的研究和异常结构的观察实验（二）
(2)根－茎连接取大豆、黄瓜和曼陀罗等任一种植物的幼苗，先区分幼苗的子叶、真叶、下胚轴、上胚轴和根，然后自根部开始，向上胚轴方向做徒手横切片，每隔 1-2mm取一切片，按顺序将切片逐一放于载玻片上（材料可摆放 2-3 排，容纳不下时可放在另一张载玻片上）。然后加上盐酸和间苯三酚溶液，待木
植物RNA的制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 TELiCl无水乙醇乙酸钠氯仿仪器、耗材 匀浆器离心管离心机水浴锅实验步骤 1. 研钵和研棒先用液氮冷却，称出15 g 冻结植物组织于研钵中（加液氮保持冻结）。2. 用研棒磨成粉末，立即转移到一个盛有150 ml，研磨缓冲液和50 ml TLE缓冲液平衡酚的500
植物RNA的制备实验
酚/SDS法 实验材料 RNA 试剂、试剂盒
线粒体基质的线粒体结构
线粒体基质 线粒体基质是线粒体中由线粒体内膜包裹的内部空间，其中含有参与三羧酸循环、脂肪酸氧化、氨基酸降解等生化反应的酶等众多蛋白质，所以较细胞质基质黏稠。苹果酸脱氢酶是线粒体基质的标志酶。线粒体基质中一般还含有线粒体自身的DNA(即线粒体DNA)、RNA和核糖体(即线粒体核糖体)。 线粒体
细胞线粒体内部精细结构研究（二）
2、改良了传统SIM方法产生衍射光栅的方法2D-SIM成像需要通过产生两束互相干涉的光来形成三种不同偏振方向，且光强在空间上呈正弦变化的结构光。在传统的SIM成像方法中，这一过程除了要依靠液晶硅基的空间光调制器（LCOS-SLM）对光相位进行调制之外，还需要一种特殊的光学器件来改变光的偏振方向——旋
线粒体的结构
线粒体由外至内可划分为线粒体外膜（OMM）、线粒体膜间隙、线粒体内膜（IMM）和线粒体基质四个功能区。处于线粒体外侧的膜彼此平行，都是典型的单位膜。其中，线粒体外膜较光滑，起细胞器界膜的作用；线粒体内膜则向内皱褶形成线粒体嵴，负担更多的生化反应。这两层膜将线粒体分出两个区室，位于两层线粒体膜之间
蕨类植物门、松亚门、楔叶亚门观察实验
一、目的要求 通过实验掌握石松亚门、楔叶亚门代表种类的形态结构和生活史；掌握石松亚门、楔叶亚门的主要特征以及与其它 亚门的区别。 二、实验材料 石松孢子体；中华卷柏孢子体、孢子叶穗；问荆孢子体、茎横切，孢子叶穗等。 三、实验内容和方法 1．石松属（Lycopodium）
蕨类植物门、石松亚门、楔叶亚门观察实验
一、目的要求 通过实验掌握石松亚门、楔叶亚门代表种类的形态结构和生活史；掌握石松亚门、楔叶亚门的主要特征以及与其它 亚门的区别。 二、实验材料 石松孢子体；中华卷柏孢子体、孢子叶穗；问荆孢子体、茎横切，孢子叶穗等。 三、实验内容和方法 1．石松属（Lycopodium）：观察孢子体外形，石
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠 试剂、试剂盒蔗糖 氯化钙溶液
细胞核的分级分离实验
实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯
植物细胞结构与植物徒手切片观察试验（二）
5. 植物细胞的内含物观察（1）淀粉粒 取马铃薯块茎做徒手切片，先在低倍镜下观察，可见到其薄壁细胞中含有许多白色 的颗粒即淀粉粒。换高倍镜观察，可以看到淀粉粒的轮纹，并可找到具有两个脐的淀粉粒。 （2）贮藏蛋白质取蓖麻种子，剥去种皮，用肥厚的胚乳做徒手切片。先把切片放入盛有纯酒精的培养皿中洗涤数分
细胞和亚细胞提取物的制备实验
实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析，重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织，使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中，而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是勻浆。在本方案中，讨论了使用机械力匀浆组织：在 Potter-Elvehjem