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反相色谱（reversed phasc chromatography, RPC）是基于溶质、极性流动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱模式，任何一种有机分子的结构中都有非极性的疏水部分，这部分越大，一般保留值越高，在高效液相色谱中这是应用面最广的一种分离模式，在生物大分子的反相液相色谱条件下，流动相多采用酸性的、低离子强度的水溶液，并加一定比例的能与水互溶的异丙醇、乙腈或甲醇等有机改性剂，大量使用的填料为孔径在30纳米以上的硅胶烷基键合相，除此之外，也有少量高聚物微球。实验表明，烷基链长对蛋白质的反相保留没有显著的影响，但在蛋白质的活性回收上短链烃基（如C4，C8，苯基）和长链烷基（如C18，C22）反相填料是有区别的。表现在烷基链越长，固定相的疏水性越强，因而为使蛋白质较快洗脱下来，需要增加流动相的有机成分。过强的疏水性和过多的有机溶剂会导致蛋白质的不可逆吸附和生物活性的损失。总起来说，在烷基键合硅胶上的反......阅读全文
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid C
键合相色谱法是由液－液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上，克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解，及流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定相不断损失，色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
一、分类高效液相色谱法可分为四个基本类型：即液－固色谱法，键合相色谱法，离子交换色谱法及体积排阻色谱法。（一）液－固色谱法液－固色谱法通常称吸附色谱法，吸附剂有活性碳，氧化铝和硅胶，在液－固色谱法中用的载体都是硅胶。硅胶对溶质，分子的吸附能力不是平均分布在整个硅脱表面的，在硅胶表面有一些区域与溶质分
键合相色谱法是由液－液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上，克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解，及流动相通过色谱柱时的机械冲击，固定相不断损失，色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。正常相色谱法在正常相色谱法中共价结合到载体
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色谱的设想，然而直到六十年代后期，由于各种技术的发展，高效液相色谱才付诸实现。这种色谱技术曾被称为高速液相色谱（HighSpeed Liquid Chromatography），高压液相色谱（High Parss-ure Lipuid Chroma
如何更有效地进行液相方法开发，除了准确地设立一个新方法的目标外，选择方法开发的起点也是一个重要因素。从“液相故障排除”的宗旨来讲，在方法开发过程中的许多选择会决定一些问题会在最终方法中碰到或者避免。所以，每一个特性参数需要根据方法开发中可能出现的问题及完整的方法进行优化。 在方法开发中的第
根据分离机理的不同，高效液相色谱可分为液-固吸附色谱、液-液分配色谱（正、反相）、离子交换色谱、离子对色谱和分子排阻色谱。1.液固色谱使用固体吸附剂，色谱柱上分离组分的原理是根据固定相对组分的不同吸附力进行分离 分离过程是吸附-解吸平衡过程。 常用的吸附剂是粒径为5-10
一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。色谱法最早是由俄国
对于LC-MS/MS色谱柱人们的惯性思维通常是由反相液相色谱柱开始研发, 产生这种惯性思维是因为常规高效液相色谱分析中C18等反相高效液相色谱柱占有统治地位,另一方面是色谱公司不懂LC-MS/MS分析误导用户的结果。这惯性思维是不正确的! LC-MS/MS分析的实用战略和HPLC有很大不同! L
对于LC-MS/MS色谱柱人们的惯性思维通常是由反相液相色谱柱开始研发, 产生这种惯性思维是因为常规高效液相色谱分析中C18等反相高效液相色谱柱占有统治地位,另一方面是色谱公司不懂LC-MS/MS分析误导用户的结果。这惯性思维是不正确的!LC-MS/MS分析的实用战略和HPLC有很大不同! LC-M
自HPLC仪问世以来，其硬件技术、分析方法及应用研究发展迅速。本文仅就在食品化学分析中，HPLC分析技术与应用进展概述如下。 HPLC分析方法进展 ● 液-固色谱法（LSC） LSC是根据组分基团对吸附剂表面亲和力的大小，决定了其保留程度。在LSC色谱中应用广泛的极性固定相是硅胶。
I．概论 一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层
高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。本文讲的是液液分配色谱法的正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。 使用将特定的液态物质涂于担体
离子色谱仪的分离模式有离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱等。一、离子交换色谱：离子交换色谱使用的是低交换容量的离子交换剂，交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可用于阳离子的分离，带正电荷的交换基团（如季胺盐）可用于阴离子的分离。阴离子的分离过程：由于静电场相互作用，
离子色谱仪的分离模式有离子交换色谱、离子排斥色谱和离子对色谱等。一、离子交换色谱：离子交换色谱使用的是低交换容量的离子交换剂，交换剂的表面有离子交换基团。带负电荷的交换基团（如磺酸基和羧酸基）可用于阳离子的分离，带正电荷的交换基团（如季胺盐）可用于阴离子的分离。阴离子的分离过程：由于静电场相互作用，
高效液相色谱法按分离机理的不同可分为以下几类： （一）吸附色谱法（adsorptionchromatography）以吸附剂为固定相的色谱方法称为吸附色谱法。使用zui多的吸附色谱固定相是硅胶，流动相一般使用一种或多种有机溶剂的混合溶剂。在吸附色谱中，不同的组分因和固定相吸附力的不同而被分离。
制备液相色谱基础知识： 一、制备液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层
一、液相色谱理论发展简况 色谱法的分离原理是：溶于流动相( phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationary phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。 色谱法最早是由俄
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论 一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发
键合相及其分离模式多数分析色谱是在通过硅胶表面共价键合了固定相来修饰了吸附性能的载体上进行的。或者说，填料表面通过涂布化学性质稳定的吸附层来修性。能和建合相形成化学性质稳定的键的基质只有硅胶和高聚物。硅胶表面可以通过硅烷化来衍生化。通常使用的HPLC填料是在硅胶吸附剂表面衍生一条长链的脂肪烃硅烷。这
现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，首先必须对此有一定的认识和了解。下面将对几种常见的色谱填料极其各种的性能做各一个简要的介绍。 (1)、硅胶填料 硅胶填料主要应用正相色谱及反相色谱柱中，正相色谱用的固定相通常为硅胶(Sil
无机离子以及离解很强的有机离子通常可以采用离子交换色谱或离子排斥色谱进行分离。有很多大分子或离解较弱的有机离子需要采用通常用于中性有机化合物分离的反相（或正相）色谱。然而，直接采用正相或反相色谱又存在困难，因为大多数可离解的有机化合物在正相色谱的硅胶固定相上吸附太强，致使被测物质保留值太大、出现拖尾
问：哪个公司的色谱柱好？ chromexpert： 色谱柱从大的分有气相用、液相用、毛细管电泳柱等。 气相柱：气相柱又分为填充柱和毛细管柱。 进口柱主要有：Agilent、J&W等，种类众多、价格较贵。 国产柱：兰州化物所，北大化学系研制的色谱柱性能较好。
问：哪个公司的色谱柱好？chromexpert：色谱柱从大的分有气相用、液相用、毛细管电泳柱等。气相柱：气相柱又分为填充柱和毛细管柱。 进口柱主要有：Agilent、J&W等，种类众多、价格较贵。 国产柱：兰州化物所，北大化学系研制的色谱柱性能较好。 国产柱已完全能与进口柱媲美。液相柱
键合相色谱法正相键合相色谱法 氰基与氨基化学键合相 是正相键合色谱法较常用的固定相。流动相与以硅胶为固定相的吸附色谱法的流动相相似，也是烷烃（常用正已烷等）加适量极性调整剂而构成。氰基键合相的分离选择性与硅胶相似，但极性小于硅胶，即用相同的流动相及其它条件相同时，同一组分的保留时间将小于硅胶
美国EPA推荐应用GC/MS法测定土壤中的多环芳烃，但由于其检测时间长，检测成本高，应用并不十分广泛。本文结合国家标准，简化并优化了一套适用于土壤中多环芳烃的检测方法，采用反相高效液相色谱法，缩短了检测时间，并有针对性地对16种PAHs进行特别考察，结果表明适用于现阶段研发及生产的需求。
美国EPA推荐应用GC/MS法测定土壤中的多环芳烃，但由于其检测时间长，检测成本高，应用并不十分广泛。本文结合国家标准，简化并优化了一套适用于土壤中多环芳烃的检测方法，采用反相高效液相色谱法，缩短了检测时间，并有针对性地对16种PAHs进行特别考察，结果表明适用于现阶段研发及生产的需求。
1 引言 硒是一种人体必需的微量元素，以硒酶、 硒蛋白的形式广泛存在于生物体内，其中含有硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸残基的蛋白质为硒蛋白[1]。硒半胱氨酸是承载硒元素最主要的方式，硒半胱氨酸也因其重要性被称作第21个氨基酸，在哺乳动物体内参与蛋白组成，所以这种情况下硒蛋白也就是含有硒半
1 引言 硒是一种人体必需的微量元素，以硒酶、 硒蛋白的形式广泛存在于生物体内，其中含有硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸残基的蛋白质为硒蛋白[1]。硒半胱氨酸是承载硒元素最主要的方式，硒半胱氨酸也因其重要性被称作第21个氨基酸，在哺乳动物体内参与蛋白组成，所以这种情况下硒蛋白也就是含有硒半
二、化学键合固定相 将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗，并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。 1．键合相的性质 目前，化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体，用烷烃二甲基氯硅烷或