WB实验虐我千百遍,我待实验如初恋

大家都知道Western Blot时间周期较长,大致可以分为忙碌的第一天,和心痛的第二天,像极了爱情。人生若只如初见,何事秋风悲画扇。经历转瞬即逝的新手曙光后,便进入漫长的黑夜。 第一天,从最一步的配胶,到最后一步的孵育膜都极细心像极了爱情的萌芽期,需要精心的呵护。第二天经过繁琐的洗膜,孵二抗,洗膜,都需要耐心,之后便迎来了验证奇迹的一刻:显影,皆大欢喜或者一切皆空。像极经历爱情的磨合期,也有两个极端走向,婚姻的殿堂,或者以分手草草了事。 大多数实验室常用化学发光(ECL)方式,品牌,仪器众多,当然结果也良莠不齐。顿时回忆起当时做实验的点点滴滴,前面的工作繁琐而充实,一天下来觉得很满足,第二天既期待又紧张,期待有个完美的结果,但又担心事与愿违。大家怀揣着一颗忐忑不安的心走近暗室或者成像仪。随后便传来“为啥背景那么深,为啥没有目的条带,为啥分子量不对,被裁掉了…”一系列咆哮不绝于耳,大家都习以为常,相视一笑,接着做......阅读全文

WB实验虐我千百遍,我待实验如初恋

  大家都知道Western Blot时间周期较长,大致可以分为忙碌的第一天,和心痛的第二天,像极了爱情。人生若只如初见,何事秋风悲画扇。经历转瞬即逝的新手曙光后,便进入漫长的黑夜。   第一天,从最一步的配胶,到最后一步的孵育膜都极细心像极了爱情的萌芽期,需要精心的呵护。第二天经过繁琐的洗膜,孵

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(一)

细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作,细胞总会莫名其妙的被污染了!莫名其妙的挂掉啦!到底怎么回事呢?其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以

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细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验,每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧,细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作,细胞总会莫名其妙的被污染了!莫名其妙的挂掉啦!到底怎么回事呢?其实造成细胞污染的因素不单单是微生物,培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以

当基因编辑遇上自动化工作站

基因编辑技术是指能够对目标基因进行定点“编辑”,例如片段插入、缺失,碱基定点编辑等,实现对特定DNA片段的修饰。基因编辑工具目前的基因编辑工具主要有锌指核酸酶(ZFN)、转录因子激活样效应物核酸酶(TALEN)和规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR/Cas)等技术。CRISPR/Cas系统由于其

高校实验员:我的憔悴谁体会

  中国的高校目前有数以万计的实验员,随着现代化器材的增多、实验方法的不断改进,他们在科研、教学中的作用越来越重要。然而,正是这样一个群体,岗位的 “鸡肋感”却非常强烈——工资低、工作被教师们看轻、职称通道到了副高终止、转为教师岗几乎无望,种种绝望使得他们中的不少人不止一次想要退出这个队伍

WB实验小问答

  WB又称免疫印记法.是将生物大分子物质通过不同途径转移到固相载体的过程。其灵敏,可达ng级,用Ecl显色法理论上可达pg 级。方便,特异性高。今天给大家分析的是western blot实验中那些常见的问题,这份干货内容,请收好啦!    western blot 常见问题有那些?    1.为什

WB实验问题总结

答:原因有很多:a) 你的细胞中不表达这种蛋白质,换一种细胞;b) 你的细胞中的蛋白质被降解掉了,你必需加入PMSF,抑制蛋白酶活性;c) 你的抗体不能识别目标蛋白,多看看说明,看是否有问题。答:a) 有沉淀可能因为你的蛋白没有变性完全,可以适当提高SDS 浓度,同时将样品煮沸时间延长;b) 也不排

我首个超导托卡马克实验装置正式退役

  中国科学院等离子体物理研究所5月7日宣布,该所通过国际合作研制成功的中国首个超导托卡马克实验装置“合肥超环”(HT-7)正式退役。   据悉,自1990年初苏联库尔恰托夫原子能研究所赠送T-7托卡马克装置给中国后,时任等离子体所所长霍裕平院士集中全所人力、财力投入装置建设,对 T-7及其低

我航空领域首个国家工程实验室揭牌

  5月28日,结构性碳纤维复合材料国家工程实验室在中航工业北京航空材料研究院(下称航材院)揭牌。这标志着在我国航空工业及研究领域有了第一个国家工程实验室。  “世界上第一代飞机是以木头和布作材料;第二代飞机用钢和铝合金作材料;第三代飞机增加了更多的钛合金材料;而到了第四代飞机则添进大量的

WB实验的那些事儿

1.二抗需和一抗宿主的物种相同(如一抗来自兔,二抗为抗兔抗体)。原因: 一抗和二抗不匹配。2.参照说明书,设置阳性对照。原因:一抗不识别检测物种蛋白。3.每泳道蛋白上样量不低于20~30μg,设置阳性对照。原因:抗原量不足。4.使用可逆染色剂如丽春红S检测转膜效果,检测转膜操作是否正确。PVDF膜预

台湾新型诺如病毒肆虐

   近日,台湾疾病管制署发布信息:台湾岛内发现新型诺如病毒肆虐,春节前后恐流行。根据台湾疾病管制署的监测,近一周内,台湾岛内流行腹泻患者增加4000多人,腹泻感染事件高达97%与诺如病毒感染相关。农历春季前后恐掀起较大流行规模。   农历春季时值寒假,大陆许多居民会趁着假期,携带小孩子赴台旅游。寒

精准医学,我的“命运”我做主?

  2016年5月19日,科研人员在中科院合肥物质科学研究院强磁场科学中心高通量、高内涵药物综合研究平台实验室内进行实验操作。该技术体系提供的精准治疗方案为提高恶性肿瘤治疗疗效和患者生活质量提供了可能。  2016年8月10日,上海正大基因科学研究院的技术人员在采集受检者的口腔黏膜脱落细胞,这是基因

我研发出核聚变实验堆超导电缆导体

  8月16日,在国际热核聚变实验堆(ITER)计划总部官员的现场监造下,765米CB超导电缆导体在白银有色长通公司下线。这条导体是ITER装置中运行的最大长度超导缆。   ITER装置是产生大规模核聚变反应的超导托克马克,旨在建立人类可持续的清洁能源体系,俗称“人造太阳”。2003年1月,中国政

实验室的气瓶,我该如何放置才好?

  检测实验室有很多实验需要用到气体钢瓶,有以下几种情况存在:  ⑴钢瓶放置在检测仪器设备的同一间实验室内的防爆柜内;  ⑵钢瓶放置在检测仪器的同一间实验室内,用铁链或其他方式固定;  ⑶钢瓶放置在楼内的某一个地方,连接管路到实验室;  ⑷钢瓶放置在室外的普通房子里等等。  到底怎样放置更合理或适宜

导师再也不用担心我的糖水实验结果了~

作者:罗辑科学         抑郁症是一种复杂的多维度、异质性疾病,也是一种全球范围内常见的精神疾病,截止2019年10月份的一项权威统计表明全球累及患病人数超3.5亿。在我国有5400万人患有抑郁症,相当于100个人里至少有3个抑郁症患者。         抑郁症特征包括悲伤、兴趣或欣快感缺失,

导师再也不用担心我的糖水实验结果了~

  抑郁症是一种复杂的多维度、异质性疾病,也是一种全球范围内常见的精神疾病,截止2019年10月份的一项权威统计表明全球累及患病人数超3.5亿。在我国有5400万人患有抑郁症,相当于100个人里至少有3个抑郁症患者。   抑郁症特征包括悲伤、兴趣或欣快感缺失,有罪恶感或自我价值感低下,睡眠或食欲不振

为什么我的wb做出来目的条带有两条

估计跟常温放置有关系,要是多余的那个条带比你的目的蛋白条带小的话,那么可能就是目的蛋白降解了,你可以重新电转再杂交试试。电转后的膜最好要4℃保存。而且,你也可以查查目的蛋白的相关资料,看这个蛋白是不是有不同的多聚体形式,也有可能是这种情况导致的。

笃学不倦---精进不休--我在寝室静待“疫”过天晴

校园内外师生精诚团结、众志成城,努力阻断疫情在校内扩散与蔓延。楼宇封闭管理,寝室一夜间成了同学们活动的主要场所。吃饭睡觉、学习娱乐,都要在这里进行。在这种情况下,既要面对紧张的学习,也需要适应隔离生活。山西大学学子迅速调整状态,尽量让自己的生活和往常一样有序进行,寝室里的生活依旧精彩纷呈

笃学不倦---精进不休--我在寝室静待“疫”过天晴

校园内外师生精诚团结、众志成城,努力阻断疫情在校内扩散与蔓延。楼宇封闭管理,寝室一夜间成了同学们活动的主要场所。吃饭睡觉、学习娱乐,都要在这里进行。在这种情况下,既要面对紧张的学习,也需要适应隔离生活。山西大学学子迅速调整状态,尽量让自己的生活和往常一样有序进行,寝室里的生活依旧精彩纷呈。学习无止境

我是尿糖检测,这是我的自白

  我—尿糖检查,这话听着咋这么别扭啊。其实,我自己也觉着怪不好意思的。因为这都多少日子没人搭理过我了,用一句话讲:我正逐渐淡出公众视线。可是我实在是有点委屈啊! 我的委屈   想当初,我也曾经风靡一时,为万千糖尿病患者做出过贡献。可是,常言说得好:三十年河东,三十年河西,自从血糖仪小弟弟诞生以来,

虽然我很臭,但是我很有用!

 粪便?一听到这两个字眼,很多人立马就嗤之以鼻,恨不得躲得远远的。反感归反感,我们却不得不承认粪便的价值真是不少呢!    首先,大家最熟悉的莫过于粪便是植物的有机肥料,大地不可或缺的养分,农民伯伯的好帮手,千古年来为自然界的物质守恒循环功不可没。此外,粪便又被称为“来自于肠内的书信”,因为

wb实验的原理和步骤

WB实验是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将混合蛋白质样品分离后,利用特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质(例如PVDF膜)上。再以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与相对应的第一抗体特异性结合,之后再与酶或同位素标记的第二抗体相结合,最终通过底物显色或放射自显影来检测特异性目的基因表达的蛋白成分。

光镜与电镜技术我的一点实验心得

  一般生物体是不透明的,不能直接在显微镜下观察其内部结构        经过特殊的手段,减少体积和厚度,使光线能透过。        基本原则:保持其原有的组织结构和相互关系。        制片方法的种类        切片法        石蜡切片法、冰冻切片法等        优点:组

西藏大学首位女博士:实验室就是我的家

  西藏大学首届博士研究生毕业典礼暨学位授予仪式于11月10日下午在新校区图书馆二楼学术报告厅举行,此次共有四名同学获得博士学位,这是西藏本土培养的首批博士研究生。而张慧作为四名博士生中唯一的女博士,无论是在生活上还是在学术研究中,她都有着一颗炙热的心,热爱生活,也热爱自己的工作。  西藏大学校长纪

CART绝杀实体瘤?我不要你觉得,我要我觉得可以

   世界第一个接受CAR-T疗法的成人患者Bill Ludwigs(患有慢性淋巴性白血病-CLL)已经实现了9年的无癌生存。来自当时CAR-T治疗研究者—Bruce L. Levine 的twitter  第一位接受CAR-T疗法的儿童患者Emily(患有急性淋巴细胞白血病-ALL),至今已实现7

周正龙坚称:我的照片千真万确是真的

陕西省林业厅在2月4日发出的《陕西省林业厅向社会公众的致歉信》中就草率发布发现华南虎的重大信息表示歉意,并未透露周正龙拍摄的两张华南虎照片真伪问题。本网第一时间连线照片拍摄者周正龙,他仍然坚称:“我的照片千真万确是真的。” 周正龙在听到陕西省林业厅通报批评“草率发布发现华南虎的重大信息”的举措时,

转染,so-easy!-再也不用担心!

  转染可谓是做生物学实验的大家经常会考虑的一项实验技术,大致原理也都是明白的。实验室的师妹也一直在进行这个实验,最近她却一直愁眉苦脸,问了才知道,原来她转染完的细胞,去跑qpcr验证的结果一直不行,转染效率太低以至于无法进行后续的实验。到底转染是什么呢,为什么转染效率不高呢,今天我们就来一起讨论一

安徽:变“要我治”为“我要治”

   安徽省省长李国英近日先后到南淝河、十五里河、杭埠河等巢湖重要支流沿岸,调研入湖河流污染治理工作。他强调,要深入贯彻习近平生态文明思想,认真落实中央生态环保督察“回头看”和国务院大督查要求,强化生态优先、绿色发展的思想和行动自觉,坚持源头治理、系统治理、以河保湖,持续提升河流入湖水质,坚决打赢巢

汪应洛:我有我的中国梦

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/7/504702.shtm他出生于书香门第,名字中蕴含着程朱理学,他又是一位有着70余年党龄的无产阶级革命战士;在学生眼中,他是积极的实践家,睿智、宽容的领导者,在子女眼中,他又是一位博学、慈爱、豁达、乐观的父

记住我什么?

  有人问我:你希望别人怎么记住你?   我说:   1、实用分析化学,解决实际分析问题是分析化学硬道理。   2、掌握离子交换分离,有助解决分析化学(无机)真实难题。(离子交换是无机分析样品前处理的核心)   3、一本书:《有害物质分析——仪器及应用》的前言、离子交换和附录。