酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验
实验方法原理 用 1 mm 直径的玻璃珠，通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化，从而引入氨基。通过对硝基苯酰氯化物的进一步修饰，硝基被加到氨基上，氨基和亚硝基一起被转变为阳离子重盐，酶通过酪氨酰残基被连接（图 1）。实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷对硝基苯酰氯化物二氯甲醇三乙胺亚硝酸钠浓盐酸盐酸连二亚硫酸钠硝酸磷酸钾仪器、耗材 玻璃珠子实验步骤 1. 玻璃珠的活性玻璃珠（10 g）在 40 ml 5％ 硝酸中 80～90℃ 加热 1 h。其后珠子用蒸馏水洗三次，并被转移到 PE 容器中避免硅烷化和酶固定到长颈瓶的壁上。添加水（10 ml）和 3 g 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷，pH 先用浓 HCl 调节，最终用 2 mol/L 的 HCl 将 pH 调到 3～4，用 pH 指示纸来检测（pH 电极会被损坏）。反应的混合物在 65℃ 中孵化 12 h，之后珠子在吸滤器（瓷器，无玻璃粉）上......阅读全文
酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验
实验方法原理 用 1 mm 直径的玻璃珠，通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化，从而引入氨基。通过对硝基苯酰氯化物的进一步修饰，硝基被加到氨基上，氨基和亚硝基一起被转变为阳离子重盐，酶通过酪氨酰残基被连接（图 1）。实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 3-氨基丙基-三乙氧基硅烷对硝基苯酰氯化物二氯甲醇
酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验
基本方案 实验方法原理 用 1 mm 直径的玻璃珠，通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化，从而引入氨基。通过对硝基苯酰氯化物的进一步修饰，硝基被加到氨基上
酶在非孔玻璃表面的共价固定化实验
实验方法原理用 1 mm 直径的玻璃珠，通过与硅烷成分的反应来实现玻璃表面的活化，从而引入氨基。通过对硝基苯酰氯化物的进一步修饰，硝基被加到氨基上，氨基和亚硝基一起被转变为阳离子重盐，酶通过酪氨酰残基被连接（图 1）。图 1 硅烷化玻璃表面和共价固定化酶。Ⅰ 硅烷化玻璃表面的 Si-OH 基团用 3
可调孔玻璃的固定化实验
实验方法原理可调孔玻璃（CPG，Bioran）有多微孔的结构，是一种特殊的有较大表面的烧结玻璃，现在已经被用于直接的酶固定的活化型。这个实验使用 46 nm 孔宽的可调孔玻璃和甘油，通过一个硅氧烷桥结合到玻璃的表面。甘油被偏高砩酸盐氧化产生乙醛玻璃（图 1）。由亚苯基二胺形成希夫碱，并通过减少硼氢化
可调孔玻璃的固定化实验
实验方法原理 可调孔玻璃（CPG，Bioran）有多微孔的结构，是一种特殊的有较大表面的烧结玻璃，现在已经被用于直接的酶固定的活化型。这个实验使用 46 nm 孔宽的可调孔玻璃和甘油，通过一个硅氧烷桥结合到玻璃的表面。甘油被偏高砩酸盐氧化产生乙醛玻璃（图 1）。由亚苯基二胺形成希夫碱，并通过
可调孔玻璃的固定化实验
基本方案 实验方法原理 可调孔玻璃（CPG，Bioran）有多微孔的结构，是一种特殊的有较大表面的烧结玻璃，现在已经被用于直接的酶固定的活化型。这个实验使用
固定化酶在生物传感方面的应用
生物传感器是用生物活性材料(酶、蛋白质、DNA、抗体、抗原、生物膜等)与物理化学换能器有机结合的一门交叉学科，是发展生物技术必不可少的一种先进的检测方法与监控方法，也是一种物质分子水平的快速、微量的分析方法。在未来21世纪知识经济发展过程中，生物传感器技术必将是介于信息和生物技术之间的新增长点，在国
固定化酶到聚酯的实验
基本方案 实验方法原理 聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET，Terylene，Trevira，Diolen）是通过
固定化酶到聚酯的实验
实验方法原理 聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET，Terylene，Trevira，Diolen）是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚形成的，在这两步过程中三氯化锑作为催化剂（图 1）。用过量的乙烯乙二醇，最初形成一个低分子质量的具有末端竣基的聚合物再通
固定化酶到聚酯的实验
实验方法原理聚酯是通过二羧酸和二醇试剂的缩合合成的。频繁使用的聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET，Terylene，Trevira，Diolen）是通过对苯二酸盐和乙烯乙二醇的缩聚形成的，在这两步过程中三氯化锑作为催化剂（图 1）。用过量的乙烯乙二醇，最初形成一个低分子质量的具有末端竣基的聚合物再通过乙烯
固定化酶固定化酶与游离酶相比的优点
固定化酶与游离酶相比的优点：①极易将固定化酶与底物、产物分开；②可以在较长时间内进行反复分批反应和装柱连续反应；③在大多数情况下，能够提高酶的稳定性；④酶反应过程能够加以严格控制；⑤产物溶液中没有酶的残留，简化了提纯工艺；⑥较游离酶更适合于多酶反应；⑦可以增加产物的收率，提高产物的质量；⑧酶的使用效
固定化细胞和固定化酶比较
固定化细胞：优点： 固定化细胞内酶的活性基本没有损失。缺点： 固定化细胞只能用于生产细胞外酶。固定化酶：优点：容易与水溶性反应物和产物分离。缺点： 一种酶只催化一种化学反应,而产物形成是通过一系列酶促反应得到的.
酶固定化技术固定化方法比较
1 吸附法吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大，有活泼的表面。2 包埋法包埋固定化
固定化酶简介
固定化酶（immobilized enzyme)是20世纪60年代发展起来的一种新技术。所谓固定化酶，是指在一定的空间范围内起催化作用，并能反复和连续使用的酶。通常酶催化反应都是在水溶液中进行的，而固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法处理，使之成为不溶于水的，仍具有酶活性的状态。
科学家开发高熵非共价环肽新型玻璃
环肽因其刚性骨架结构，具有较高的稳定性、生物活性，以及较强的抗酶解能力，被视为构筑新型生物基材料和药物的理想分子基元。近日，中国科学院过程工程研究所研究员闫学海带领团队研发出一种可生物降解和循环再利用的高熵非共价环肽（HECP）新型玻璃，具有显著的抗结晶性、机械性能和酶耐受性，为新型医疗器件和智能功
过程工程所开发出高熵非共价环肽玻璃
环肽因刚性骨架结构而具有较高的稳定性、生物活性及较强的抗酶解能力，被视为新型生物基材料和药物的理想分子基元。近日，中国科学院过程工程研究所研究员闫学海团队研发出可生物降解和循环再利用的高熵非共价环肽（HECP）新型玻璃。这一新型玻璃具有显著的抗结晶性、机械性能和酶耐受性，为新型医疗器件和智能功能
酶固定化技术固定化方法结合法
酶蛋白分子上与不溶性固相支持物表面上通过离子键结合而使酶固定的方法，叫离子键结合法。其间形成化学共价键结合的固定化方法叫共价键结合法。共价键结合法结合力牢固，使用过程中不易发生酶的脱落，稳定性能好。该法的缺点是载体的活化或固定化操作比较复杂，反应条件也比较强烈，所以往往需要严格控制条件才能获得活力较
酶固定化技术固定化方法吸附法
吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大，有活泼的表面。
酶固定化技术固定化方法交联法
交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联，使酶分子和多功能试剂之间形成共价键，得到三向的交联网架结构，除了酶分子之间发生交联外，还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为：( 1) 单独与酶作用；( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联；( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载
酶固定化技术固定化方法包埋法
包埋固定化法是把酶固定聚合物材料的格子结构或微囊结构等多空载体中，而底物仍能渗入格子或微囊内与酶相接触。这个方法比较简便，酶分子仅仅是被包埋起来，生物活性被破坏的程度低，但此法对大分子底物不适用。1) 网格型将酶或包埋在凝胶细微网格中，制成一定形状的固定化酶，称为网格型包埋法。也称为凝胶包埋法。2)
酶固定化技术固定化方法吸附法
吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。但要求载体的比表面积要求较大，有活泼的表面。
酶固定化技术固定化方法特点对比
各类固定化方法的特点比较:比较项目吸附法结合法交联法包埋法物理化学方法分类物理吸附化学共价键结合物理离子键结合化学键连接物理包埋制备难易易难易较难较难固定化程度弱强中等强强活力回收率较高低高中等高载体再生可能不可能可能不可能不可能费用低高低中等低底物专一性不变可变不变可变不变适用性酶源多较广广泛较广
固定化酶固定化酶与水溶性酶相比的优缺点
优点：①固定化酶可重复使用，使酶的使用效率提高、使用成本降低。②固定化酶极易与反应体系分离，简化了提纯工艺，而且产品收率高、质量好。③在多数情况下，酶经固定化后稳定性得到提高。④固定化酶的催化反应过程更易控制。⑤固定化酶具有一定的机械强度，可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液，便于酶催化反应的连续化
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
微胶囊化尼龙珠法 实验方法原理 实验材料 酶溶液
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
实验方法原理实验材料酶溶液试剂、试剂盒碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1，6-己烷溶液混合，为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触，癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后，有机相被轻轻倒出，在有机溶液完全挥发后
微胶囊化尼龙珠法酶固定化实验
实验方法原理 实验材料 酶溶液试剂、试剂盒 碳酸氢钠癸二酰二氯化合物溶液磷酸钾NaCl实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」相同体积的酶和 1，6-己烷溶液混合，为了尼龙珠子在形成的时候彼此不相互接触，癸二酰二氯化合物溶液用微量注射器缓慢注入混合液中。5 min 后，有机相被轻轻倒出，在有
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理 丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N，N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成（图 1）。聚合反应是通过N，N，N'，N'-四甲基乙二胺（TEMED）和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量，可以控制聚合
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
基本方案 实验方法原理 丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N，N'-亚甲基二丙烯酰胺
丙烯酰胺包埋法固定化酶实验
实验方法原理丙烯酰胺的聚合已经应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE），也应用于酶的包埋。长的聚合物链通过交联 N，N'-亚甲基二丙烯酰胺连接而成（图 1）。聚合反应是通过N，N，N'，N'-四甲基乙二胺（TEMED）和过硫酸铵引发的。通过改变交联剂的数量，可以控制聚合物网孔尺寸
固定化酶在食品工业中的应用
采用固定化胰酶水解牛乳中的酪蛋白，降低了牛乳中酪蛋白的含量，从而降低了牛乳中酪蛋白与清蛋白的比例，使牛乳更易消化吸收； 采用聚乙烯醇固定化菊粉酶，用其水解菊芋，作为发酵原料生产乙醇，在 28℃，p H 5.2，发酵液糖度为 20%的条件下，保持反应器内发酵液的流动速度为 42 m L/min，