整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份,而保留膜的脂类成分,其结果,细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除,增加了标本的透明度,同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中,能形成二氧化锰,可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀,结果标本不需染色,即能在相差显微镜和透射电镜下清晰地显示细胞生物膜系统全貌。实验材料 肾上皮细胞试剂、试剂盒 高锰酸钾秋水仙素PBSFormvar液仪器、耗材 显微镜相差显微镜透射电子显微镜镍网载玻片盖玻片培养皿CO2培养箱实验步骤 一、高锰酸钾固定法显示用药(秋水仙素处理)前后CV-1细胞生物膜系统光镜标本的制备及观察。1. 取无菌盖玻片,分别放入二个直径5 cm 的培养皿中,接种CV-1细胞,加3 ml 培养基。2. 加盖做好标记,移入CO2培养箱培养24小时。其中一个培养皿在终止培养前4小时,加入10......阅读全文
银染核仁形成区的光镜和电镜标本制备及观察
实验原理 在细胞分裂中期核型中,人的端着丝粒染色体短臂区和在间期细胞核的核仁中有与银离子特异亲合物质,通过银染可以显示它们的致量,因此一直被人们所关注。近年来发现,虽然人的端着丝粒染色体短臂是 28S、18S、和 5.8S rRNA 基因存在部位,称核仁形成区(Nucleolar organizer
肠道杆菌培养物和染色标本观察
1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。2、琼脂平板培养物(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透明菌落。
肠道杆菌培养物和染色标本观察
实验步骤1、革兰氏染色标本:大肠杆菌和伤寒杆菌革兰氏染色呈红色、G-杆菌,两端钝圆,中等大小。2、琼脂平板培养物(1)伊红美蓝培养基:为常用的肠道致病菌分离鉴别培养基。在该培养基上,大肠杆菌能发酵乳糖产酸,使伊红与美蓝合成紫黑色化合物,故其菌落呈紫黑色,伤寒杆菌对乳糖不分解,故其菌落呈无色或微黄色透
正常细胞常规核型标本制备_人淋巴细胞染色体标本制备
实验方法原理在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋白质,使染色体清晰且分散良好。再结合离心技术去掉红细胞碎片,然后采用空气干燥法制片获得中期染色体标本。实验材料HeLa细胞
人癌细胞染色体制备及观察
一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是
电子显微镜生物标本的制备及观察实验_扫描电子显微镜
实验方法原理电子枪发射出的热电子,在加速电压作用下,形成高速电子流,经聚光镜和物镜的作用形成一极细的电子束,扫描于标本表面。入射电子与标本中的原子相互作用产生二次电子,二次电子的数量和每个电子的能量随标本表面形状及元素成分的不同而变化。二次电子被接收并经过放大,即可在荧光屏上显现出被放大的标本表面图
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备
实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种
实验动物组织标本的制备实验_解剖法
通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物,禁食24 小时。击头致昏,以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔,取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧(或95%O2+5%CO2 )保温(37 ℃)的营养液中,并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔
血细胞及血小板的观察实验
血细胞及血小板的观察实验实验材料血液 仪器、耗材载玻片
血细胞及血小板的观察实验
血细胞及血小板的观察实验 实验材料 血液 仪器、耗材
血细胞及血小板的观察实验
实验材料血液仪器、耗材载玻片盖玻片脱脂棉刺血针油镜用油显微镜实验步骤用自己制作的血涂片,选择较均匀的部分观察。由于白细胞在血片上分布不匀,大细胞(如单核细胞和粒细胞)多分布于血片的两边和尾部,小细胞(如淋巴细胞)则多分布于中间(图4),故可根据这一分布规律来寻找。先用低倍镜找到血细胞,分辨红细胞和白
电子显微镜生物标本的制备及观察实验_透射电子显微镜
实验方法原理电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具,它以电子束为照明源,利用电子流具有波动的性质,在电磁场的作用下,电子改变前进轨迹,产生偏转、聚焦,因而电子束透过标本后在电磁透镜的作用下可放大成像。高速运动的电子流其波长远比光波波长短,所以电镜分辨率远比光镜高,可达0.14 nm,放大倍率可达80万
早期胚胎培养及形态学观察实验
实验方法原理鸡胚胎发育可分为两个阶段:成蛋阶段的发育与成雏阶段的发育。1、胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育,是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是:受精卵→卵裂→囊胚期→原肠期。当胚胎发育到原肠期时,已分化形成内胚层和外胚层,从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘,当卵排出体外,因温度下降,胚胎生
早期胚胎培养及形态学观察实验
实验方法原理 鸡胚胎发育可分为两个阶段:成蛋阶段的发育与成雏阶段的发育。1、胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育,是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是:受精卵→卵裂→囊胚期→原肠期。当胚胎发育到原肠期时,已分化形成内胚层和外胚层,从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘,当卵排出体外,因温度下降,胚胎
培养活细胞的观察方法
培养活细胞可用相差显微镜,也可用缩时摄影直接记录活细胞的动态变化,还可将离体活细胞染色。 一、相差显微镜直接观察法: 活细胞对光线是透明的,光线通过活细胞时,波长和振幅几乎没有改变,所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。为了观察活细胞的结构,则需要通过其他途径提高结构的反差。20世纪30年
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定:加固定液8ml,混匀,固定10min。⑧ 离心:同上,吸去上清液。⑨ 制细胞悬液:根据细胞量多少,加入适量固定液,充分混匀,制成细胞悬液。⑩ 滴片:取出预先经冰水浸泡的载玻片,用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片,每片约滴2~3滴细胞悬液,使细胞较好分散。一般每一培养瓶
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备1
一、 人外周血染色体制备实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。在培养液中加入植
培养细胞的电子显微镜观察实验
一、透射观察法透射观察必须切片,根据培养细胞种类和培养方法不同分原位切片和消化分离切片两种。 1. 在用玻璃瓶培养细胞做透射观察时,做原位切片非常复杂。只能采用消化法把细胞制成悬液才能进行包埋和切片。其过程为:消化分离细胞、固定、包埋、切片和观察几
培养细胞的电子显微镜观察实验
实验方法原理 做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程,与一般组织切片法大体相似,其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后,这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物,比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上
培养细胞的电子显微镜观察实验
实验方法原理做透射电镜观察需进行切片、固定和包埋细胞过程,与一般组织切片法大体相似,其最大的难题是如何把细胞完整无损地从培养瓶皿壁上包埋下来。自从定型产品塑料薄膜问世后,这一困难已被克服。应用无菌塑料薄膜是极其理想的支持物,比用盖玻片、微孔滤纸、云母和卵壳膜等支持物都好。把细胞直接培养在塑料薄膜上,
离体蛙心标本的制备实验
实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 (1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面
离体蛙心标本的制备实验
实验材料蛙仪器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤(1)暴露蛙心:取蟾蜍一只,毁坏脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉,然后剪掉胸骨,打开心包,暴露心脏和动脉干。 (2)观察心脏的解剖结构:在腹面可以看
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
染色体GTG标本制备实验
非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G 带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。实验方法原理非显
染色体CBG标本制备实验
实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部
染色体GTG标本制备实验
实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。着色
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点,在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本,因此,病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求:(1) 标本的预处理要求:①尽可能使标
染色体CBG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C
染色体GTG标本制备实验
基本方案 实验方法原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GT
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器,已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断,对淋巴细胞群和亚群进行精确分类,还能分离纯化某一群或亚群细