细胞生长曲线实验
实验方法原理 细胞生长曲线是观察细胞生长基本规律的重要方法。只有具备自身稳定生长特性的细胞才适合在观察细胞生长变化的实验中应用。因而在细胞系细胞和非建系细胞生长特性观察中,生长曲线的测定是最为基本的指标。细胞生长曲线的测定一般可利用细胞计数法进行。实验材料 细胞试剂、试剂盒 D-Hanks液牛血清RPMI1640双抗0.08%胰酶仪器、耗材 净化工作台离心机恒温水浴箱冰箱倒置相差显微镜 培养箱吸管培养瓶吸头 枪头24培养板胶塞微量加样枪红血球计数板实验步骤 1. 取生长状态良好的细胞,采用一般传代方法进行消化,制成细胞悬液。2. 计数,精确地将细胞分别接种于21~30个大小一致的培养瓶内或培养孔(以24孔培养板为宜),每瓶或孔细胞总数要求一致,加入培养液的量也要一致。3. 每天或每隔一天取出3瓶(孔)细胞进行计数,计算均值。培养3~5 d 常要给未计数的细胞换液。4. 以培养时间为......阅读全文
大肠杆菌生长曲线有波动
很正常的,因为微生物会经过四个时期,对数期过后就会到衰退期了,这个时候如果你想要让他的数量一直升高,那就可以增加培养基,
大肠杆菌的生长曲线测定
实验方法原理 将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定期及衰亡期四个时期,各时期的长短同菌种本身特征、培养基成分和培养条件
细胞增殖生长方面实验_细胞计数法
实验方法原理细胞计数法:细胞计数法是测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为接种21 孔/24 孔板细胞(如用培养瓶时则21 瓶)。分7 组,每组3 孔(或瓶),培养一周,期间逐日检测一组,计数。把7天中的细胞数值绘成图,即为细胞生长曲线。实验材料细胞试剂、试剂盒胰蛋白酶仪器、耗材培养瓶恒温
滴定曲线实验
仪器、耗材等电聚焦凝胶实验步骤按 “载体两性电解质 pH 梯度等电聚焦” 所述的方法配制 T=5%,C=3% 的等电聚焦凝胶,并进行等电聚焦。为使在第二向电泳时,样品分子有强的电荷,以便在短时间内完成第二向电泳,保证滴定曲线的精确性以及为使样品有完整的滴定曲线,一般应选择宽 pH 范围(pH 3.5
滴定曲线实验
滴定曲线 仪器、耗材 等电聚焦凝胶 实验步骤
滴定曲线实验
仪器、耗材 等电聚焦凝胶实验步骤 按 “载体两性电解质 pH 梯度等电聚焦” 所述的方法配制 T=5%,C=3% 的等电聚焦凝胶,并进行等电聚焦。为使在第二向电泳时,样品分子有强的电荷,以便在短时间内完成第二向电泳,保证滴定曲线的精确性以及为使样品有完整的滴定曲线,一般应选择宽 pH 范
测细菌生长曲线必须用摇床吗
培养摇床主要有一下几点作用:使底物或代谢产物更好的转移分散,也许会发挥作用。对好氧菌来说溶解氧是很重要的,摇床能使空气中氧气溶解于发酵液中,这点对厌氧菌倒不是很重要。再就是使体系均匀。恒温培养箱没有起不到以上几点作用,做生长曲线肯定是不行的,各时期到来的具体时间肯定育差异。
绘制细胞增殖曲线
实验概要为了掌握细胞的增殖速率,常用的方法有不同时间点细胞数目统计、MTT法绘制增殖曲线等。下面以MTT法为例,简述绘制增殖曲线的方法。实验原理活细胞线粒体中的脱氢酶能够还原黄色的MTT为蓝紫色的不溶于水的甲瓉(formazan),甲瓉的多少可通过酶标仪测定其在490nm处的光密度(Optical
细胞增殖生长方面实验_细胞分裂指数法
实验方法原理细胞分指数是指被测细胞群每1000 个细胞中的分裂细胞数(分裂细胞/1000),用以表示细胞增殖旺盛程度。因此在检测中需观察和记录群体中1000 个细胞中的细胞分裂相数。细胞分裂是细胞增殖的方式,能比较确切地反映细胞增殖度。细胞分裂在培养的活细胞中也可直接观察到,因细胞分裂是动态变化过程
细胞化学词汇解链曲线
中文名称:解链曲线英文名称:melting curve定 义:以核酸溶液的流体力学特性(如黏度)或光学特性(如吸收率)作为温度的函数所作的图解。此曲线描述核酸的双链分子或单链分子上的双链区域,因温度的增高破坏了其中的氢键而使双螺旋拆开的程度。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
(一)实验目的 了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。 (二)实验原理 将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
实验概要了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。实验原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、对数期、稳定
用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线
(一)实验目的了解细菌生长曲线的持点及测定原理,学会用比浊法测定细菌的生长曲线。(二)实验原理将一定数量的细菌,接种于适宜的液体培养基中,在适温下培养,定时取样测数,以菌数的对数为纵坐标,生长时间为横坐标,作出的曲线称为生长曲线。该曲线表明细菌在一定的环境条件下群体生长与繁殖的规律。一般分为延缓期、
生长曲线引导的厌氧微生物分离新策略
近日,农业农村部成都沼气科学研究所厌氧微生物创新团队联合国外高校提出了一种分离纯化依赖氢的甲基营养型产甲烷古菌的标准实验流程。相关研究成果发表在《自然—试验流程(Nature Protocols)》上。该研究创新性地将实时生长曲线监测与群落逐步简化相结合,利用目标菌的相对生长优势,成功分离首株非广古
微生物生物量和生长曲线的测定
实验原理我们知道微生物都具有生长旺、繁殖快的特点,单细胞微生物如细菌、酵母菌的个体细胞的增大即细胞物质的增加是有限度的,细胞长大到 一定程度就开始分裂繁殖,菌体数量增多。细菌旺盛生长时几十分钟就可繁殖一代。因此他们的生长往往是通过繁殖表现出来的,本质上是以群体细胞数目增加为生长标志。丝状微生物如放线
微生物生物量和生长曲线的测定
实验概要通过测定酵母、放线菌和黄瓜枯萎病菌的生物量和生长曲线,了解微生物的生长规律。实验原理我们知道微生物都具有生长旺、繁殖快的特点,单细胞微生物如细菌、酵母菌的个体细胞的增大即细胞物质的增加是有限度的,细胞长大到 一定程度就开始分裂繁殖,菌体数量增多。细菌旺盛生长时几十分钟就可繁殖一代。因此他们的
单层生长细胞的免疫荧光标记实验
实验材料 单层细胞试剂、试剂盒 PBS多聚甲醛甲醇抗体仪器、耗材 离心机水浴锅培养箱实验步骤 1. 置生长成片的单层细胞于冰上冷却,吸去培养液并以4℃PBS洗涤。吸去PBS。2. 如欲研究细胞表面抗原,则以2%PFA于冰上面定30 min。如为细胞质抗原,则可用含0.1% Triton X-10
单层生长细胞的免疫荧光标记实验
免疫荧光标记是微生物学、免疫学、病理学及免疫组织化学中常用的一种免疫学实验方法,在临床上得到了广泛的应用。实验方法原理免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光
细胞生长检测——直接计数细胞
1、如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。2、如果靶细胞是悬浮细胞,则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞,活细胞可以排除进入细胞的台盼
细胞生长的概念
细胞的生长,主要是指细胞体积的增大,细胞分化完成后并不是所有的细胞都有生长的过程,大多数的组织器官都是通过不断的细胞分裂以增加细胞数量的方式来实现器官生长,只有很少数细胞(像神经元细胞)是通过增大细胞体积的方式来实现器官生长的,随着个体的不断发育,神经元细胞,特别是轴突的部分也要不断的伸长。
细胞培养细胞成长曲线制作方法
细胞成长曲线还有其他办法制作,除此以外还有相对计数的办法,该类办法首先要制作规范曲线,标定细胞数和某个变量的函数,然后我们只需要测定每天这个变量的值便能够核算出细胞数。常用的是 MTT、CCK8 等比色的办法。
实验室生长的杀伤细胞(fcs)可以治疗脑肿瘤
通过基因工程改造干细胞的产生而产生的,该干细胞产生一种称为假单胞菌外毒素的毒物。通过将这种毒物与抗体片段连接,使其靶向特定类型的脑肿瘤细胞(胶质母细胞瘤)。该技术已成功用于治疗血液癌症,例如白血病,但在治疗实体瘤方面却不太成功。研究人员认为,这是因为它只能在很短的时间内保持活跃(半衰期很短),并且可
酶学标准曲线的制作实验
实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验步骤一、实验试剂仪器:ALT/GPT试剂 待测标准物 半自动生化分析仪 试管 加样器二、实验操作:1. 稀释试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:三. 实验结果:把测得数
酶学标准曲线的制作实验
实验方法原理L-丙氨酸+α-酮戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+→L-乳酸+NAD+实验步骤一、实验试剂仪器:ALT/GPT试剂 待测标准物 半自动生化分析仪 试管 加样器二、实验操作:1. 稀释试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:三. 实验结果:把测得数
实验中为什么要做标准曲线
在分析化学实验中,常用标准曲线法进行定量分析,通常情况下的标准工作曲线是一条直线。横坐标(X)表示可以精确测量的变量(如标准溶液的浓度),称为普通变量,纵坐标(Y)表示仪器的响应值(也称测量值,如吸光度、电极电位等),称为随机变量。当X取值为X1, X2,…… Xn时,仪器测得的Y值分别为Y1, Y
ELISA的实验数据如何拟合曲线
一、做ELISA试剂盒标准曲线样品检测时有几个问题需要注意1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在
实验中为什么要做标准曲线?
在分析化学实验中,常用标准曲线法进行定量分析,通常情况下的标准工作曲线是一条直线。横坐标(X)表示可以精确测量的变量(如标准溶液的浓度),称为普通变量,纵坐标(Y)表示仪器的响应值(也称测量值,如吸光度、电极电位等),称为随机变量。当X取值为X1, X2,…… Xn时,仪器测得的Y值分别为Y1, Y
elisa实验标准曲线的技术解答
标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的结果,甚至是关系到实验的成败。那么在elisa实验中,这一方面该如何处理呢?今天我们来一起看看上海劲马对elisa实验标准曲线的技术解答内容: 1.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要
细胞生长检测10:直接计数细胞
直接计数细胞1.如果靶细胞是帖壁细胞,在细胞因子作用适当时间后,用生理盐水洗去死亡细胞,用0.25%胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打,使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。2.如果靶细胞是悬浮细胞,则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞,活细胞可以排除进
生长分数的测定实验
实验方法原理连续48h 标记细胞,间隔地取样用于放射自显术。实验步骤操作步骤除第3步外,其余各步骤如方案 21.10,温育时间应分别为 15min、30min 和1、2、4、8、24、48h。