大鼠主动脉平滑肌细胞培养
实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150-200 g),断头,浸入75%的酒精中15 min。2. 置入超净台中,将大鼠固定于杀鼠板上,在无菌条件下打开腹腔,分离出胸主动脉、腹主动脉, 摘出。3. PBS 清洗3 遍,剥去外膜,用手术刀片刮去内膜,留下中膜并将其移入1 mL 的培基中、剪成1×1 mm2 大小组织块。4. 再将PBS清洗组织块,移入25 mL 的培养瓶中,用尖嘴弯管均匀贴好组织块,放入37℃、5% CO2的培养箱倒置培养6 小时后,待组织块贴壁后,再加入2.5 mL 培养液后放回培养箱中。5. 随后每3 天予以全量换液。二、结果3-5 天后可见组织块周围有细......阅读全文
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——消化法
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原
兔膀胱平滑肌细胞培养实验——酶分离法
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下观察细胞形态及生长
人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法
实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1. 要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不
细胞技术专题:人脐动脉平滑肌细胞培养实验
人脐动脉平滑肌细胞培养可以:(1)获得人脐动脉平滑肌细胞;(2)作为重大动脉疾病的研究底物;(3)研究血管模型;(4)对血管疾病的药理学和治疗继续提供信息。实验方法消化法 贴块法 实验方法原理运用消化法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。 实
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(一)
兔膀胱平滑肌细胞培养可以:(1)分离得到高纯度兔膀胱平滑肌细胞;(2)进行细胞学鉴定研究;(3)用于细胞学其他研究。实验方法酶分离法 实验方法原理运用显微手术器械在肉眼下仔细剔除膀胱黏膜层及浆膜层后,完整分离膀胱平滑肌层。然后以酶分离法获取兔膀胱平滑肌细胞,体外原代和传代培养分离细胞。在倒置显微镜下
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(二)
二、结果 两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24 小时均可见膀胱平滑肌细胞贴壁生长,正常兔 7 天左右、而梗阻兔则需10~12 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。均传代顺利,传代后约正常兔6天左右、而梗阻兔需8~9 天可于50 毫升培养瓶约 80%汇合。本组中均传至第8 代,经第8
细胞技术专题:兔膀胱平滑肌细胞培养实验(三)
收起 注意事项1. 应严格无菌操作。2. 仔细彻底剥除膀胱黏膜、黏膜下及浆膜层,是确保获的大量高质单个膀胱平滑肌细胞的基础。3. 膀胱平滑肌组织应尽量减碎以确保充分消化。4. 严格控制胶原酶和胰蛋白酶的浓度和消化时间,见消化液混浊、组织块呈絮状,或在倒置显微镜下见消化液中有较多单个细胞或细胞小
威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍
威斯腾原代细胞培养和细胞药筛 威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。 同时,威斯腾生物结合多
大鼠平滑肌细胞的另一种培养方法
显微器械:眼科剪一把,直弯眼科镊各一把,细结镊一把,手术刀一把,针头诺干杀老鼠器械:手术剪一把,大镊子一把,弯眼科镊一把,组织钳一把,50ml烧杯一个(锡纸包好)另外:10ml离心管两个,培养皿两个,10ml的瓶子三个,小滤器两个,硅胶板一块,培养瓶盖子诺干贰。试剂D-HANKS液250ml,双抗2
大鼠平滑肌抗体(SMA)ELISA试剂盒使用说明
原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 SMA 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 SMA与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠SMA,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值
概述骨桥蛋白的表达方式
正常情况下其表达甚微的细胞,如巨噬细胞、SMC、T淋巴细胞、成纤维细胞等在一些诱导因素下可以大量表达OPN,包括: (1)高血压:人主动脉平滑肌细胞暴露在160 mmHg的高压下3h,然后再培养,结果3h后发现高压组同非高压组相比细胞增殖11%。免疫印迹分析发现,培养8 h以内OPN的表达没有
大鼠乳鼠成骨细胞培养实验
酶消化法 实验方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶
大鼠乳鼠成骨细胞培养实验
酶消化法 实验方法原理 取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶
大鼠乳鼠成骨细胞培养实验
大鼠乳鼠成骨细胞培养培养可以:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)用于骨修复的细胞学机制研究。实验方法酶消化法实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快
大鼠视神经少突胶质细胞培养
实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。实验材料 Wistar大鼠试剂、试剂盒 亚硒酸钠腐胺转铁蛋白胰岛素甲状腺素黄体酮谷氨酰胺小牛血清兔抗鼠GC抗体仪器、耗材 眼科剪滴管离心机培养皿 CO2培养箱实验步骤 一、实验步骤1. 取新生2
大鼠纤维环细胞培养注意事项
1. 收到大鼠纤维环细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读大鼠纤维环细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行
大鼠淋巴成纤维细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL大鼠淋巴成纤维细胞。悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px 皿中,加入
威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍
威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。 同时,威斯腾生物结合多年原代及传代细胞培养经验,结合平台已有的
SW620细胞的基本特性及生理变化
SW620细胞的基本特性及生理变化 SW620细胞说明书功能: (1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。 (2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。 (3)与血管疾病的进展和稳定有关。 生理变化: (1)主动脉硬化。 (2)主动脉
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项
大鼠卵巢上皮细胞培养注意事项:1. 收到后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承
大鼠视神经少突胶质细胞培养实验
牛血清培养法 实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。
大鼠视神经少突胶质细胞培养实验
牛血清培养法 实验方法原理 采用视神经,DMEM/F12条件培养基培养,观察细胞形态及生长,并进行免疫组织化学鉴定。
细胞技术专题:大鼠肝星状细胞培养实验
实验方法细胞培养技术 实验方法原理选用Wistar大鼠经消化酶灌注肝脏后,用分离液分离HSC,通过观察其自发荧光及其显著特征性结构的脂肪染色、细胞免疫化学染色等方法鉴定。 实验材料雄性 SD 大鼠 试剂、试剂盒戊巴比妥钠 小牛血清 DMEM 酶消化液I、Ⅱ Nycodenz D-Hanks’液 HB
大鼠大脑皮层神经元细胞培养
实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同分为轻、中、重3组,对照组除不进行机械性划割,其余处理同损伤组,伤后不同时间点(10,30 min , 1,3,6,12,24 h)检测细胞存活率及培养液上清乳酸脱氢酶(
RNc细胞大鼠皮质细胞培养注意事项
1. 收到RNc细胞大鼠皮质细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读RNc细胞大鼠皮质细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题
原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍(二)
3、神经元细胞原代培养 步骤:1)出生 2 d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤,依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜,无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2)在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层,除去脑膜,剪碎组织成约1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入3
αSMA/-ACTA2—肌成纤维细胞标志物抗体的应用范围
ACTA2(actin alpha 2)是一种肌动蛋白,有多个别名,包括α-肌动蛋白、α-肌动蛋白-2、主动脉平滑肌或α平滑肌肌动蛋白 (α-SMA)。Actins是球状多功能蛋白质的一个家族,形成微丝。ACTA2是6种不同肌动蛋白亚型之一,参与平滑肌的收缩。ACTA2(和所有actins一样)
大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验
机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同
大鼠大脑皮层神经元细胞培养实验
机械性划割培养 酶消化法 实验方法原理 SD胎鼠脑皮层神经元体外培养7 d ,微量移液器塑料滴头于培养孔内机械性划割培养之神经元,依划割程度不同
大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法
大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺