骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则...

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则和鉴定实验方法原理 实验材料 骨髓基质试剂、试剂盒 完全培养基(CCM)无钙或镁的磷酸盐缓冲液无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材 聚丙烯离心管 15 mL和50 mL塑料组织培养皿 直径15 cm塑料微量移液器枪头 10μL实验步骤 (a)去除抗凝管盖子,将骨髓液转移至50mL离心管中。加人室温的HBSS,确保体积达到25 mL。(b)取另一个50 mL离心管,加人20 mL Ficoll-Paque淋巴细胞分离液,将25 mL细胞悬液轻轻加到Ficoll上层。HBSS与Ficoll间的界面不能被破坏。(c)关闭闸,室温1800g离心30min。(d)离心完毕,于Ficoll和HBSS的界面收集白色细胞层,将其移至新的50 mL离心管中。(e)用HBSS将收集到的细胞悬液体积调至3倍,室温1000g离心10 min。重复洗涤。(......阅读全文

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则...

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则和鉴定实验方法原理 实验材料 骨髓基质试剂、试剂盒 完全培养基(CCM)无钙或镁的磷酸盐缓冲液无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材 聚丙烯离心管 15 mL和50 mL塑料组织培养皿 直径15 cm塑

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养基本原则

实验方法原理实验材料骨髓基质试剂、试剂盒完全培养基(CCM) 无钙或镁的磷酸盐缓冲液 无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液 Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材聚丙烯离心管 15 mL和50 mL 塑料组织培养皿 直径15 cm 塑料微量移液器枪头 10μL实验步骤(a)去除抗凝管盖子,将骨

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞(MSCs)的培养原则和鉴定

人骨髓不连续密度梯度离心用于MSCs生产实验方法原理实验材料骨髓基质                                                                                      试剂、试剂盒完全培养基(CCM)              

骨髓基质来源的间充质干/祖细胞培养基本原则和鉴定

实验材料骨髓基质试剂、试剂盒完全培养基(CCM)无钙或镁的磷酸盐缓冲液无钙或镁的Hank’s平衡盐溶液Ficoll-Paque淋巴细胞分离液仪器、耗材聚丙烯离心管 15 mL和50 mL塑料组织培养皿 直径15 cm塑料微量移液器枪头 10μL实验步骤(a)去除抗凝管盖子,将骨髓液转移至50mL离心

骨髓间充质干细胞的定义和来源

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层。

间充质干细胞(MSCs)鉴定

            实验方法原理 实验材料 MSCs 试剂、试剂盒 无菌CCM

间充质干细胞(MSCs)鉴定

实验方法原理实验材料MSCs                                                          试剂、试剂盒无菌CCM                                                                  P

间充质干细胞(MSCs)鉴定

实验方法原理 实验材料 MSCs试剂、试剂盒 无菌CCMPBSA0.85%台盼蓝盐溶液胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材 聚丙烯离心管15 ml或50 ml塑料组织培养皿直径15 cm移液器枪头非灭菌结晶紫溶液蒸馏水改良的Neubauer血细胞计数器移液器实验步骤 (a)进行MSCs收集和传代。对悬液中的

间充质干细胞(MSCs)鉴定

实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌CCMPBSA0.85%台盼蓝盐溶液胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材聚丙烯离心管15 ml或50 ml塑料组织培养皿直径15 cm移液器枪头非灭菌结晶紫溶液蒸馏水改良的Neubauer血细胞计数器移液器实验步骤(a)进行MSCs收集和传代。对悬液中的剩余细胞重新计数以确保

人骨髓间充质干细胞的培养

人软骨损伤后,可用软骨组织工程进行软骨缺损修复。软骨可由间充质干细胞分化而来。因而,间充质干细胞的培养和分化具有重要作用。间充质干细胞(MSC)可以2×10的5次方/cm2的密度接种于特定的培养液(低糖DMEM,含15%FBS,100u/L氨卡青霉素,100 mg/L链霉素,250 mg/L两性霉素

MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞(MSCs)的冻存

实验材料MSCs试剂、试剂盒α-MEMFBS组织培养级二甲亚砜(DMSO)冻存液:含30%FBS和5%DMSO的α-MEM。过滤除菌(为进一步确保安全和使冻存液澄清。高浓度血清和DMSO混合时冻存液会变混浊)仪器、耗材聚丙烯离心管15ml和50mlPBSA0.22μm滤膜的真空过滤器50ml冻存管2

骨髓间充质干细胞

常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同,分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入,又有人利用

骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞(BMSC),既往称为骨髓基质成纤维细胞,是一类起源于中胚层的成体干细胞,具有自我更新及多向分化潜能,可分化为多种间质组织,如骨骼、软骨、脂肪、骨髓造血组织等。骨髓BMSC的迁移、定植、增殖与分化,需要从外界获取信息。其分化方向取决于所在的微环境。这里的”微环境”不仅包括骨髓微环境,

间充质干细胞的来源

间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells, 简称MSCs),来源于胚胎发育早期的中胚层和外胚层,是一群具有多向分化潜能的多能干细胞,在体内外特定的诱导条件下可以分化成骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、心肌、内皮甚至血液等多种间充质系列细胞或非间充质系列细胞。MSCs存在于身体的

骨髓间充质干细胞的概念

骨髓间充质干细胞是骨髓基质干细胞,对骨髓中的造血干细胞(HSC)不仅有机械支持作用,还能分泌多种生长因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)来支持造血。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)具有多向分化潜能,能促进间充质组织的再生,

MSCs培养物的扩增和冻存实验_间充质干细胞的传代培养

缩小细胞培养体积试验证明,MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中,面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量,一般使用此方法传代,每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源:《人干细胞培养》实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌完全培养培养基(CCM)、PB

骨髓间充质干细胞的治疗原理

干细胞疗法是将患者自己的骨髓中的干细胞通过细胞生物学方法提取出来,经过体外分离再将其植入患者肝脏内,就像一粒粒种子种在其肝脏“土壤”中,经过一段时间发育、成熟就会变为行使肝脏功能的肝细胞,从而修复、补充受损或缺损的肝组织,达到改善肝脏功能的目的。

骨髓间充质干细胞的胞特性

(1)组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。(2)细胞鉴定:CD44免疫荧光染色为阳性。(3)经鉴定细胞纯度高于90%;(4)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。(5)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

关于骨髓间充质干细胞的简介

  骨髓原始间充质干细胞是骨髓基质干细胞,是人们在哺乳动物的骨髓基质中发现的一种具有分化形成骨、软骨、脂肪、神经及成肌细胞的多种分化潜能的细胞亚群。它们对骨髓中的造血干细胞(HSC)不仅有机械支持作用,还能分泌多种生长因子(如IL-6,IL-11,LIF,M-CSF及SCF等)来支持造血。

骨髓间充质干细胞的主要特性

间充质干细胞(MSC)是属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量最为丰富,由于骨髓是其主要来源,因此统称为骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞具有以下特性:一、具有强大的增殖能力和多向分化潜能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、脂肪细胞、软

骨髓间充质干细胞原代分离

实验概要本实验用两种方法(贴壁培养方法和密度梯度离心法)进行了骨髓间充质干细胞原代分离。主要试剂所用试剂盒 小鼠骨髓间充质干细胞分离和培养试剂盒             货号:MBMS-000-001大鼠骨髓间充质干细胞分离和培养试剂盒             货号:RBMS-000-001猪骨髓间

MSCs培养物的扩增和冻存实验_冻存间充质干细胞的复苏

实验材料MSCs试剂、试剂盒无菌CCMPBSA仪器、耗材塑料组织培养皿 15 cm微量移液器枪头用于Eppendorf P10P100和P1000非灭菌调至37°C的FisherScientificIsotemp水浴箱实验步骤(a)准备2个15 cm培养皿,加人25 ml预热的CCM。(b)从液氮罐

正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养

正常兔骨髓间充质前体细胞的体外成软骨培养 实验材料: 1.实验动物:5月龄兔; 2.清洗液:不含Ca2+和Mg2+的1&time,添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素,pH7.2; 3.完全培养液:DMEM培养液,补充10%胎牛血清、青霉素100

骨髓间充质干细胞(MSC)原代培养与传代培养

准备工作(1)试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗(青链霉素)、75%酒精、95%酒精、培养瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周龄,18~22g,雌雄不限)、胎牛血

关于骨髓间充质干细胞的分离方法介绍

  常用的分离MSC的方法主要有全骨髓法和密度梯度离心法,全骨髓法即根据干细胞在低血清培养基中有贴壁优势特性,定期换液除去不贴壁细胞,从而达到纯化及扩增MSC的目的。密度梯度离心法即根据骨髓中各细胞成分比重的不同,分离单核细胞进行贴壁培养。二者本质上无多大区别。随着对MSC表面抗原认识的深入,又有人

小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材

实验概要小鼠骨髓间充质干细胞的原代取材主要试剂75%酒精、含2% SP(Pen Strep)的DPBS、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、手术剪、手术镊、5 mL注射器、10 mL注射器、7号针头、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤①断颈法处死小鼠,用手术器械完整地

骨髓间充质干细胞的运输和保存方法

视气温状况、运输距离,客户与公司协商后选择下述一种运输方式:(1)T25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输。收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。(2)1ML冻存细胞悬液装于1.8M

人骨髓间充质干细胞的原代取材

实验概要人骨髓间充质干细胞的原代取材主要试剂75%酒精、含2% SP(Pen Strep)的DPBS、间充质干细胞培养液主要设备眼科剪、眼科镊、手术剪、手术镊、5 mL注射器、10 mL注射器、7号针头、400目细胞筛、15 mL离心管、3.5 cm培养皿实验步骤人骨髓间充质干细胞取材,需在手术前与

脐带间充质干细胞的分离培养

  脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。  取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织,将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,

脐带与胎盘来源间充质干细胞的比较!

  面对间充质干细胞治疗的很多不确定性,我们必须对目前的研究结果和结论保持一定的谨慎态度。或许不同来源的间充质干细胞有着各自不同的治疗方向。  间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)最先在骨髓中被发现,并广泛分布在人体里。虽然不同组织来源的间充质干细胞均能符合200