透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■ 三-n -辛胺; U 1,2-三氯三氟乙烧;放射性物质(见附录5)2) 从标记细胞中吸出培养基,用PBS清洗两次。彻底吸去清洗液,将细胞放入冰盒。迅速加入〇.5ml冰冷的4%高氯酸,轻轻混匀以裂解细胞,冰浴5分钟s将细胞到入酸液,定量转移至一个带螺帽的离心管。于4尤全速离心5 分钟以沉淀细胞碎片。3) 将上清转移至新的离心管,放入冰浴。按 1.2比1的比例新鲜配制三- n -辛胺与1,】,2_三氯三氟乙烷的混合物,混匀。加0.6ml混合物到高氯酸样品,盖紧螺帽,用旋涡混合器振荡1分钟以上。此时一定要充分混匀,以确保完全中和。4 ) 完全混匀后,室温离......阅读全文

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

1.从标记细胞提取ATP1)  备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■ 三-n -辛胺; U  1,2-三氯三氟乙烧;

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP用发光分析定量测定ATP用高效液相层析定量测定ATP测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤1.从标记细胞提取ATP1)  备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验

从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性             实验步骤

比活性的概念和特点

比活性是各种实验中用来评价不同催化剂的活性的指标。比活性=时空产率/催化剂比表面积。比活性取决于催化剂的化学组成,包括杂质的含量和分布。生长激素比活性是指单位毫克蛋白质的生物学活性单位,这是重组蛋白质药物不同于化学药的一项重要指标。进行生长激素比活性项目的检测,不仅可以反映产品生产工艺的稳定情况,而

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验3

用高效液相层析定量测定ATP实验步骤1)准备下列材料:Whatman Partisphere SAX高效液相层析柱和保护柱线性梯度洗脱液设定在254nm的紫外线监测仪装配好的0.2;mi Whatman滤膜和滤器0.2^?过滤的Milli-Q水0.2/im S@_0,:5m〇l/LNH4H2ro4

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1

从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1)  备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验4

测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤准备下列材料:含有未知浓度mp] ATP的细胞裂解物样品10mg/ml激酶底物肽渐夜(Calbiochem)0.5mraol/L cAMP 溶液 I、Calbiochem)cA-PrK (Calbiochem)cA-PrK分析缓冲液lmol/L DTT储存液(

透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验2

用发光分析定量测定ATP实验步骤Sigma公司提供了 -种测定MP浓度的非常简单,灵敏&又方便的方法。其原理是用荧光素酶从荧光素和ATP中产生光。在荧光素/荣光素酶浓度恒定的情况下,可以绘制一条不同ATP浓度时产光量变化的标准曲线,因此可以很容易地对来自细胞裂解物的未知样品进行定量。然而,如果要测定

去垂体大鼠体重法测定比活性

本法系通过比较生长激素标准品(S )与供试品(T )对幼龄去垂体大鼠体重增加的程度,以测定供试品效价的一种方法。标准品溶液的制备 试验当日,取标准品,按标示效价用含牛血清白蛋白的0 .9% 氯化钠溶液,制成髙、低两种浓度的标准品溶液。一般高浓度标准品溶液配成每lm l含0. 1〜0. 2 IU ,低

去垂体大鼠胫骨法测定比活性

本法系通过比较生长激素标准品(S )与供试品(T )对去垂体大鼠胫骨骨骺板宽度增加的程度,以测定供试品效价的一种方法。标准品溶液和供试品溶液的制备同体重法。测定法 本法可与去垂体大鼠体重法同步进行。待体重法实验结束后,取下两腿胫骨,置10%甲醛溶液保存,从胫骨近心端顶部中间沿矢状面切开,置10% 甲

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

酶活性测定实验

实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.

氨基比林N脱甲基酶活性测定

氨基比林又名匹拉米洞, Pyramidon, Amidozon, Aminophenazon, Aminopyrine,由氨基安替比林经催化氢化(烃化)而得, 解热镇痛作用较强,缓慢而持久,消炎抗风湿作用与阿司匹林相似。本品因能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质,故单用制剂已淘汰。临床常用

新型污染吸附材料比活性炭更高效

   一个意大利研究团队开发出一种低成本材料,可比活性炭更有效地清除废水和空气中的污染物,而且制备过程也更环保。 相关研究成果发表在最新一期在线开放期刊《化学前沿》上。意大利布雷西亚大学埃尔扎·波恩特姆皮团队介绍,这种“绿色”吸附剂的合成原材料包括海藻酸钠和硅粉,前者可以从海藻中大量提取,后者是

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量

NK细胞活性测定实验

实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞,当靶细胞受到破坏时,放射性核素被释放出来,通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性,即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

水处理材料中为什么竹炭比活性炭便宜

活性炭与竹炭的区别     1:没有活化的竹炭不是活性炭;很多卖竹炭的称自己为活性炭,都是欺骗消费者!    2:竹炭碘吸附值350-600毫克/克,每克竹炭表面积300M2/克;活性炭碘吸附值是900毫克/克以上;每克活性炭表面积3000M2/克;没有活化的竹炭不是活性炭。    3:活性炭分为:

红细胞比积测定实验

实验材料血液试剂、试剂盒肝素仪器、耗材毛细用管比容管注射器实验步骤一、实验试剂与材料。1、抗凝剂:肝素或双草酸盐抗凝剂.2、Wintobe(文氏)比容管,此管内径3mm长约10mm,刻度以1mm间隔并10cm可盛血约1ml.3、5ml注射器.4、毛细用管(其毛细管部只约12cm)口径不大于2mm。二

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

污水处理活性污泥系统中如何控制回流比

污泥回流比是污泥回流量与曝气池进水量的比值。一般通过调节污泥回流比来控制污水水质水量的变化。调控活性污泥回流比,是活性污泥系统故障时的重要应急调控手段之一。活性污泥回流比1活性污泥回流比的定义活性污泥回流定义上的理解是流入二沉池的沉降活性污泥需要重新抽升到曝气池首端,与在曝气池首端入流的污水、废水进

污水处理活性污泥系统中如何控制回流比

污水处理活性污泥系统中如何控制回流比:污泥回流比是污泥回流量与曝气池进水量的比值。一般通过调节污泥回流比来控制污水水质水量的变化。调控活性污泥回流比,是活性污泥系统故障时的重要应急调控手段之一。活性污泥回流比1活性污泥回流比的定义活性污泥回流定义上的理解是流入二沉池的沉降活性污泥需要重新抽升到曝气池

发现植物乳杆菌比短乳杆菌有更高的抗菌活性

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/3/474898.shtm发酵蔬菜蕴含丰富的乳酸菌资源。陕西省微生物研究所薛文娇课题组从16份自然发酵蔬菜样品中分离得到74株产酸、杆状革兰氏阳性菌,其中26株在低pH和高胆盐条件下表现出较高的存活率。他们经对

发现植物乳杆菌比短乳杆菌有更高的抗菌活性

  发酵蔬菜蕴含丰富的乳酸菌资源。陕西省微生物研究所薛文娇课题组从16份自然发酵蔬菜样品中分离得到74株产酸、杆状革兰氏阳性菌,其中26株在低pH和高胆盐条件下表现出较高的存活率。他们经对其进行16S rRNA测序和系统发育树分析表明,15株为植物乳杆菌,9株为短乳杆菌,其余2株为绿色魏斯氏菌;又通

动力锂电池提高极片中活性物质占比相关介绍

  一般电芯正负极极片的组分包括活性物质,导电剂和粘结剂。导电剂和粘结剂比例降低,从而提到了活性物质的占比,提高了单体电池的能量。目前碳纳米管、碳纤维、石墨烯等导电剂的应用能够有效降低导电剂的比例,从传统的3%~4%的比例降低至0.5%~1%;而苏威、阿珂玛等粘结剂厂家都在开发粘结性能更好的新产品,

液体比汽化热测定实验

实验项目:1.用混合法测定液体在大气压强下的汽化热;2.测定水的汽化热;3.学会如何消除外界对实验的影响。实验仪器:液体汽化热测定仪 型号:FMD2050实验原理:物质由液态向气成转化过程称为汽化。液体的汽化有蒸发和沸腾两种不同的形式,蒸发是发生在液体表面的汽化过程,在任何温度下都能进行,而沸腾是液

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理:α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测

细胞活性检测DNA合成增殖实验

BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程

淀粉酶活性的测定实验

实验方法原理α-淀粉酶及β-淀粉酶,各有其一定的特性,如β-淀粉酶不耐热,在高温下易钝化而α-淀粉酶不耐酸,在pH3.6以下则发生钝化,通常提取液同时有两种淀粉酶存在,测定时,可根据它们的特性分别加以处理,钝化其中之一,即可测出另一酶的活性。将提取液加热到70℃维持15分钟以钝化β-淀粉酶,便可测定

MTT法细胞活性检测实验步骤

MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途: