透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性 实验步骤 1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■ 三-n -辛胺； U 1，2-三氯三氟乙烧；放射性物质（见附录5)2) 从标记细胞中吸出培养基，用PBS清洗两次。彻底吸去清洗液，将细胞放入冰盒......阅读全文
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■ 三-n -辛胺； U 1，2-三氯三氟乙烧；
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性 实验步骤
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP用发光分析定量测定ATP用高效液相层析定量测定ATP测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验4
测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤准备下列材料：含有未知浓度mp] ATP的细胞裂解物样品10mg/ml激酶底物肽渐夜（Calbiochem)0.5mraol/L cAMP 溶液 I、Calbiochem)cA-PrK (Calbiochem)cA-PrK分析缓冲液lmol/L DTT储存液（
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验2
用发光分析定量测定ATP实验步骤Sigma公司提供了 -种测定MP浓度的非常简单，灵敏&又方便的方法。其原理是用荧光素酶从荧光素和ATP中产生光。在荧光素/荣光素酶浓度恒定的情况下，可以绘制一条不同ATP浓度时产光量变化的标准曲线，因此可以很容易地对来自细胞裂解物的未知样品进行定量。然而，如果要测定
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验1
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料：本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺（v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心：高氣酸■
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验3
用高效液相层析定量测定ATP实验步骤1)准备下列材料：Whatman Partisphere SAX高效液相层析柱和保护柱线性梯度洗脱液设定在254nm的紫外线监测仪装配好的0.2;mi Whatman滤膜和滤器0.2^?过滤的Milli-Q水0.2/im S@_0,:5m〇l/LNH4H2ro4
透化细胞和退化细胞器蛋白质磷酸化—悬浮培养细胞透化
实验材料悬浮培养物试剂、试剂盒胞外缓冲液ATP 储存液实验步骤1. 约在实验开始前 1 小时，用 50 ml 灭菌试管以 1000 g 离心悬浮培养物 5 分钟，用 40 ml 左右胞外缓冲液清洗细胞两次。用预热至 37℃ 的胞外缓冲液重悬细胞至 107 细胞/ml。于 37℃ 轻轻摇动 15~30
透化细胞和退化细胞器蛋白质磷酸化—单层培养细胞透化
实验材料细胞培养物试剂、试剂盒HEPES仪器、耗材培养基实验步骤1. 约在实验开始前 1 小时，将细胞培养物换上含有预热（37℃）的 20 mmol/L HEPES（pH 7.2）的培养基，继续培养。让细胞在实验前与新培养基达成平衡。2. 将所需数量的有细胞的培养基放在一个丝网托盘上，放入 37℃
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验
试剂的制备单层培养细胞的透化悬浮培养细胞的透化用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化用分离的亚细胞组分进行激酶分析试剂、试剂盒胞外缓冲液 胞内缓冲液
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验
试剂的制备 单层培养细胞的透化 悬浮培养细胞的透化 用分离的亚细胞组分分析蛋白质的磷酸化 用分离的亚细胞组分进行激酶分析
透化细胞和退化细胞器中蛋白质的磷酸化实验—试剂制备
试剂、试剂盒胞外缓冲液胞内缓冲液透化缓冲液标准裂解缓冲液裂解缓冲液SDS-PAGE 加样缓冲液双向-PAGE 裂解緩冲液实验步骤这些试剂在后面许多地方要用到，应在进行下述实验前配好。1. 胞外缓冲液（pH 7.2，37℃）110 mmol/L NaCl10 mmol/L KCI1 mmol/L Mg
细胞活性测定
1. 4细胞活性测定原理：根据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan，并可被酶标仪检测，间接反应活细胞数量。对于细胞增殖、凋亡、生长受抑等可通过细胞数量间接得知的生物学改变，采用细胞活性测定可以提供可应用和参考的数据。应用：用于生物活性因子的活性检测、大规模药物筛选
去垂体大鼠体重法测定比活性
本法系通过比较生长激素标准品（S )与供试品（T )对幼龄去垂体大鼠体重增加的程度，以测定供试品效价的一种方法。标准品溶液的制备 试验当日，取标准品，按标示效价用含牛血清白蛋白的0 .9% 氯化钠溶液，制成髙、低两种浓度的标准品溶液。一般高浓度标准品溶液配成每lm l含0. 1〜0. 2 IU ,低
去垂体大鼠胫骨法测定比活性
本法系通过比较生长激素标准品（S )与供试品（T )对去垂体大鼠胫骨骨骺板宽度增加的程度，以测定供试品效价的一种方法。标准品溶液和供试品溶液的制备同体重法。测定法 本法可与去垂体大鼠体重法同步进行。待体重法实验结束后，取下两腿胫骨，置10%甲醛溶液保存，从胫骨近心端顶部中间沿矢状面切开，置10% 甲
细胞组分和细胞器——细胞器分离
Labeling Microtubules (Molecular Dynamics Inc. )Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and o
细胞活性检测化学发光细胞活性测定
ATP发光法ATP是细胞的能量直接来源，ATP发光法是通过检测细胞内ATP含量来分析细胞增殖。市面上的原理是利用外源的萤火虫荧光素（Luciferin）与荧光素酶（Luciferase），以细胞内含的ATP为能量来源，发生氧化反应产生生物冷光，因此可通过监测冷光光度，来对应ATP含量并判断细胞增殖状
红细胞比积测定
男：0.42～0.49L／L(42%～49%) ；女：0.37～0.43L／L(37%～43%)
NK细胞活性测定实验
实验方法原理 用放射性核素标记靶细胞，当靶细胞受到破坏时，放射性核素被释放出来，通过测定释放或残留在未被破坏细胞内的放射性核素放射活性，即可计算和推测杀伤细胞的细胞毒活性。常用的放射性核素有51Cr、3H-Dr、125I-UdR等。本实验采用51Cr释放法检测人NK细胞活性。实验材料 靶细胞试剂、试
血细胞分析仪测定和读片分析退化细胞增加
前言具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪的应用目前越来越广泛，其性能明显优于阻抗法的三分群血细胞分析仪，他在白细胞分类上具有明显优势，自动化程度较高，已有文献对其测定原理进行过详细的介绍[1，2]。但是目前再好的血细胞分析仪都有其特定的缺陷和不足，作者曾在发表过的文章中指出：“目前无论是五分类还是更多
血细胞分析仪测定和读片分析退化细胞增加
退形性变（degeneration）：胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀、核溶解等现象。胞质破裂后消失，只剩胞膜，则成裸核或篮状细胞（basket cell）。退形性变亦可见于衰老细胞，在正常情况下为数极少。一、 患者资料A：何×，男，74，临床诊断：脑梗死后遗症。B：汪××，男，79，
氨基比林N脱甲基酶活性测定
氨基比林又名匹拉米洞， Pyramidon, Amidozon, Aminophenazon, Aminopyrine，由氨基安替比林经催化氢化（烃化）而得， 解热镇痛作用较强，缓慢而持久，消炎抗风湿作用与阿司匹林相似。本品因能引起骨髓抑制以及能形成亚硝胺致癌物质，故单用制剂已淘汰。临床常用
细胞器介绍
细胞器是细胞中具有一定形态结构、组成和具有特定功能的微器官，细胞器包括质体、液泡、线粒体、内质网、核糖核蛋白体、微管、高尔基复合体、圆球体、溶酶体、微体等。质体分为白色体、叶绿体和有色体
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子，也称趋化因子，诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等，能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性，可采用琼脂糖和Boyden盲端微
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子，也称趋化因子，诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等，能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性，可采用琼脂糖和Boyden盲端微
血细胞分析仪测定和读片分析退化细胞增加(3)
五 血细胞涂片相关的复检规则a按照血细胞涂片复检规则中相关条款，其测定数据中部分内容符合第18条：淋巴细胞绝对计数值（Lymph#）：（1）复检条件，首次结果>5.0×109/L（成人）或>7.0×109/L（
血细胞分析仪测定和读片分析退化细胞增加(2)
病例1：退化细胞增加退形性变（degeneration）：胞体肿大、结构模糊、边缘不清晰、核固缩、核肿胀、核溶解等现象。胞质破裂后消失，只剩胞膜，则成裸核或篮状细胞（basket cell）。退形性变亦可见于衰老细胞，在正常情况下为数极少。一 患者资料：A：何×，男，74，临床诊断：脑梗死后遗症。
红细胞比积测定(－PCV)
红细胞比积测定( PCV)原理及临床意义:原理： 将注入抗凝剂的血在一定条件下离心沉降，用压积容量管测出红细胞在全血中所占的体积的百分比，即为红细胞比积。参考范围： 成人男性为40～50％，女性为37～48％。临床意义： 红细胞比积的多少与红细胞的数量、大小和血浆量的多少有关，故贫血、红细胞增
红细胞比积测定(－PCV)
原理： 将注入抗凝剂的血在一定条件下离心沉降，用压积容量管测出红细胞在全血中所占的体积的百分比，即为红细胞比积。参考范围： 成人男性为40～50％，女性为37～48％。临床意义： 红细胞比积的多少与红细胞的数量、大小和血浆量的多少有关，故贫血、红细胞增多症、各种原因所致的血液浓缩或血液稀释均可
红细胞比积测定实验
实验材料血液试剂、试剂盒肝素仪器、耗材毛细用管比容管注射器实验步骤一、实验试剂与材料。1、抗凝剂：肝素或双草酸盐抗凝剂．2、Wintobe（文氏）比容管，此管内径3mm长约10mm，刻度以1mm间隔并10cm可盛血约1ml．3、5ml注射器．4、毛细用管（其毛细管部只约12cm）口径不大于2mm。二