肝亚细胞部分的制备

肝是代谢药物的主要场所,而在代谢药物中起关键作用的酶是位于线粒体的细胞色素P-450系统.常称药酶或混合功能氧化酶,或单加氧酶。一般说来,许多药物经肝药酶代谢后生成低毒或无毒分子随尿和胆汁排出,但亦有一些药物及其他化合物经肝药酶代谢激活成毒性更大的中间产物,引起毒性。因此,肝药酶代谢药物的分子机制及与毒理学的关系,是药理学基础理论研究的重要内容之一。 ......阅读全文

肝亚细胞部分的制备

肝是代谢药物的主要场所,而在代谢药物中起关键作用的酶是位于线粒体的细胞色素P-450系统.常称药酶或混合功能氧化酶,或单加氧酶。一般说来,许多药物经肝药酶代谢后生成低毒或无毒分子随尿和胆汁排出,但亦有一些药物及其他化合物经肝药酶代谢激活成毒性更大的中间产物,引起毒性。因此,肝药酶代谢药物的分子机制及

肝亚细胞部分的制备

离心法钙沉淀法实验材料肝线粒体                                                          试剂、试剂盒蔗糖                                                                  氯化钾

肝亚细胞部分的制备——离心法

实验材料肝线粒体试剂、试剂盒蔗糖氯化钾生理盐水仪器、耗材离心机离心管移液枪枪头肝是代谢药物的主要场所,而在代谢药物中起关键作用的酶是位于线粒体的细胞色素P-450系统.常称药酶或混合功能氧化酶,或单加氧酶。一般说来,许多药物经肝药酶代谢后生成低毒或无毒分子随尿和胆汁排出,但亦有一些药物及其他化合物经

肝亚细胞部分的制备——钙沉淀法

实验材料肝线粒体试剂、试剂盒氯化钙氯化钾Tris液蒸馏水仪器、耗材离心机离心管试管移液枪枪头枪头盒制冰机冰盒漩涡振荡仪搅拌棒肝是代谢药物的主要场所,而在代谢药物中起关键作用的酶是位于线粒体的细胞色素P-450系统.常称药酶或混合功能氧化酶,或单加氧酶。一般说来,许多药物经肝药酶代谢后生成低毒或无毒分

细胞和亚细胞提取物的制备实验

实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是勻浆。在本方案中,讨论了使用机械力匀浆组织:在 Potter-Elvehjem

细胞和亚细胞提取物的制备实验

从组织和细胞中提取蛋白可能是蛋白质组研究中最关键的一步,因为这一步影响了蛋白的产率、生物活性和特定目的蛋白结构的完整性。因此,我们要注意蛋白提取条件的选择。主要目标是在破坏力最小、保持蛋白结构完整性的前提下,可重复地使细胞最大程度地裂解。方案1 哺乳动物组织的匀浆实验实验方法原理对于细胞内蛋白的纯化

细胞和亚细胞提取物的制备实验

方案1 哺乳动物组织的匀浆实验 方案2 用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验 方案3 用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验 方案4 氮舱减压法裂解培养细胞实验 方案5 细菌中重组蛋白的小量提取实验 方案6 细菌中重组蛋白的

细胞和亚细胞提取物的制备实验8

方案8 酵母提取物的制备实验实验方法原理由于酵母的经典遗传分析和分子遗传分析都已经研究得非常透彻,因而对于纯化重组动物蛋白来说,酵母是一个很有吸引力的表达体系。关于培养和收集酵母细胞的讨论,尤其是芽殖酵母,参见 Jazwinski(1990)。酵母细胞的裂解方法有很多种,包括自溶、压力破碎(如 Fr

细胞和亚细胞提取物的制备实验7

方案7 从包含体中溶解大肠杆菌重组蛋白实验实验方法原理由于分子克隆技术能够使细菌高水平表达蛋白,因此原核表达是一个非常便利的获得重组蛋白的系统。遗憾的是这些蛋白在细菌中易于聚合和沉淀,形成难溶解的包含体,因而很难纯化。非细菌蛋白的包含体尤其普遍。虽然没有一种可用于所有蛋白的普适方法,还是有许多策略适

细胞和亚细胞提取物的制备实验5

方案5 细菌中重组蛋白的小量提取实验实验方法原理利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。为了检测诱导和重组蛋白的表达水平,评估方法的快速简单是很重要的。本方案使用 0.5% TritonX-1OO 裂解细胞,小量制备细菌提取物。实验材料表达目标重组蛋白的细菌细胞试剂、试剂盒二硫苏糖醇(DTT)样

细胞和亚细胞提取物的制备实验4

方案4 氮舱减压法裂解培养细胞实验实验方法原理通过来自增压舱中的氮气减压膨胀来破碎细胞是一种快速、有效的细胞和组织的匀浆方法,能释放完整的细胞器和制备细胞膜(Hunter and Commerford,1961)。该方法的原理很简单:细胞放在一个压力舱中,在高压下(约5500kPa,相当于800ps

细胞和亚细胞提取物的制备实验6

方案6 细菌中重组蛋白的大量提取实验实验方法原理利用细菌获得用于纯化的重组蛋白是非常方便的。适用于细菌细胞蛋白提取的方法包括超声波处理、玻璃珠研磨、钒土或石英砂研磨、French 加压罐高压剪切细胞和溶’菌酶处理。这些方法适用于从各种革兰阴性菌和革兰阳性菌中制备蛋白提取物。通常是使用酶的方法破坏细胞

细胞和亚细胞提取物的制备实验2

方案2 用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验实验方法原理培养的动物细胞一般使用温和去垢剂来裂解。如果低浓度的去垢剂就能引起细胞的充分裂解(如 l%NP-40 或 l%Triton X-100),那么这对目标蛋白的影响可能比方案 1 中所讨论的匀浆方法更温和。去垢剂的选择必须根据免疫沉淀所用的抗体的识别表

细胞和亚细胞提取物的制备实验3

方案3 用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验实验方法原理去垢剂裂解细胞法通常用于培养的动物细胞。典型的离子型去垢剂SDS(如2%SDS)能充分地裂解细胞。培养的动物细胞和细菌,如可以使用这种方式裂解。假如实验所用的抗体识别的抗原决定簇取决于自然空间构象,并对还原环境敏感,那么在裂解缓冲液

细胞和亚细胞提取物的制备实验9

实验方法原理差异去垢剂分离法(differential detergent fractionation, DDF) 包括使用一系列含不同去垢剂的 PIPES 缓冲液对细胞进行连续抽提,首先是毛地黄皂苷,其次是 Triton, 最后是 Tween/脱氧胆酸盐。这些步骤产生 4 种在生化和电泳上相异的组

澳大利亚部分超市限购奶粉

  部分悉尼超市一次只能买两罐奶粉   澳大利亚将推奶粉“限出令”?澳大利亚驻穗官员否认,记者了解到   新快报记者 陆琨倩 见习记者 朱玲   从12月1日起,澳大利亚也将禁止私人代购奶粉?新西兰刚刚出台针对婴幼儿配方奶粉出口限制令,澳大利亚又传来限制出口的

简述亚甲基蓝的制备方法

  1、由N,N-二甲基苯胺进行亚硝化,经还原生成对氨基二甲基苯胺,再用重铬酸钠、硫代硫酸钠进行氧化、硫化及缩合,然后用氯化锌成盐、盐析、过滤及干燥即得成品。  2、在工业次甲基蓝(碱性湖蓝BB)10kg中加入100kg纯水,边搅拌边通蒸汽加热至80~90℃,使之溶解。然后用30min时间缓慢加入2

兔肝RNA的制备及测定

实验原理: 细胞内大部份RNA均与蛋白质结合在一起,并且多以核蛋白的形式存在。因此,分离制备RNA  时,首先遇到的是必须使RNA与蛋白解离,并除去蛋白质。由于RNA的种类来源和存在形式不同,所用的制备方法各异,一般常用的方法有,盐酸胍法,去污剂法和苯酚法。其中,以苯酚法使用较为广泛。产品纯度高,适

澳大利亚修订部分食品的监测方法

   据澳大利亚农业水利资源部(DAWR)消息,3月26日澳大利亚农业水利资源部发布IFN 01-18 通告,修订部分食品的监测方法。自2018年4月24日起生效。  这些食品以及监测方法如下:  鲜肉、冻肉-抗菌筛查  部分加工果蔬-大肠杆菌和沙门氏菌  大麻籽及其产品-四氢大麻酚、大麻二酚含量 

细胞亚株的概念

中文名称细胞亚株英文名称cell substrain定  义由原细胞株再次克隆形成的与原株性状有部分不同的细胞群。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

亚细胞的成分介绍

细胞是生物体的构造和生理的基本单位,却不能因此认为所有的生物细胞都相同,即使在同一个个体内,也有因为分化而产生各式各样外观与功能不同的细胞,即使相同种类的细胞,也可能正在执行的生理工作也有差异,但是基本上彼此都有共同的基本构造。细胞膜细胞膜为细胞与环境之间以及细胞器与细胞质之间的分界,能够调节物质的

小鼠肝基因组DNA制备

原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中,制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。

小鼠肝基因组DNA制备

原理DNA 以核蛋白形式存在于细胞核中,制备 DNA 的原则是既要将 DNA 与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持 DNA 分子的完整。蛋白酶K 及链霉蛋白酶 E 的应用使这两个原则得到了保证。蛋白酶K 或链霉蛋白酶 E 均为广谱蛋白酶,其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。

肝星状细胞的简介

  肝星状细胞是ECM的主要来源, HSC激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC),各种致纤维化因素均把HSC作为最终靶细胞。肝星状细胞激活并转化为肌成纤维细胞样细胞(MFC),各种致纤维化因素均把HSC作为最终靶细胞,正常情况下肝星状细胞处于静止状态。当肝脏受到炎症或机械刺激等损伤时,肝星状细胞被

关亚风:样品制备面临的挑战和机遇

  分析测试百科网讯 2019年8月31日,在第四届全国样品制备学术报告会上,中国科学院大连化学物理研究所研究员关亚风带来了题为《样品制备面临的挑战和机遇》的报告。中国科学院大连化学物理研究所研究员 关亚风  关亚风表示样品制备广泛应用于众多领域,包括环境、食品安全、医疗生命、海洋和深空等。样品制备

简述亚硝基铁氰化钠的制备方法

  由三水合亚铁氰化钾与亚硝酸钠和硫酸反应后,再分别加硫酸铜和碳酸氢钠而得。  硝普盐是化学中已知已久的化合物,它是硝酸与 [Fe(CN)6] 或 [Fe(CN)6] 发生反应时的产物。  Fe(Ⅱ)盐与氰化钾和亚硝酸钠反应也可以得到硝普盐。

亚细胞结构分离的技术

分离亚细胞组分的第一步是制备组织匀浆或细胞匀浆。匀浆(Homogenization)是在低温条件下,将组织或细胞放在匀浆器中加入等渗匀浆介质(即0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液)研磨,使细胞被机械地研碎成为各种亚细胞组分和包含物的混合物。分离亚细胞组分的第一步是分级分离。它通过

视杆细胞与视锥细胞的功能部分

目前已知的哺乳动物的感光细胞有视杆细胞,视锥细胞与内在光敏视网膜神经节细胞(ipRGCs)。视杆细胞主要促成夜间视力(暗视条件),视锥细胞则主导白天视力(明视条件),但两者光转导的生化反应与路径是相似的。在1990年代发现了第三类哺乳动物感光细胞:内在光敏视网膜神经节细胞。这些细胞被认为不直接有助于

TIL细胞的制备

实验概要本实验从肿瘤组织中分离制备了TIL细胞。主要试剂1. RPMI-16402.Ⅰ、Ⅳ型胶原酶、DNA酶3. 0.001%的透明质酸酶和DNA酶4. IL-2主要设备80目和200目不锈钢网实验材料肿瘤组织实验步骤1. 无菌切取肿瘤组织或肿瘤浸润的局部淋巴结,置于含抗生素的RPMI-1640培养

脱落细胞单细胞悬液的制备——胸、腹水脱落细胞的制备

实验方法原理在临床工作中,可以收集到大量自然脱落细胞,这些细胞标本经过简单处理,便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料胸、腹水试剂、试剂盒肝素液PBS仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 抽取胸、腹水 50~100 ml,加入 1000 U/m