氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定

试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液:Tris-HCl,0.1mol/L,pH8.02. Tris/三硝基甲苯(Triton):Tris-HCl,0.1mol/L,pH8.0,0.1%TritonX-100,4℃ 储存3. CAT 稀释缓冲液:Tris-HCl,0.1mol/L,pH8.0,50% 甘油,0.2%BSA4. 底物:含 250 mmol/L 氯霉素(GIBCO)的 100% 甲醇;分装,-70℃ 储存5. 14C-CoA:14C-丁酸辅酶 A(10μCi/mL;AmershamPharmacia)6. CAT 酶标准物:制备含 0.2、1.0、2.0、4.0、10U/mL 标准液的 CA......阅读全文

粒子轰击细胞法的定义和应用

在1987年,Vlein首先报道了应用此技术将TMV(烟草花叶病毒)RNA吸附到钨粒表面,轰击洋葱表皮细胞,经检测发现病毒RNA能进行复制,并以同样技术将CAT(Chloraphericol acetyltransferase氯霉素乙酰转移酶基因)基因导入洋葱表皮细胞。该技术已在烟草、水稻、小麦、黑

细菌耐药性产生灭活酶的相关介绍

  细菌产生灭活的抗菌药物酶使抗菌药物失活是耐药性产生的最重要机制之一,使抗菌药物作用于细菌之前即被酶破坏而失去抗菌作用。这些灭活酶可由质粒和染色体基因表达。β-内酰胺酶:由染色体或质粒介导。对β-内酰胺类抗生素耐药,使β-内酰胺环裂解而使该抗生素丧失抗菌作用。β-内酰胺酶的类型随着新抗生素在临床的

标记基因的分类

选择基因和报告基因都可以看做是标记基因,都起着标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依赖外界筛选压力(如抗生素、除草剂)等缺陷。而报告

琥珀氯霉素的含量测定方法

含量测定照紫外可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品适量,精密称定,按琥珀氯霉素每10mg加乙醇1ml使溶解,再用水定量稀释制成每1ml中约含20g的溶液测定法取供试品溶液,在276nm的波长处测定吸光度,按C1H12Cl2N2O5的吸收系数(E)为298计算供试品中C1H12Cl2N2

氯霉素片的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于氯霉素50mg),加甲醇适量(每10mg氯霉素加甲醇1ml)使氯霉素溶解,再用流动相定量稀释制成每1m中含氯霉素0.1mg的溶液,滤过,取续滤液。对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用

棕榈氯霉素的含量测定方法

含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含25g的溶液测定法取供试品溶液,在271nm的波长处测定吸光度,按C27H42Cl2N2O6的吸收系数(E1)为178计算,再乘以0.5754,即得相当于氯霉素的量。

乳制品中氯霉素的测定

方案优势       对比《GB 29688-2013 食品安全国家标准 牛奶中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》,本方案具有如下优势:    1)    不需要乙酸乙酯完成氯霉素提取(牛奶和乙酸乙酯会出现乳化现象),改用乙腈作为提取溶剂;    2)    采用ProE

氯霉素滴眼液的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定供试品溶液精密量取本品适量,用流动相A流动相B(68:32)定量稀释制成每1m中约含氯霉素0.1mg的溶液,摇匀。对照品溶液取氯霉素对照品适量,精密称定,加流动相A-流动相B(68:32)溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液,摇匀系统适用性溶液

关于氯霉素的含量测定介绍

  1、含量测定  照高效液相色谱法(2010年版药典二部附录ⅤD)测定。  2、色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液(取磷酸二氢钾6.8g,用0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000mL,再加三乙胺5mL,混匀,用磷酸调节p

关于氯霉素的鉴别测定介绍

  1、取氯霉素10mg,加稀乙醇1mL溶解后,加1%氯化钙溶液3mL与锌粉50mg,置水浴上加热10分钟,倾取上清液,加苯甲酰氯约0.1mL,立即强力振摇1分钟,加三氯化铁试液0.5mL与三氯甲烷2mL,振摇,水层显紫红色。如按同一方法,但不加锌粉试验,应不显色。  2、在含量测定项下记录的色谱图

关于标记基因的分类介绍

  引入“选择基因”和“报告基因”的概念  选择基因和报告基因都可以看做是标记基因,都起着标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。  选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依

简述标记基因的不同分类

  引入“选择基因”和“报告基因”的概念  选择基因和报告基因都可以看做是标记基因,都起着标记目的基因是否成功转化的作用,但是它们又有着各自的特点。  选择基因(又称选择标记基因),主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因,这种基因在执行其选择功能时,通常存在检测慢(蛋白酶作用需要时间)、依

氯霉素眼膏的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品约2g,精密称定,置分液漏斗中,加石油醚30ml,振摇,使基质溶解,加磷酸盐缓冲液(pH6.0)提取3次,每次20ml,合并提取液,置100ml量瓶中,加磷酸盐缓冲液(pH6.0)稀释至刻度,摇匀,精密量取适量,用流动相定量稀释制成每1m

红细胞内CAT的作用

  红细胞内CAT是溶解状态,具有重要的生理功能。红细胞内的CAT和谷胱甘肽过氧化物酶具有共同保护血红蛋白和其它巯基酶、膜蛋白和解毒作用。CAT是血红蛋白和其它含巯基蛋白质的保护剂。

谷胱甘肽S转移酶活性测定

比色法 实验材料 肝微粒体蛋白 试剂、试剂盒 二硝基氯苯 乙醇

谷胱甘肽S转移酶活性测定

谷胱甘肽S-转移酶是指催化具有亲电取代基的外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽(GSH)反应的酶。 可催化多种反应包括烃基、芳基、芳烃基、烯基和氧基的转移反应。 谷胱甘肽S-转移酶是谷胱甘肽结合反应的关键酶,催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤,主要存在于胞液中。谷胱甘肽S-转移酶有多种形式,根据作用底物 不

谷胱甘肽S转移酶活性测定

谷胱甘肽S-转移酶是指催化具有亲电取代基的外源性化合物与内源的还原谷胱甘肽(GSH)反应的酶。 可催化多种反应包括烃基、芳基、芳烃基、烯基和氧基的转移反应。谷胱甘肽S-转移酶是谷胱甘肽结合反应的关键酶,催化谷胱甘肽结合反应的起始步骤,主要存在于胞液中。谷胱甘肽S-转移酶有多种形式,根据作用底物 不同

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的相抽提分析法

实验材料转染细胞试剂、试剂盒氯霉素Tris·ClTMPD二甲苯仪器、耗材离心机离心管培养箱实验步骤一、来源于哺乳动物细胞1.  按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法,制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞,则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2至4代替。 2

棕榈氯霉素(B型)片的含量测定

含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量(约相当于棕榈氯霉素50mg),置200ml量瓶中,加无水乙醇适量,振摇使溶解,再用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液适量,用无水乙醇定量稀释制成每1ml中约含棕榈氯霉素25μg的溶液。

氯霉素滴耳液的含量测定方法

含量测定照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液精密量取本品适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含氯霉素0.1mg的溶液对照品溶液、系统适用性溶液、色谱条件、系统适用性要求与测定法见氯霉素含量测定项下。

棕榈氯霉素混悬液的含量测定

含量测定照紫外可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液精密量取本品3ml(约相当于棕榈氯霉素0.13g),置125ml分液漏斗中,用三氯甲烷提取5次,第次25ml,后四次各用20ml,合并三氯甲烷液,蒸干,提取物用无水乙醇洗入250ml量瓶中,并稀释至刻度,摇匀;精密量取10ml,置200ml

三乙酰基苯MSDS

1,3,5-三乙酰苯修改号码:5模块1. 化学品产品名称:1,3,5-Triacetylbenzene修改号码:5模块2. 危险性概述GHS分类 物理性危害未分类 健康危害未分类 环境危害未分类GHS标签元素 图标或危害标志无 信号词无信号词 危险描述无 防范说明无模块3. 成分/组成信息单一物质/

转乙酰基作用的概念

中文名称转乙酰基作用英文名称transacetylation定  义将乙酰辅酶A上的乙酰基转移到一些接受体上,而生成相应乙酰化合物的反应过程。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),新陈代谢(二级学科)

小鼠(CAT)ELISA试剂盒操作说明

ELISA试剂盒检测样本齐全:(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒科研专用

组织细胞内CAT的作用

定位于细胞器的CAT与产生H2O2的需氧脱氢酶类(氨基酸氧化酶等)同时存在,能有效调节体内H2O2水平,及时地消除H2O2的有害影响。过氧化氢酶是在生物演化过程中正常细胞内清除氧自由基,生物防御系统的关键酶之一,其生物学功能是催化细胞内过氧化氢分解,防止过氧化,帮助减缓细胞衰老。保护细胞免受氧自由基

血清氨基转移酶测定原理

  丙氨酸氨基转移酶主要分布在肝脏,其次是骨骼肌、肾脏、心肌等组织中。大门冬氨基转移酶E要分布在心肌,其次是肝脏、骨骼肌、肾脏等组织中。在肝细胞内,ALT主要存在于非线粒体中。而AST大部分存在于线粒体中。ALT与AST均为肝细胞内的功能酶。  肝细胞受损后,由于肝细胞膜通透性增加,ALT与AST释

血清丙氨酸转移酶(ALT)测定实验

实验方法原理经30min反应后, 加入2、4-二硝基苯肼终止反应,并与反应液中的二种a-酮酸生成相应的2、4 二硝基苯腙、在碱性条件,两种苯腙的吸收光谱曲线有差别,在500-520nm处差异最大, 以等摩尔浓度计算,丙酮酸苯腙的显色温度约为a-酮戊二酸苯腙的3倍. 据此计算出丙酮酸的生成量.实验步骤

血清丙氨酸转移酶(ALT)测定实验

实验方法原理经30min反应后, 加入2、4-二硝基苯肼终止反应,并与反应液中的二种a-酮酸生成相应的2、4 二硝基苯腙、在碱性条件,两种苯腙的吸收光谱曲线有差别,在500-520nm处差异最大, 以等摩尔浓度计算,丙酮酸苯腙的显色温度约为a-酮戊二酸苯腙的3倍. 据此计算出丙酮酸的生成

报告基因检测概述

报告基因检测是功能基因组学研究的一个重要手段,在真核基因表达调控研究和相关药物或蛋白筛选工作中,有广泛的应用。报告基因检测系统,是把顺式调控元件(即DNA非编码序列)与某一种非常容易被鉴定的蛋白(即报告基因产物)的编码序列连接起来,通过测定该报告基因在细胞内的表达产物的量或活性,来判断顺式调控元件的