光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验
实验方法原理 吉姆萨染液由天青,伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。1)嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结果,染粉红色,称为嗜酸性物质;2)细胞核蛋白和淋巴细胞 胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质;3)中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。PH对细胞染色有影响。细胞各种成分均分布蛋白质,由于蛋白质系两性电解质,所带电荷随溶液PH而定,在偏酸性环境中下在电荷增多,易与伊红结合,染色偏红;在偏碱性环境中负电荷增多,易与美蓝或天青结合,染色 偏蓝。因此细胞染色对氢离子浓度十分敏感,染色用玻片必须清洁,无酸碱污染。配制必须用优质甲醇,稀释染色必须用缓冲液,冲洗用水应近中性,否则可导致各种细胞染色反应异常,以致识别困难,甚至造成错误。 用途:适合大多数细胞组织的染色,包括血涂片、各种组织石蜡切片、冰冻切片、以及各种培养细胞。染色体显带、多种微生物的鉴别染色和细胞......阅读全文
肿瘤细胞原代培养实验
组织块法 酶消化法 脱落细胞法 实验方法原理 肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血
细胞死亡的形态学评价实验
光学及荧光显微术 实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒
肝细胞癌形态学观察实验
实验材料大体标本组织切片实验步骤1. 大体标本(1)巨块型;肝脏显著肿大,切面见有一巨大肿块(多数在右叶)直径大于10cm,肿块灰白色,中央部有出血(红色)及坏死(灰黄色)。周围肝组织受压萎缩,但无明确包膜存在。巨块周围常可见多个小癌结节(肝内转移)。其余肝组织有肝硬化改变。(2)结节型:肝脏显著肿
肝细胞癌形态学观察实验
实验材料 大体标本组织切片实验步骤 1. 大体标本(1)巨块型;肝脏显著肿大,切面见有一巨大肿块(多数在右叶)直径大于10cm,肿块灰白色,中央部有出血(红色)及坏死(灰黄色)。周围肝组织受压萎缩,但无明确包膜存在。巨块周围常可见多个小癌结节(肝内转移)。其余肝组织有肝硬化改变。(2)结节型:肝脏显
细胞凋亡的形态:生化性质实验
使用活体荧光染料的显微镜定量凋亡指数和细胞活力(台盼蓝染色) 吖啶橙染色 吖啶橙或溴化乙锭染色 实验方法原理
动物细胞的基本形态观察实验
实验方法原理细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形;具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起;游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。实验材料蟾蜍人血试剂、试剂盒甲苯胺兰甲
细胞死亡的形态学评价实验
光学及荧光显微术 实验材料 细胞悬液 试剂、试剂盒
细胞凋亡的形态:生化性质实验
实验方法原理 实验材料 细胞试剂、试剂盒 染料混合物:0.01%台盼蓝l00μg ml吖啶橙或 100μg ml吖啶橙+100 μg ml溴化乙锭所有试剂都在PBS中制备约5×105〜5×106细胞 ml的细胞悬浮液在完全的RMPI 1640培养基仪器、耗材 12 mm×75 mm的玻璃试管显微镜载
免疫相关的细胞形态的观察实验
实验材料细胞涂片试剂、试剂盒瑞特氏染色甲醇仪器、耗材显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤一、血涂片的观察1. 红细胞:淡红色,无核的圆形细胞,因红血球为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7~8微米。2. 颗粒白血球(1)嗜中性颗粒白血球:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1~5叶,核
培养细胞的形态观察和计数实验
实验方法原理 体外培养的细胞主要有两种状态。一种是能贴附在培养支持物上的细胞,如HeLa 细胞、NIH3T3 等,叫贴壁型细胞,体外培养的细胞大多属于这种细胞。另一种细胞并不贴附在容器的壁上,而是悬浮在培养液中生长,如HL60 细胞,叫做悬浮型细胞,这类细胞主要是血液原性或癌原性细胞。在细胞
动物细胞的基本形态观察实验
实验方法原理 细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形;具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起;游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。实验材料 蟾蜍人血试剂、试剂盒 甲苯
免疫相关的细胞形态的观察实验
实验材料 细胞涂片试剂、试剂盒 瑞特氏染色甲醇仪器、耗材 显微镜玻片盖玻片滴管实验步骤 一、血涂片的观察1. 红细胞:淡红色,无核的圆形细胞,因红血球为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7~8微米。2. 颗粒白血球(1)嗜中性颗粒白血球:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1~
细胞技术专题:肿瘤细胞原代培养实验
肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。详细 实验方法实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清
肿瘤细胞原代培养实验——脱落细胞法
实验方法原理脱落细胞法是指采集人体各部位,特别是管腔器官表面的脱落细胞进行培养。实验材料肿瘤组织试剂、试剂盒完全培养基洗涤液仪器、耗材刀片培养箱培养皿实验步骤一、将新鲜的肿瘤组织去除脂肪和结缔组织。二、洗液洗2次后,用刀片将肿瘤组织切成细薄片。三、在切割的同时有许多上皮细胞脱落下来,脱落细胞经洗涤后
肿瘤细胞诱导血管生成模型实验
细胞培养技术 实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。
肿瘤细胞侵袭实验(Tumour-Invasion-Assay)
实验方法原理 Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。 滤膜孔径一般为8um,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,
肿瘤细胞诱导血管生成模型实验
实验方法原理 无论原发性肿瘤还是继发性肿瘤,一旦生长直径超过1~2 mm,都会有血管生成。这是由于肿瘤细胞自身可分泌多种生长因子,诱导血管生成。 实验材料
原代肿瘤细胞选择性培养:汇合饲养层肿瘤细胞筛选实验
实验方法原理在指数生长中期,用丝裂霉素C处理饲养层细胞,将细胞培养形成汇合的单层。通过胶原蛋白酶消化从活检标本分离肿瘤细胞,或者用胰蛋白酶消化从原代培养物获得肿瘤细胞,然后将肿瘤细胞接种到汇合的单层上(图24.1)。上皮性肿瘤细胞可以在3周至3个月内形成克隆。纤维肉瘤和神经胶质瘤并不总是形成克隆,而
恶性肿瘤细胞的主要形态特征有哪几种?
(1)细胞核的改变:①核增大:胞核显著增大,为同类正常细胞1~4倍,有时可达10倍以上。②核畸形:各种畸形,如结节状、分叶状、长形、三角形、不规则形,可有凹陷、折叠。某些腺癌细胞畸形不明显。③核深染:由于癌细胞DNA大量增加,染色质明显增多、增粗,染色加深,呈蓝紫色似墨滴状。腺癌深染程度不及鳞癌
恶性肿瘤细胞的主要形态特征有哪几种?
(1)细胞核的改变:①核增大:胞核显著增大,为同类正常细胞1~4倍,有时可达10倍以上。②核畸形:各种畸形,如结节状、分叶状、长形、三角形、不规则形,可有凹陷、折叠。某些腺癌细胞畸形不明显。③核深染:由于癌细胞DNA大量增加,染色质明显增多、增粗,染色加深,呈蓝紫色似墨滴状。腺癌深染程度不及鳞癌明显
细胞形态的观察实验——丽藻细胞内胞质环流
实验方法原理丽藻细胞大,整个细胞的中央为大液泡占据。靠近液泡是一层溶胶样流动的内质,在内质与质膜之间,为静止的外质,其中含有叶绿体。内质中含有许多颗粒,可以清楚地看到胞质环流。在丽藻细胞中的微丝与胞质环流有密切关系。成束的微丝出现在外质与内质接口(溶胶和凝胶接口)并交织一起,与环流方向平行。用细胞松
细胞凋亡检测实验——细胞凋亡的形态学检测
实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。仪器、耗材光学显微镜倒置显微镜荧光显微镜共聚焦激光扫描显微镜透射电子显微镜实验步骤一、光学显微镜和倒置显微镜1. 未染色细胞凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞
培养细胞形态和培养细胞形态分析
培养细胞形态 体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。 1、成纤维型细胞 在培养中的细胞
细胞凋亡检测实验——形态学检测法
细胞凋亡检测可应用于:(1)肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究;(2)临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗;(3)对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。实验方法原理根据凋亡细胞固有的形态特征,使用合适的显微镜检测凋亡细胞形态变化。
细胞分裂的形态观察实验——有丝分裂
实验方法原理细胞有丝分裂(Mitosis)的现象是分别由弗勒明(Flemming,1882)在动物细胞和施特拉斯布格(Strasburger,1880)在植物细胞中发现。有丝分裂过程包括一系列复杂的核变化,染包体和纺锤体的出现,以及它们平均分配到每个子细胞的过程。 实验材料马蛔虫洋葱试剂、试剂盒Ca
肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验
肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验可用于:(1)细胞分化的基础研究;(2)临床肿瘤治疗的疗效检验等方面。实验方法原理在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。HL-60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病细胞,在体外无需加刺激
藻酸盐包裹小鼠肿瘤细胞实验
实验概要本实验介绍了藻酸盐包裹小鼠肿瘤细胞实验操作流程。主要试剂藻酸钠,CaCl2,FITC标记的葡聚糖(FITC-Dextran)主要设备移液器,磁力搅拌器,超净台,解剖台,注射器,荧光酶标仪,离心机实验材料小鼠肿瘤细胞,免疫小鼠实验步骤1. 将藻酸钠溶于无菌生理盐水,终浓度为 1.5%;2. 收
肿瘤细胞侵袭实验——Matrigel-基质膜模型
肿瘤细胞侵袭实验(Tumour Invasion Assay)可应用于:(1)研究各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响;(2)一些抑制血管生成的新药研究;(3)研究肿瘤细胞侵袭和转移机制。实验方法原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸
肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验
肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验 实验方法原理 在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则
肿瘤细胞的软琼脂集落培养实验
在体外培养基中由一个祖先细胞增殖形成的细胞团,称之为集落。肿瘤细胞能无限繁殖,所以具有这种能力,而成熟分化的细胞则不能形成集落。实验方法基本方案 实验方法原理 HL-60细胞是一种急性早幼粒细胞白血病细胞,在体外无需加刺激因子,可在软琼脂培养基中形成集落。二甲基亚砜是一种细胞分化诱导剂,经二甲基亚砜