体外培养细胞的染色体标本制备实验
实验材料 细胞实验步骤 1． 体外培养的细胞，在倒置镜下观察到有较多的分裂细胞（传代后24h，圆形发亮的细胞）时，加入秋水仙素溶液，终浓度为0.3μg/ml培养液； 2． 继续培养3h； 3． 胰酶消化收集细胞至离心管； 4． 离心1000转/min，离心10min，去上清； 5． Hanks液洗，离心，去上清； 6． 低渗处理：加入0.075mol/L KCl溶液8ml，置37℃恒温水浴中30min，用吸管稍吹打（同上）； 7． 固定及制片如外周血染色体的制备。 注意事项 1． 秋水仙素处理时间过长，分裂细胞多，染色体短小；反之，则少而细长,故秋水仙素的浓度及时间要准确掌握。 2． 固定液应在使用前临时配制。 3． 载玻片一定要洁净，否则染色体分散不好。 4． 染色体分裂指数低：患者处于非常时期（放......阅读全文
培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法
实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；2. 加
体外培养细胞的形态特征
体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细
成骨细胞的体外培养
成骨细胞的来源主要有骨、骨膜、骨髓及骨外组织。及人的胚胎颅骨或新生动物的颅骨为成骨细胞的常用来源。Robey(1985)采用胶原酶处理松质骨骨块以除去结缔组织和骨髓造血组织，再将处理过的骨块进行培养来获得更纯净的成骨细胞。将人胚胎颅骨中所获得的成纤维样细胞通过加入β-甘油磷酸钠诱导分化后培养3周
体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验_细胞培养技术
实验方法原理体外抗药肿瘤细胞模型的建立实验采取长时间药物处理、诱导抗性，最终筛选出具有一定抗性的细胞克隆。实验材料小鼠试剂、试剂盒小牛血清DMEMDOX仪器、耗材CO2培养箱无菌钢圈实验步骤一、培养条件用含10%小牛血清的DMEM培养液，5%CO2，37℃培养。二、实验步骤1. 将CHO细胞培养在
实验动物组织标本的制备实验_解剖法
通常选用家兔、豚鼠、大白鼠或小白鼠等动物，禁食24 小时。击头致昏，以避免麻醉或失血对胃肠道机能的影响。立即打开腹腔，取出所需的胃、肠、胆囊等。去除附着的系膜或脂肪等组织。迅速放入充氧（或95%O2+5%CO2 ）保温（37 ℃）的营养液中，并以注射器用营养液将管腔内的食物残渣清洗干净。实验材料家兔
动物染色体标本的制备_秋水仙素阻断细胞分裂法
实验材料蟾蜍试剂、试剂盒秋水仙素 生理盐水 甲醇 冰醋酸 低渗液 PH6.8 磷酸缓冲液 Giemsa 染色液仪器、耗材显微镜 培养皿 手术剪 镊子 冷冻载片 滴管实验用品器具：显微镜、培养皿、手术剪、镊子、冷冻载片、滴管试剂：秋水仙素、生理盐水、甲醇、冰醋酸、低渗液、PH6.8 磷酸缓冲液、Gie
简述体外培养细胞的形态特征
体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征，可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞，常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。1、成纤维型细胞在培养中的细胞凡形态与成纤维细胞类似时，皆可称之为成纤维细
细胞体外培养的污染原因
1、外源性污染外源性污染中应注意实验室内空气保持洁净，定期清扫、紫外消毒，操作者严格按照无菌操作进行。由于离体细胞对各种毒物都很敏感，所以细胞培养所用器材的清洗、消毒处理非常关键。培养所用的物品器具要彻底清洗消毒，超净台的物品摆放要井然有序，避免反复烧烤已经高温灭菌的物品以及避免因细胞株种类过多而引
体外培养细胞包括了什么
在这里对于体外培养细胞所有情况则包括了初代培养与各种细胞系的培养，则就是说当体外培养细胞生长达到一定的密度后，则都是需要进行传代处理的。而在这里我们所说的传代的频率与培养液体的性能性质，以及接种的细胞数量与增殖速度是相关的。这就是说接种的细胞数量越大则细胞基数就越大，而在相同的增殖速度下细胞数量增加
原代细胞体外培养现状
原代细胞自然生长有两种方式，锚定依赖或非锚定依赖，这主要取决于它们在体内的组织来源：外周血（非锚定依赖）或固体组织器官（锚定依赖）。原代细胞一旦分离后，24-48h内需要进行贴壁或起始，开始培养。 广义地说，所有的哺乳动物细胞，无论其类型或来源，都需要在与人类生理条件（即37°C，5%CO2）
体外培养贴壁细胞特点
贴附并伸展，是多数体外培养细胞的基本生长特点。细胞贴壁的过程使形态发生很大变化，细胞形态改变是细胞内骨架（真核细胞中的蛋白纤维网架体系，由微管、微丝及中间纤维组成的体系）本身和细胞外基质共同作用的结果。培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样，当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维
小鼠细胞染色体制备及核型分析实验2
GIEMSA 显带（G显带）实验材料分裂中期染色体玻片试剂、试剂盒2XSSCNaCl胰蛋白酶 Giemsa溶液磷酸盐缓冲液玻片染色缸仪器、耗材亮视野显微镜实验步骤1.于室温存放染色体玻片 7~10d。2.在盛有 60~62°C 的 2XSSC 溶液的广口瓶中孵育玻片 1.5 h，每个广口瓶中盛放玻片
小鼠细胞染色体制备及核型分析实验1
培养以及小鼠外周血分裂相细胞收获实验实验材料雌性小鼠7〜10周龄试剂、试剂盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素钠溶液秋水仙碱溶液固定剂仪器、耗材聚苯乙烯组织培养管肝素化的微量毛细分血管有盖的12mm X 75mm 无菌管锥形玻璃离心管清洁的显微镜玻片实验步骤基本方案 培养以及小鼠外周血分裂
小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法
小鼠胚胎干细胞培养可以：（1）细胞保种；（2）用于干细胞研究；（3）用于细胞生理学、形态学等研究；（4）动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步
慢病毒用于体外（in－vitro）实验：感染培养原代细胞和...
慢病毒用于体外（in vitro）实验：感染培养原代细胞和建系细胞1. 慢病毒对各种细胞和组织的亲嗜性不同，用户使用Invabio提供的慢病毒之前可以通过查阅相关文献，了解慢病毒对您的目的细胞的亲嗜性，感染复数（MOI 值）以及在体内（in vivo）注射所需要的病毒量。如果没有相关文献支持
染色体的标本制作及其组型实验
在真核生物中, 染色体的数量和形态具有物种的特异性一直可以作为此物种分类的基本依据之一。染色体作为遗传物质-DNA的载体, 对生物的遗传、变异、进化和个体发生, 以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。将体细胞核中全部染
离体蛙心标本的制备实验
实验材料蛙仪器、耗材蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤（1）暴露蛙心：取蟾蜍一只，毁坏脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏和动脉干。 （2）观察心脏的解剖结构：在腹面可以看
离体蛙心标本的制备实验
实验材料 蛙仪器、耗材 蛙板小玻板粗剪刀直剪刀大镊子小镊子眼科剪刀探针玻璃分针大烧杯小烧杯滴管培养皿棉线任氏液锌铜叉实验步骤 （1）暴露蛙心：取蟾蜍一只，毁坏脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。从剑突下将胸部皮肤向上剪开或剪掉，然后剪掉胸骨，打开心包，暴露心脏和动脉干。 （2）观察心脏的解剖结构：在腹面
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪（FCM）是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行分类，还能分离纯化某一群或亚群细胞。
流式细胞仪标本的制备
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验概要 通过这一实验，要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法，并对动物染色体进行观察。实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许
人淋巴细胞染色体标本制作
实验概要动物细胞染色体标本的制作方法，认识染色体形态实验原理染色体是细胞遗传的研究对象，分析认识眼行为对于认识遗传物质的传递、复制、畸变等都有重要的意义。 获得染色体的方法很多，目前对于哺乳动物比较常用的方法是外周血细胞培养法，就是将外周血接种在适当的培养基中进行培育，人类外周血细胞是终未分化细胞，
小鼠骨髓细胞染色体标本制作
实验方法原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中期的染色体，可以进行染色体组型分析。实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 秋水仙素姬姆萨染液固定液低渗液生理盐
扫描电镜生物标本制备实验
实验材料病毒试剂、试剂盒无仪器、耗材扫描电镜实验步骤1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点，在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本，因此，病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求：(1) 标本的预处理要求：①尽可能使标本的形貌和结构保持活体时的近似
扫描电镜生物标本制备实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 无仪器、耗材 扫描电镜实验步骤 1. 标本的初步处理 待检标本都具有柔软而且含有大量水分的特点，在高度真空的扫描电镜中观察的标本都必须是干燥标本，因此，病毒标本在用扫描电镜观察之前都必须进行预处理并达到以下要求：(1) 标本的预处理要求：①尽可能使标
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验，要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法，并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂能力，本实验采用这一材料，通过前处理，低渗，固定，制片，染色等步骤制得染色体标本，可观察到许多处于分裂中
细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始（一）
细胞体外培养用水中水的质量要求提起细胞体外培养实验，每个经历过的实验者都会有这样的领悟吧，细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。明明小心翼翼的操作，细胞总会莫名其妙的被污染了！莫名其妙的挂掉啦！到底怎么回事呢？其实造成细胞污染的因素不单单是微生物，培养环境中所掺杂的物质也可能会影响细胞的生长。水是细胞赖以
细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始（二）
终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物，满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器，安装在乐枫超纯水系统的出水口，可有效去除水中的热原（内毒素）、核酸酶、细菌等杂质，制备符合细胞培养用水要求的超纯水（无热原、无DNase、无RNase、无菌）。