PCR原理及常见问题解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻译为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真正诞生。到如今，PCR技术已广泛应用于生命科学、医学研究、遗传工程、法医学、考古学、人类学等领域。 PCR原理 PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，双链DNA解离，成为单链；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶......阅读全文
PCR原理及常见问题解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻译为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真
PCR原理及常见问题解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻译为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR
降落PCR的原理及常见问题解答
提问：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度，直至达到“Touchdown”退火温度，然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法zui初出现是为了避开确定zui佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度
【分享】降落PCR的原理及常见问题解答
提问：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度，直至达到“Touchdown”退火温度，然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任
PCR－Array－常见问题解答
PCR Array FAQ:任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗？QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。根据仪器采用的96孔或者384孔板，分为以下5种板型（plate format）：plate formatInstrument providerQPCR instr
7500荧光定量PCR仪常见问题解答
Q ：7500快速定量PCR仪可以使用0.2ml PCR反应管或者96孔板吗？A：不可以，7500 快速定量PCR仪只支持0.1ml PCR反应管或者96孔板Q ：如何监控反应体系是否有蒸发？A：查看Rox信号是否在整个PCR过程中保持一致。在多组分图谱界面，选择单孔，如果Rox信号逐渐增高，代表样
7500荧光定量PCR仪常见问题解答
就像解决荧光定量PCR仪常规问题一样，学几招，也许在某一刻就是你需要的，先储备起来吧！Q ：7500快速定量PCR仪可以使用0.2ml PCR反应管或者96孔板吗？A：不可以，7500 快速定量PCR仪只支持0.1ml PCR反应管或者96孔板Q ：如何监控反应体系是否有蒸发？A：查看Rox信号是否
7500荧光定量PCR仪常见问题解答
打怪升级的不败经验在于“储备”，储备技能和能量，从容应对每一个遇到的挑战。就像解决荧光定量PCR仪常规问题一样，学几招，也许在某一刻就是你需要的，先储备起来吧！Q ：7500快速定量PCR仪可以使用0.2ml PCR反应管或者96孔板吗？A：不可以，7500 快速定量PCR仪只支持0.1ml PCR
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答
详述Pcr仪的四大分类及常见问题解答PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将PCR仪分为普通PCR仪，梯度PCR仪
荧光定量PCR仪使用过程常见问题解答
定量PCR仪的开关机顺序是怎样的？按照正确的开关机顺序操作，有助于延长仪器的使用寿命，减少仪器出故障的频率。开机顺序：先开电脑，待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机，等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件，进行实验。关机顺序：确认实验已经结束后，首先关闭信号收集软件，然后关掉定量PCR
流式试剂选择及常见问题解答
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的：流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1） BD流式细胞仪（06版目录第614
PCR常见问题及回答
PCR常见问题及回答 1. cDNA产量的很低 可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl 2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅 *zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系
PCR常见问题及对策
PCR常见问题及对策（一）没有得到扩增产物（1）酶失活或在反应体系中未加入酶。Taq DNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。（2）模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果。（3）变性温度是否准确：PCR
蒸馏装置及消化炉常见问题解答
蒸馏装置和消化炉这两个设备，既可以单独使用，又可以组合起来作为整套的凯式定氮仪装置。当单独使用时，蒸馏装置装置是专门用来对样品进行蒸馏的，即当样品被消化后将含氮的物质经过高温蒸馏出来，而消化炉是用来对样品进行消化，一般的我们用浓硫酸，再加上催化剂，一同跟含氮的样品进行消化。此时含氮样品中的氮就会和硫
PCR仪常见问题及回答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行比对
PCR仪常见问题及解答
聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。因此，无论是化石中的古生物、历史人物的残骸，还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液，只要能分离出一丁点的DNA，就能用PCR加以放大，进行
PCR仪常见问题及回答
PCR仪常见问题及回答1. cDNA产量的很低可能的原因：＊RNA模板质量低＊对mRNA浓度估计过高＊反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足＊同位素磷32过期＊反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅＊zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是R
PCR仪常见问题及回答
1. cDNA产量的很低可能的原因：＊RNA模板质量低＊对mRNA浓度估计过高＊反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足＊同位素磷32过期＊反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅＊zui常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系＊
PCR仪常见问题及回答
1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与反
PCR－扩增常见问题及特点
常见问题PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性，不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中
抗体常见问题解答
Q&A 常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验
气质常见问题解答
包括常见的气质问题和MSD质谱通讯中断问题 气质常见问题解答
细胞常见问题解答
1.原代细胞与细胞系有什么区别？ 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
抗体常见问题解答
常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验方法？
qPCR－常见问题解答
通常来讲，real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样，要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80～150 bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断 PC
pH计的维护保养及常见问题解答
一、pH计的原理 通过测定电极与参比电极组成的工作电池在溶液中测得的电位差，并利用待测溶液的pH值与工作电池的电势大小之间的线性关系，再通过电流计转换成pH单位数值来实现测定。 二、pH计的保养 1 pH计玻璃电极的贮存 pH计短期内不用时
pH计的维护保养及常见问题解答
一、pH计的原理 通过测定电极与参比电极组成的工作电池在溶液中测得的电位差，并利用待测溶液的pH值与工作电池的电势大小之间的线性关系，再通过电流计转换成pH单位数值来实现测定。 二、pH计的保养 1 pH计玻璃电极的贮存 pH计短期内不用时，可充分浸泡在蒸
pH计的维护保养及常见问题解答
一、pH计的原理 通过测定电极与参比电极组成的工作电池在溶液中测得的电位差，并利用待测溶液的pH值与工作电池的电势大小之间的线性关系，再通过电流计转换成pH单位数值来实现测定。 二、pH计的保养 1 pH计玻璃电极的贮存 pH计短期内不用时，可充分浸泡在蒸