流式试剂选择及常见问题解答
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的：流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1） BD流式细胞仪（06版目录第614页）流式细胞仪能检测多少个通道是由有多少根激光决定的以及每根激光的功能决定的，所以首先需要注意两点：流式细胞仪有哪些激光。比如标配的FACSCalibur只有一根488nm的激光，能做FL1、FL2、FL3三个荧光通道/三个颜色，而选配的Calibur (FACSCalibur的简称)配有488nm和635nm两根激光，可以检测FL1-FL4四个通道/4个颜色。不同型号的流式细胞仪的同样的一个通道检测荧光素的能力是不一样的，比如Calibur的FL3（第3通道）能检测PE-Texas Red, PE-Cy5, PerCP, PerCP......阅读全文
流式试剂选择及常见问题解答
一、如何搭配流式抗体荧光标记流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的：流式细胞仪能检测多少个通道、需要同时检测检测多少个指标、厂家的抗体有多少种荧光标记。如果流式细胞仪的通道越多，那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体1） BD流式细胞仪（06版目录第614
流式试剂
>>>流式试剂货号品名规格价格L0001Mouse anti-Human CD2 mAb,FITC50T/100T 800/1200 L0002Mouse anti Human CD3 mAb,FITC50T/100T 800/1200 L0003Mouse anti-Human CD3 mAb,P
PCR原理及常见问题解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻译为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR
PCR原理及常见问题解答
PCR (Polymerase Chain Reaction)，中文翻译为聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想，1985年由其发明了聚合酶链反应，即简易DNA扩增法，意味着PCR技术的真
金标法快速检测试剂常见问题解答
超过了判读时间结果还准确吗？结果不准确，应按照说明书规定的时间判读。如果到判读时间为止，结果为阴性，判读时间以后，出现淡淡的线条，可能是有色标记物持续释放造成的，但是这种结果是无效的。使用冰箱保存的标本和产品，应该注意什么？若标本、试剂、缓冲液冷藏后，检测前应把冷藏过包装完好的检测试剂、缓冲液放置空
金标法快速检测试剂常见问题解答
超过了判读时间结果还准确吗？结果不准确，应按照说明书规定的时间判读。如果到判读时间为止，结果为阴性，判读时间以后，出现淡淡的线条，可能是有色标记物持续释放造成的，但是这种结果是无效的。使用冰箱保存的标本和产品，应该注意什么？若标本、试剂、缓冲液冷藏后，检测前应把冷藏过包装完好的检测试剂、缓冲液放置空
流式抗体选择
很多朋友面对各种各样颜色的流式抗体，在选择及搭配上就犯了难，在此我们需要了解下流式细胞仪的各个激发光及各个接收通道是如何工作的、常见的荧光素有哪些、这些荧光的特性是什么样的。了解了这些，选择抗体和搭配不同的颜色就变得非常简单了。我们再回过头来看看流式细胞仪的原理，熟悉一下流式细胞仪的光路系统。从这张
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（二）
细胞凋亡 问：为什么有两套不同的TUNEL试剂盒？答：因为有两种不同的TUNEL方法可检测细胞凋亡。第一种方法采用TdT酶（末端脱氧核苷酸转移酶）将生物素化的核苷酸加到组织中的DNA片段的3'-羟基端。加入正离子可使这种标记更有效，经生物素化的核苷酸可用streptavidin-HRP共轭
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（三）
ELISA酶联吸附免疫法 问：人的Quantikine ELISA试剂盒是否有相关的对照？答：R&D Systems为人的Quantikine ELISA试剂盒提供三重对照组。请同我们联系以便确定产品的目录号。问：我想使用你们目录中的重组蛋白作为我的ELISA的对照，但我发现质量上有差异。这是为什
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（五）
问：我用了DuoSet ELISA开发系统，但几乎就没有颜色产生。那些步骤可能出了问题？答：很多方面都会影响到颜色的产生。比如：1) BSA的干扰。选择不含脂肪酸的ELISA级别的BSA很重要，可以降低球蛋白对实验的干扰。R&D Systems建议使用Serological Proteins的
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（一）
问：R&D Systems有分装试剂吗？答：没有分装试剂。R&D Systems公司不会分装，也没有授权任何公司进行分装。目前市场上所谓的“RD分装试剂”是没有品质保证的3无产品，R&D Systems公司不承担任何“RD分装试剂”的售后服务。在此，建议广大客户和经销商从R&D Syst
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答－(1)
问：R&amD Systems有分装试剂吗？答：没有分装试剂。R&amD Systems公司不会分装，也没有授权任何公司进行分装。目前市场上所谓的“RD分装试剂”是没有品质保证的3无产品，R&amD Systems公司不承担任何“RD分装试剂”的售后服务。在此，建议广大客户和经销商从R&am
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（四）
问：普通Quantikine ELISA试剂盒同高灵敏Quantikine ELISA试剂盒有何不同？答：高灵敏Quantikine ELISA试剂盒一般用于非常低量的细胞因子的检测，比如正常人（健康状态时）的血清和血浆。当普通Quantikine试剂盒一般检测不到（或几乎检测不到）正常人血清和
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答－(3)
ELIot酶联免疫斑点问：什么是ELIot？答：R&amD Systems的ELIot测试采用了ELISA技术。先将对某一细胞因子专一的单克隆抗体固定于微孔板的PVDF膜上，再将经适当刺激诱导的细胞移液到微孔中，然后将整个微孔板放置在保湿的370CCO2培养箱中温育特定的时间；在温育的这段时间里
RD－Systems试剂－QA－常见问题解答（六）
一般常见问题 问：蛋白和抗体的期限？答：R&D Systems有一政策就是不给我们的蛋白和抗体产品提供生产日期或产品期限，从而限制产品的使用期限。在适当的储存条件下，蛋白和抗体趋于稳定多年。这些储存条件包括以干粉形式储存蛋白、或在蛋白浓度高于0.1毫克/毫升时冷冻（-20°C或-80°C）储存
细胞培养板的选择与常见问题解答（二）
(4)细胞分布不均及解决办法问：我的细胞接种培养板，细胞总是聚集在周边部分，该如何处理啊？我看园子里有的战友的细胞却是聚集在中间，是不是板子的质量问题啊？答：请问你的细胞是如何混匀的？是滴管吹打还是振荡培养板？如果是后者，而且是转圈摇匀的话，很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分，导致细胞中间少
细胞培养板的选择与常见问题解答（一）
细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底（U型和V型）；培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。（1）平底和圆底（U型和V型）培养板的区别和选择：贴壁细胞一
降落PCR的原理及常见问题解答
提问：降落PCR（Touchdown PCR）的原理？回答：Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度，直至达到“Touchdown”退火温度，然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法zui初出现是为了避开确定zui佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度
蒸馏装置及消化炉常见问题解答
蒸馏装置和消化炉这两个设备，既可以单独使用，又可以组合起来作为整套的凯式定氮仪装置。当单独使用时，蒸馏装置装置是专门用来对样品进行蒸馏的，即当样品被消化后将含氮的物质经过高温蒸馏出来，而消化炉是用来对样品进行消化，一般的我们用浓硫酸，再加上催化剂，一同跟含氮的样品进行消化。此时含氮样品中的氮就会和硫
怎么选择流式抗体？
我们开始流式实验时，首先要选择抗体，必然要涉及到荧光的选择，尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1，我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施（激光，滤光片） 2，选择合适的荧光染料，尽量利用到你的仪器上的所有激光，这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选，常用：FI
怎么选择流式抗体
我们开始流式实验时，首先要选择抗体，必然要涉及到荧光的选择，尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1，我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施（激光，滤光片） 2，选择合适的荧光染料，尽量利用到你的仪器上的所有激光，这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选，常用：FI
如何选择流式荧光
这个问题有点不好说，每个荧光都有自己在某个波长的最大吸收峰，原则上最大吸收峰差的越远补偿越小，FITC PE APC 最常用的三个荧光，一般一管染三种抗体就选这三个颜色，便宜，而且好染。如果再加的话可以选PE-cy7或APC-cy7，个人觉得可以，一管不宜染太多种抗体，到时候很难分析，补偿也大，结果
怎么选择流式抗体？
我们开始流式实验时，首先要选择抗体，必然要涉及到荧光的选择，尽量使这些荧光的补偿值降到zui低。 1，我们需要了解我们用的流式细胞仪的硬件设施（激光，滤光片） 2，选择合适的荧光染料，尽量利用到你的仪器上的所有激光，这样可以使这些荧光交叉可能性达到zui小。一般四种颜色或以下的比较好选，常用：FI
关于消泡剂选择问题解答
问：我的水性化产品，遇到泡沫问题了怎么办？答：请根据您的行业，选择适合消泡剂产品。问：消泡剂的种类有哪些？应用领域是什么？答：常见的消泡剂种类有：1、天然油脂（即豆油、玉米油、矿物油等）来源容易，价格低，使用简单；常用于乳液合成，低端胶黏剂，内外墙涂料，金属加工液等；2、炔二醇系列消泡剂分子型消泡剂
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)5
NN. 用的是Roche molecular Biochemicals公司的由100kd，75kd，45kd，30kd，20kd，10kd组成的marker。开始做Western Blot时还能够看到marker，当然也仅能看见其中最多三条带。用80V进行SDS-PAGE电泳，用恒压10V4
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)8
EEE. 电泳用的是恒流，一块胶，20mA，100分钟左右。转膜也是恒流，38mA，100分钟。而且我用别人的细胞和一抗在我的整个反应体系下做出来了，当然彼此的目的蛋白不同。所以，我想问题应该出在抗原和一抗上，不知对不对。 解答：电泳的条件：样品的分子量决定了胶的浓度，一般使样品跑至胶的中部即可
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)11
11. 结果分析 CCCC. 条带有时清晰，有时很散，不知为何？ 解答：可能原因：样品可能存在降解；转膜不及时造成扩散；转移缓冲液甲醇浓度（ＮＣ膜可加到２０％，ＰＶＤＦ加到１５％）。 DDDD. 显色目的条带又细又浅，靶蛋白是27KD的bcl-xl和67KD 的c-myc
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)1
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。本文主要通过以下几个方面来详细地介绍一下Western Blot技术:一、原理二、 分类i.放射自显影ii.底物化
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)6
YY. 加甲醇的目的是什么？解答：加甲醇起着一定的固定作用，因为小分子蛋白质容易转出去.(特别是在硝酸纤维素膜上，因为NC膜结合蛋白质的能力较弱)。ZZ. “转膜后的脱脂奶粉封闭液是5%的TBST脱脂奶粉”，其中TBST最后那个T是Tween吗，浓度多大？解答：是Tween，配方如下:Tris-Bu
Western－Blot详解(原理、试剂、步骤及问题解答)2
四、主要步骤 生物秀为您搜集了现阶段几乎网上所有的Western Blot的中英文资料，仅供实验参考，可以根据自己实验的实际情况进行调整： Western Blot PROTOCOL： 点击查看所有相关文章 五、 实验常见的问题指南 根据问题的类型主要分成以下几类（以