β内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备
β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备 目前，在我国奶牛养殖业中，青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商户滥用抗生素以及未严格遵守休药期，致使牛奶中抗生素残留超标，乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限量抗生素的原料乳实施标准控制。国内多数乳品企业对抗生素残留超标的牛乳采取降价收购或不收购，而一些不法奶站使用一些生物制剂降解牛乳中残留的抗生素，生产出人造"无抗奶"。 经过调研，初步判断市售生物制剂的主要成分是β-内酰胺酶，它是由革兰氏阳性细菌产生和分泌的多种酶组成的酶家族，相对分子质量在28～32ku之间，可选择性分解牛奶中残留的β-内酰胺类抗生素。β-内酰胺酶能够破坏青霉素内酰胺结构，使其失去活性。该酶的使用掩盖了牛奶中实际含有的抗生素。崔生辉等人2007年曾在北京零售超市中采集5个厂家生产的、不同种类的牛奶样品38个，其中......阅读全文
β内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备
β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备 目前，在我国奶牛养殖业中，青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商户滥用抗生素以及未严格遵守休药期，致使牛奶中抗生素残留超标，乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限
β内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备（下）
1.7 抗体纯化1.7.1 多克隆抗体的纯化采用辛酸-饱和硫酸铵法纯化抗β-内酰胺酶的兔血清，2次滴加饱和硫酸铵的最终体积分数分别为50%和40%。将沉淀用少量PBS溶解后转入透析袋中，用PBS溶液透析48h，利用紫外分析法检测透析液直至透析完全。1.7.2 单克隆抗体的纯化采用PEG6000沉淀法
β内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备（上）
β-内酰胺酶单克隆抗体和多克隆抗体的制备目前，在我国奶牛养殖业中，青霉素和头孢菌素等β-内酰胺类抗生素对奶牛乳房炎等疾病的控制起着十分重要的作用。由于一些奶牛养殖商户滥用抗生素以及未严格遵守休药期，致使牛奶中抗生素残留超标，乳中残留的抗生素严重危害食品安全和人体健康。我国政府对超过一定限量抗生素的原
单克隆抗体和多克隆抗体有何区别
单克隆抗体的优点与局限性：单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性，只有对它们有全面的了解，才能根据不同应用领域的要求，正确的选择和应用。1.单克隆抗体的优点：（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体。（2）可以用相对不纯的抗原
多克隆抗体的制备
多克隆抗体的制备 1. 器材： 剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器(1ml、10ml，25ml)附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿（直径 18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑
多克隆抗体的制备步骤
实验试剂生理盐水（或PBS）弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant，FCA）弗氏不完全佐剂（Freund’s incomplete adjuvant， FIA）二甲苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3实验设备剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科
多克隆抗体的制备步骤
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤：1、制备抗原。2、选择实验动物。3、动物免疫。4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。6、纯化出抗体。7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。（一）抗原制备Ig 是免疫球蛋白，对异种动
多克隆抗体的制备步骤
实验概要本实验通过兔免疫制备了多克隆抗体。主要试剂生理盐水（或PBS）弗氏完全佐剂（Freund’s complete adjuvant，FCA）弗氏不完全佐剂（Freund’s incomplete adjuvant， FIA）二甲苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3主要设备剪刀（剪兔毛用）一把、弯
多克隆抗体的制备方法
一、器材 剪刀（剪兔毛用）一把、弯头眼科手术镊子（游离血管用）一把、直头眼科手术剪（剪血管用）一把，手术刀架，手术刀片，注射器（1ml、 10ml，25ml）附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶（200ml）或平皿（直径18cm）、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等
多克隆抗体制备
1. 免疫动物：两只新西兰兔 2. 佐剂：首先用完全弗氏佐剂（CFA），后用不完全弗氏佐剂（IFA）。 3. 免疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。每次免疫100-200μg免疫原。 4. 免疫：用生理盐水稀释免疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围
单克隆抗体与多克隆抗体的功能差异
单克隆抗体和多克隆抗体的最大的区别在于特异性上的差别。因此实验中如果对抗体的特异性有一定的需求，但并不是特别强调的话，可以选择定制多克隆抗体，这样的实验一般包含Western-Blot(WB)，IP等。如果您需要抗体用于流式细胞术时，那么最好选择单克隆抗体。另外，在研究很多新的蛋白时，并不确定新蛋白
大鼠多克隆抗体制备服务
多克隆抗体制备服务内容 百欧泰生物可为客户提供多克隆抗体制备服务，包括抗原生产，抗体制备，抗体纯化，抗体标记，抗体修饰等，客户也可以根据自己的需求选择适合自己的服务方案。 抗原客户提供百欧泰提供（2-4周）多肽合成多肽，偶联BSA/KLH蛋白蛋白表达小分子抗原小分子抗原偶联其他其他免疫动物
小鼠多克隆抗体制备服务
多克隆抗体制备服务内容 百欧泰生物可为客户提供多克隆抗体制备服务，包括抗原生产，抗体制备，抗体纯化，抗体标记，抗体修饰等，客户也可以根据自己的需求选择适合自己的服务方案。 抗原客户提供百欧泰提供（2-4周）多肽合成多肽，偶联BSA/KLH蛋白蛋白表达小分子抗原小分子抗原偶联其他其他免疫
单克隆抗体的制备
实验方法原理 使用聚二乙醇（PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞（P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株（杂交瘤细胞）。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査（ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握），然后对理想的杂交瘤细胞加
单克隆抗体的制备
实验方法原理 使用聚二乙醇（PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞（P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株（杂交瘤细胞）。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査（ELISA 筛
单克隆抗体的制备
实验方法原理使用聚二乙醇（PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞（P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株（杂交瘤细胞）。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査（ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握），然后对理想的杂交瘤细胞加以扩增、冷冻和
关于多克隆抗体的抗体制备介绍
多克隆抗体的制备一般包括以下几个步骤： 1、制备抗原。 2、选择实验动物。 3、动物免疫。 4、试取血进行测试，看看是否成功免疫。 5、如果成功免疫，杀死实验动物，采集全部血清。 6、纯化出抗体。 7、鉴定抗体。包括纯度以及特异性。 具体操作与制备原理参见中国免疫学实验网。 （
关于己内酰胺的制备方法介绍
1.肟法：首先将高纯度的环己酮与硫酸羟胺在80-110℃下进行缩合反应生成环己酮肟。分离出来的环己酮肟以发烟硫酸为催化剂，在80-110℃经贝克曼重排转位为粗己内酰胺，粗己内酰胺通过萃取、蒸馏、结晶等工序，制得高纯度己内酰胺。肟法的原料环己酮可由苯酚加氢得环己醇，再脱氢而得；或由环己烷空气氧化生
单克隆抗体的制备技术路线和关键点
动物的选择与免疫1．动物的选择 纯种BALB/C小鼠，较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA/C小鼠。2．免疫方案 选择合适的免疫方案对于细胞融合杂交的成功，获得高质量的McAb至关重要。一般在融合前两个月左右根
单克隆抗体的制备过程
1. 免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。 2.细胞融合 采用
单克隆抗体的制备过程
1. 免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。 2.细胞融合 采用
单克隆抗体的制备过程
1. 免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。 2.细胞融合 采用
单克隆抗体的制备实验
单克隆抗体的制备实验可以用于：（1）将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交， 获得既能产生抗体， 又能无限增殖的杂种细胞，并以此生产抗体；（2）该技术是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体，对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。实验方法原理单克隆抗体技术(monoclo
单克隆抗体的制备步骤
过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞
单克隆抗体的制备过程
单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体
单克隆抗体的制备过程
单克隆抗体在现代生物医学中的作用越来越大，它不仅被广泛应用于生化和免疫检测，而且治疗癌症和自体免疫疾病的单抗药物也逐渐批准上市。因此单抗的制备和筛选具有其内在的重要性。 动物免疫 取4只6周龄雌性BALB/c小鼠皮下注射抗原（20 μg/只），第一次免疫与等量弗氏完全佐剂乳化，0.2 mL/只
单克隆抗体的制备（一）
材料1. 免疫原一旦作出制备单克隆抗体的决定后，首先要考虑的问题是使用何种免疫原(第2章）。免疫原(或抗原）可以有多种：全细胞、细胞提取物、纯化蛋白、融合蛋白、多肽、糖 类 、脂类或 D N A 等 。此外，制备单克隆抗体时不需要很纯或单一特异性的抗原，因为在单克隆抗体筛选的过程时，每个克隆
单克隆抗体的制备步骤
1、免疫动物的选择：免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。2、细胞融合：采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同
单克隆抗体的制备过程
1.免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。2.细胞融合采用二氧化碳气体处死小
单克隆抗体的制备步骤
过程1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞