手把手教你设计shRNA
一、认识shRNA: 在研究基因功能中,RNAi由于可以特异性地使基因沉默或表达量降低而成为生物实验中的有力工具。其中,shRNA是可以克隆至表达载体并表达siRNA双链的DNA分子。今天给大家分享两种能快速设计shRNA的方法。 二、shRNA的设计: 1. Sigma网站 Sigma公司做了一个针对人和小鼠的shRNA库,而且部分基因的shRNA序列经过验证,因此直接使用Sigma公司已验证过的RNAi序列最为方便。 首先打开网址:http://www.sigmaaldrich.com/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.html 出现以下界面: 以NLRP3基因为例,直接输入基因名,点击search,出现以下界面: 在Products中......阅读全文
手把手教你安装毛细管柱(一)
为了发挥色谱系统的最佳性能,色谱柱的安装一定要正确、合适。安装时,要准确无误地完成色谱柱与进样口、检测器间的连接,因为其安装的好坏不仅直接影响分析的效果,还对整个色谱系统的最佳的性能和使用寿命有不同的影响。下文是小编整理的史上最全毛细管柱安装步骤,手把手教您搞定毛细管柱!
手把手教你安装毛细管柱(二)
步骤 6:进行气体检漏 在色谱柱加热前,一定要对GC系统进行检漏。当我们对进样口和检测器进行载气检漏时,使用电子检漏计是最为有效的方法之一。建议不要使用Snoop等肥皂泡,它有可能由被检测处进入色谱柱和其它装置中,从而对系统有所损害。而且不能使用Snoop对正在加热的进样口和检测器装置进
手把手教你正确的旋转蒸发仪吹洗方法
旋转蒸发仪适用于回流操作、大量溶剂的快速蒸发,微量组分的浓缩和需要搅拌的反应过程等。旋转蒸发仪开工前,需对其安装检验合格后的全部工艺管道和设备进行吹扫与清洗(以下统称吹洗),。但通常包括以下几种方法:水冲洗、空气吹扫、酸洗钝化、油清洗和脱脂等。接下来,就给大家介绍下它们的主要特点和使用范围。
手把手教你开展多重耐药菌的目标监测(一)
01 明确监测的对象根据《国家卫生计生委办公厅关于印发麻醉等6个专业质控指标(2015年版)的通知》,多重耐药菌目标监测种类分别为耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRABA)、耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(CRPAE)、耐碳青霉烯类肠杆菌(CRE)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐万古霉素肠球菌(V
手把手教你看懂宝宝的血常规化验单
宝宝一旦去医院,最常见的就是查体之后的抽血检查血常规了,这些辅满数字、又花花绿绿的检验单,却经常让妈妈们一头雾水。化验单上的那些数据能看出宝宝怎么样的身体情况?同样是感冒又怎么根据化验单来判断是病毒性感冒还是细菌性感冒呢?血常规检查到底有没有必要?什么时候做血常规化验比较准?检验结果的报告单上又能看
手把手教你了解和使用氢空发生器
氢气发生器的工作原理 1.纯水电解制氢 把满足要求的电解水(电阻率大于1MΩ/cm,电子或分析行业用的去离子水或二次蒸馏水皆可)送入电解槽阳极室,通电后水便立刻在阳极分解:2H2O=4H++ 2O2-,分解成的负氧离子(O2-),随即在阳极放出电子,形成氧气(O2),从阳极室排出,携带部份水
手把手教你开展多重耐药菌的目标监测(二)
03 总结反馈一、多重耐药菌目标监测总结报告的撰写1.数据处理为避免高估多重耐药菌感染或定植情况,分析时间段内,1名患者住院期间多次送检多种标本分离出多重耐药菌,应根据情况剔除重复株,分为以下几种情况:①同一患者同一类别送检标本,检出同种细菌,分析时应删除重复株;②同一患者同一类别送检标本,检出不
手把手教你如何解决色差仪日常故障问题
色差仪在我们日常生活中很常见,对于我们都不陌生,在去超市购物或者其他大型商场时都会看到色差仪,色差仪的出现让人们的生活变得更加便利,方便人们的生活。色差仪广泛应用于塑胶、印刷、油漆油墨、纺织、印染服装等行业的颜色管理领域,根据CIE色空间的Lab,Lch原理,测量显示出样品与被测样品的色差△E以及
手把手教你用红外光谱鉴定农药违禁添加
我们总是听到各种农药产品知识产权侵权行为,主要还是由于市场上缺乏快速有效的农药产品定性鉴定技术和标准,导致市场上的农药产品知识产权侵权行为比较普遍的存在。 首先,来说说什么是农药违禁添加吧,农药产品是知识产权密集型的典型高科技产品之一,我国一直以来在不断加强对农药管理的力度,如加强对持久性农药、
Realtime-qPCR手册手把手教你从菜鸟到高手
3.3 SYBR@Green 法SYBR@Green I是一种结合于小沟中的双链DNA结合染料,与双链DNA结合后,其荧光大大增强。这一性质使其用于扩增产物的检测非常理想。SYBR@Green I 的最大吸收波长约为497nm,发射波长最大约为520nm。在PCR反应体系中,加入过量SYBR@Gre
手把手教你建设药用包装物理检测实验室
包装是现代药品生产过程中的一道重要工序,起着保护、美化和方便产品储存运输等重要作用,如果产品包装不合格,甚至有害,它不仅不能达到保护药品的目的,甚至对消费者的健康造成威胁,反而可能造成经济损失。最近在制药行业闹的比较厉害的“毒胶囊”事件,把人们的视线又拉到关于食品药品安全管理中,在“十二五规划”讲话
PNAS:游戏玩家教你设计RNA
研究人员发现,与计算机相比,网络游戏玩家可以更好的预测和设计RNA折叠。这一发现能为新兴的分子工程领域带来什么样的启示呢? RNA可以被弯曲、成环和扭转形成多种不同的结构,这种自我装配的分子在生物学和生物工程领域具有关键性的作用,其应用前景非常广阔。许多研究者们都在设计能够折叠
手把手教你正确使用便携式气体检测仪
气体检测仪的操作已相当智能化,就如同手机一样,很多人上手就能用,但是仪器不是手机其核心作用是检测出合格的数据,检验工作的严谨性不允许我们在未掌握操作方法前提下进行检验,特别是四合一气体检测仪,这种复合气体检测仪,仪器的安全防护是非常重要的,其检测仪的数据准确性直接关乎人民的健康安全,接下来仪器设
手把手教你看金属材料试验机的精度值
金属材料试验机是用来对材料进行静载、拉伸、压缩、弯曲、剪切、剥离等力学性能试验用的机械加力的试验机,适用于塑料板材、管材、异型材,塑料薄膜及橡胶、电线电缆等材料的各种物理机械性能测试为材料开发,为物性试验、教学研究、质量控制等不可缺少的检测设备,源峰拉力机夹具作为仪器的重要组成部分,不同的材料需要
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形
shRNA干扰载体构建
产品技术背景pRI系列载体是基于III类RNA聚合酶启动子:人类H1启动子的专用于哺乳动物细胞RNA干扰的载体。H1启动子在哺乳动物细胞内合成类似siRNA分子的小分子RNA。由于H1启动子有精确的转录起始位点和终止信号,H1启动子转录产物精确生成人工设计的shRNA,shRNA经过RISC剪切后形
shrna引物退火原理
1. 载体取2-5ug,在25ul体系中,用2.5ul的酶切30min-1h,回收载体:载体:---2ul(2-5ug)酶---------2.5ulBuf--------2.5ul水---------18ul回收的时候希望浓度高点。2. Oligo退火形成双链若为2OD=5.4nmol的话,则每个
4-分钟教你学会多重-PCR-引物设计
设计策略 MPCR 要求所有的引物对在同一条件下扩增其各自的特异序列。大多数多元 PCR 反应 局限于扩增 5~10 个目的片段,原因之一是反应中,每另加入一对引物会导致一定程度的灵活性的丢失。引物数量的增加也使引物二聚体和非特异扩增出现的概率增加。因此,进行多元 PCR 要求周密计划
4-分钟教你学会多重-PCR-引物设计
多元 PCR (多重PCR,Multiplex PCR,MPCR) 是指在一个 PCR 反应中使用一个模板和几对引物同时扩增多个目的片段的 PCR 反应。这项技术非常有用,他不仅可以提高 PCR 的产率还能提高 DNA 样品的利用率。另一种形式的 MPCR 是组合 PCR, 组合 PCR 是在同一
7步骤,手把手教你如何选购表面粗糙度仪
表面粗糙度仪是适用于生产现场,可测量多种机加工零件的表面粗糙度,根据选定的测量条件计算出相应的参数,在液晶显示器上清晰地显示出全部测量参数。选择适合自己行业使用表面粗糙度仪技巧:1.客户要明确自己的实际测量需要,如要测量的工件形状、大小2.材料是金属还是非金属,硬度是多少;3.工件是精密机加工件还是
The-TRC-shRNA-Design-Methods-and-Rules
OverviewWe design shRNA molecules with an algorithm. Our algorithm uses several criteria to rank potential 21mer targets within each human and mouse R
从开机到关机,手把手教你如何使用紫外荧光法测硫仪
一.紫外荧光法测硫仪实验前准备工作 1.更换干燥管的变色硅胶。(每天换一次) 2.更换异径管到电解池之间过滤器的脱脂棉。 3.检查各部位连接管道连接是否正常。 4.检查各部位电缆连接是否正常。 二.紫外荧光法测硫仪开机步骤 1.打开测硫仪电源 2.打
从样品制备到实际操作,手把手教你拍出高质量TEM照片
透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)具有很高的分辨率和放大倍数高,广泛应用于材料科学、地球科学、医学和生命科学等领域。透射电子显微镜结合不同的附件(X射线能谱分析(EDS)、电子能量损失谱(EELS)),可以同时提供形貌、成分、结构信息,它可以揭
手把手教你用纸水分测量仪检测印刷纸水分含量,感动不
印刷用纸含水量的大小与印刷产品有着直接的关系。水分太低,纸质发脆,印刷中易发生静电;含量过高,将会使油墨难以干燥。水分变动对纸的各种特性影响也很大,随着水分的变动,其定量、抗张强度、柔韧性、耐折度等都将产生改变,所以正确分解纸张的含水量及其对印刷的影响尤为重要。纸张水分测量仪测量水分范围宽、精度高、
miRNA,siRNA,shRNA有什么区别
siRNA是小干扰rna;shRNA是小发卡rna,一段rna单链,形成茎环结构部分双链的小rna siRNA可以是天然产生也可以是人工导入的,shRNA一般都是指人工的 shRNA多是用dna载体构建,在宿主内自行转录成shRNA,再加工成像siRNA一样的小RNA,目的为了模仿。
The-TRC-shRNA-Design-Methods-and-Rules2
Score the Candidates Sequences for SpecificityWe are forced to balance the prediction of knockdown efficiency against the desire to minimize interacti
来了!复旦大学药学院团队手把手教您药物设计
2025年7月23-26日,陶术特邀 复旦大学药学院人工智能药物设计团队 授课的第四期药物设计培训班将在上海丽昂豪生大酒店正式开班!培训班师资队伍内容强大,三位老师均为药物分子设计领域的资深研究者,理论基础深厚且教学经验丰富。他( 她)们将带领学员系统地、全面的学习分子对接、虚拟筛选、大分子相互作用
第二章:4-分钟教你学会多重-PCR-引物设计
多元 PCR (多重PCR,Multiplex PCR,MPCR) 是指在一个 PCR 反应中使用一个模板和几对引物同时扩增多个目的片段的 PCR 反应。这项技术非常有用,他不仅可以提高 PCR 的产率还能提高 DNA 样品的利用率。另一种形式的 MPCR 是组合 PCR, 组合 PCR 是在同一
从元器件选型到EMC测试要点,教你如何设计保护电路
随着电子产品集成度、处理器速度、开关速率和接口速率的不断提升,电子产品ESD/EMI/EMC问题日益突出,尤其是当手持电子设备向轻薄小巧方向发展而且产品功能不断增加时,它们的输入/输出端口也随之增多,导致静电放电进入系统并干扰或损坏集成电路,电路保护是最容易出现问题的部分,也是容易被忽略的问
miRNA、siRNA、dsRNA与shRNA-表示什么意思?
siRNA,shRNA,dsRNA,miRNA间的区别RNA干扰(RNAi),即用20多个核苷酸组成的短的双链RNA(siRNA)代替传统反义核酸进行转录后基因沉默,已经迅速而广泛地应用到基因功能,基因表达调控机制研究等热门领域,并为基因治疗开辟了新的途径。近两年来,这方面的科学论文及报道爆炸性增长