手把手教你设计shRNA

一、认识shRNA: 在研究基因功能中,RNAi由于可以特异性地使基因沉默或表达量降低而成为生物实验中的有力工具。其中,shRNA是可以克隆至表达载体并表达siRNA双链的DNA分子。今天给大家分享两种能快速设计shRNA的方法。 二、shRNA的设计: 1. Sigma网站 Sigma公司做了一个针对人和小鼠的shRNA库,而且部分基因的shRNA序列经过验证,因此直接使用Sigma公司已验证过的RNAi序列最为方便。 首先打开网址:http://www.sigmaaldrich.com/life-science/functional-genomics-and-rnai/sirna/mission-predesigned-sirna.html 出现以下界面: 以NLRP3基因为例,直接输入基因名,点击search,出现以下界面: 在Products中......阅读全文

手把手教你设计shRNA

  一、认识shRNA:   在研究基因功能中,RNAi由于可以特异性地使基因沉默或表达量降低而成为生物实验中的有力工具。其中,shRNA是可以克隆至表达载体并表达siRNA双链的DNA分子。今天给大家分享两种能快速设计shRNA的方法。   二、shRNA的设计:   1. Si

手把手教你设计引物(图文并茂)

宽度:713 px高度:435 px维持原图长宽比:确认不知不觉几年下来自己也快毕业了,感谢丁香园这些年来的帮助。没有什么可回报的东西,就发个帖教教新人如何设计引物吧,尽量做到手把手的教,图文并茂。引物设计的帖子不少,以前很多战友会推荐Oligo、PrimerPremier、DNA man等等软件。

设计shRNA教程

一、认识shRNA: 在研究基因功能中,RNAi由于可以特异性地使基因沉默或表达量降低而成为生物实验中的有力工具。其中,shRNA是可以克隆至表达载体并表达siRNA双链的DNA分子。今天给大家分享两种能快速设计shRNA的方法。 二、shRNA的设计: 1. Sigma网站Sigma公司做了一个针

体内表达shRNA的设计

1.克隆到shRNA 表达载体中的shRNA 包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔的,组成发夹结构,由polⅢ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA 聚合酶Ⅲ的转录终止子。2.两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。3.Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的

手把手教你质粒转染

  胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术。常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类。本实验室主要是质粒转染、miRcroRNA转染、慢病毒转染、药物转染、多肽转染等。  一. 实验材料及试剂  六孔板、CO2培养箱、EP管、酒精灯等;无血清培养基、MEM-α或DME

The-TRC-shRNA设计方法与原则

OverviewWe design shRNA molecules with an algorithm. Our algorithm uses several criteria to rank potential 21mer targets within each human and mouse R

手把手教你看懂尿常规

体检时,尿常规是必检项目。结果一出,很多人看着手中的尿常规化验单,一脸迷惑,这上面写的究竟是啥意思?我到底有没有得病?   一般尿常规包括三列内容:检验项目,结果(带不同单位)和参考区间。其中:  ↑和↓分别代表高于或低于正常参考值;   +、-和+-则分别代表阳性、阴性和弱阳性;   +、++和+

手把手教你使用数字熔点仪

 数字熔点仪采用光电检测,数字温度显示等技术,具有初初熔、终熔自动显示等功能。温度系统应用了线性校正的铂电阻作检测元件,并用集成化的电子线路实现快速“起始温度”设定及八档可供选择的线性升温速率自动控制。初熔读数可自动贮存,具有无需人监视的功能。仪器采用药典规定的毛细管作为样品管。数字熔点仪操作使用1

体内表达shRNA(短发夹RNA)的设计

1.克隆到shRNA表达载体中的shRNA包括两个短反向重复序列,中间由一茎环(loop)序列分隔的,组成发夹结构,由polⅢ启动子控制。随后在连上5-6个T作为RNA聚合酶Ⅲ的转录终止子。 2.两个互补的寡核苷酸两端须带有限制性酶切位点。 3.Stratagene发现29个寡核苷酸较之原先推荐的2

手把手教你选择“善其事”的移液器

手动移液器是实验室各种器材中用途广泛且持久耐用的工具。每天的使用时间可高达到数个小时,所以人体工学设计以及手柄舒适度等个人偏好都是非常重要的选择标准。为工作寻找合适的移液器时还需要考虑其他因素,比如适用性、实验室工作流程、所需的量程、样本的物理性质以及实验的灵敏度要求等。要选购符合实验要求的移液器有

手把手教你选择面料取样器

一.产品介绍     该款新式取样广泛应用于棉、毛、丝、麻、化纤等各种纺织、针织品的裁切取样,同时亦可裁切皮革、纸制品、铝箔等。尤其适合多层布一次裁切,极大的减少了工作量,提高了工作效率。     手压取样刀设计合理,使用简单便捷,轻松舒适、裁切圆整、取样面积,操作简单速度快。铸铝底座,稳固耐用,机

【盘点】手把手教你“健康吃肉远离癌症”

图片来自:identidad.queretaro.itesm.mx  2016年10月17日--已有研究表明,长期使用加工肉类会增加患上食道癌结肠癌的风险。世界卫生组织下属的国际癌症研究所指出,每天食用超过50克的加工肉类食品,会导致肠道癌症风险增加18%。可见,加工肉类对癌症风险的贡献之大。但是,

手把手教你如何清洗ICP炬管

  ICP炬管对传统的电感耦合等离子体发射光谱仪进行了改进,几乎可分析周期表中所有金属元素和部分非金属元素。该型仪器稳定性好,测量范围宽,检出下限低,分辨率高,灵敏度高。那么再好的设备在经过长时间的试用下对于ICP炬管都要进行定期的清洗工作来清楚长期使用后ICP炬管内部的污垢。下面就跟着小编来一起了

手把手教你操作热电Mk3酶标仪

酶标仪操作时需要注意事项酶标仪的功能是用来读取酶联免疫试剂盒的反应结果,因此酶标仪要得到准确结果,酶标仪试剂盒的使用必须规范。许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判断结果,操作过程随意性较大,在使用酶标仪后如果不能及时纠正操作习惯,会造成较大误差。在酶标仪的操作中应注意以下事项:   酶标仪使用加液器

手把手教你偏光显微镜的使用

  偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。反射偏光显微镜是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行研究鉴定的必备仪器,可供广大用户做单偏光观察,正交偏光观

手把手教你如何读懂冷冻离心机

低速冷冻离心机转速一般不超过4000rpm,zui大容量为2—4L,是实验室zui常用于 初级分离提取生物大分子、沉淀物等。其转头多用铝合金制的甩平式和角式两种,离心管有硬质玻璃、聚乙烯硬塑料和不锈钢管多种型号。离心机装配有驱动电机、定时器、调整器(速度指示)和制冷系统(温度可调范围为-20—+40

手把手教你如何校正固体密度计

 固体密度计是将现代微电子技术与阿基米德原理相结合而研发出来的新型密度测试仪器。此仪器改变了传统密度测试的繁琐操作,实现了橡胶固体、塑料固体、粉末粉尘、精密陶瓷、磁性材料等固体样品的快速测量。该新型固体密度计能满足现代产品生产及新材料研究过程中对样品密度的测量要求。   你可能不知道固体密度计的使用

手把手教你偏光显微镜的使用

偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。反射偏光显微镜是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行研究鉴定的必备仪器,可供广大用户做单偏光观察,正交偏光观察,

手把手教你大量出血患者如何输血

 大量输血方案(Massive Transfusion Protocols,MTP)是指在大出血时,按照预先制定的血液成分方案予以输血,需要妇产科医师、麻醉医师及输血科医师及血库共同努力完成输血协议。随着剖宫产率的增加,胎盘前置及植入的发生率增加,产后出血已成为围产期孕妇死亡的主要原因。当下

手把手教你如何发一篇Hepatology

广大临床医生朋友们,是否还在熬夜看文献写标书头疼不已?Dr.S的临床医生如何发表高分SCI文章系列又来了,上期咱们说了肺癌(想看点我),今天咱们继续从肝癌说起,来分析一篇Hepatology(11.7分)的文章,该期刊是消化领域的老牌杂志,权威性和影响力相当的高。废话不多说,我们先解读一下题目:Th

手把手教你偏光显微镜的使用

手把手教你偏光显微镜的使用  偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。反射偏光显微镜是利用光的偏振特性对具有双折射性物质进行研究鉴定的必备仪器,可供广大用

手把手教你看懂血常规化验单

我们一般最先关注的是:五种细胞,分别为白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、血红蛋白、血小板。首先我们先来认识下白细胞(WBC),小儿正常白细胞在宝宝不同年龄阶段正常值是不同的,在新生儿期,白细胞总数可在20×10^9/L,在婴儿时期,白细胞总数在(11—12)×10^9/L左右,在儿童时期,白细胞总数在(

手把手教你红外光谱谱图解析

  一、红外光谱的原理[1]  1. 原理  样品受到频率连续变化的红外光照射时,分子吸收其中一些频率的辐射,分子振动或转动引起偶极矩的净变化,是振-转能级从基态跃迁到激发态,相应于这些区域的透射光强减弱,透过率T%对波数或波长的曲线,即为红外光谱。  辐射→分子振动能级跃迁→红外光谱→官能团→分子

手把手教你操作焊接检查显微镜

 焊接检查显微镜是一个熔深检测系统中必不可少的几何测量工具。它完善了图像采集后的许多功能,对图像进行编辑处理,能完成对图像中的点、线、圆、矩形及任何图形几何参数的测量。此软件使用方便直观。是焊接熔深测量与分析的有效工具。可按用户需求制作报告文档的录入界面、软件可自动生成电子报告文档,并提供报告的保存

手把手教你红外光谱谱图解析

一、红外光谱的原理1. 原理样品受到频率连续变化的红外光照射时,分子吸收其中一些频率的辐射,分子振动或转动引起偶极矩的净变化,是振-转能级从基态跃迁到激发态,相应于这些区域的透射光强减弱,透过率T%对波数或波长的曲线,即为红外光谱。辐射→分子振动能级跃迁→红外光谱→官能团→分子结构2.红外光谱特点红

手把手教你安装毛细管柱(一)

  为了发挥色谱系统的最佳性能,色谱柱的安装一定要正确、合适。安装时,要准确无误地完成色谱柱与进样口、检测器间的连接,因为其安装的好坏不仅直接影响分析的效果,还对整个色谱系统的最佳的性能和使用寿命有不同的影响。下文是小编整理的史上最全毛细管柱安装步骤,手把手教您搞定毛细管柱!   

手把手教你如何操作肉类水分测定仪

随着生鲜肉类及肉制食品销售进入旺季,为保证节日期间广大消费者购买肉品质量安全,各地开展了保安全肉食品专项整治活动,大力加强肉品市场监管力度,坚决铲除私屠滥宰及对畜禽注水窝点。注水肉是一些不法商贩通过屠宰前一定时间给动物灌水,或者屠宰后向肉内注水制成,注水肉带来的危害是易造成病原微生物的污染,降低肉的

手把手教你看懂儿童血常规化验单

我们一般最先关注的是:五种细胞,分别为白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、血红蛋白、血小板。   首先我们先来认识下白细胞(WBC),小儿正常白细胞在宝宝不同年龄阶段正常值是不同的,在新生儿期,白细胞总数可在20×109/L,在婴儿时期,白细胞总数在(11-12)×109/L左右,在儿童时期,白细胞总数在

手把手教你使用SF6露点仪

 首先:连接SF6设备  将测量管道上螺纹端与开关接头连接好,用扳手拧紧,关闭测量管道上另一端的针型阀;再把测试管道上的快速接头一端插入露点仪上的采样口;将排气管道连接到出气口。后将开关接头与SF6电气设备测量接口连接好,用扳手拧紧;  然后:初始化  打开仪器电源开关,仪器进入初始化自校验过程。 

手把手教你安装毛细管柱(二)

  步骤 6:进行气体检漏   在色谱柱加热前,一定要对GC系统进行检漏。当我们对进样口和检测器进行载气检漏时,使用电子检漏计是最为有效的方法之一。建议不要使用Snoop等肥皂泡,它有可能由被检测处进入色谱柱和其它装置中,从而对系统有所损害。而且不能使用Snoop对正在加热的进样口和检测器装置进