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端粒长度原来可以用数字方法来测量

新加坡国立大学的研究人员近日设计了一种名为单端粒绝对长度快速分析(STAR)的新方法,能够快速测量端粒的绝对长度。 端粒长度的异常往往与多种衰老相关疾病有关,比如糖尿病、神经退行性疾病和心血管疾病,还与多种癌症的预后相关。目前,测量端粒的金标准方法需要大量的起始DNA,而且操作繁琐,不适合临床使用。 新加坡国立大学的研究人员近日设计了一种名为单端粒绝对长度快速分析(STAR)的新方法,能够快速测量端粒的绝对长度。他们在《Science Advances》杂志上报告称,该方法准确灵敏,并且能够测定癌细胞中的染色体外端粒重复序列(ECTR)。 “我们希望这种简单而全面的检测方法将被广泛地采用,作为端粒检测的标准方法,”研究人员在论文中写道。 图1. STAR分析的流程(图片来自原文) 研究人员指出,评估端粒长度的现有方法存在缺陷。例如,基于Southern blotting的末端限制性片段(TRF)分析一直被认为是端粒......阅读全文

端 粒 长 度 和 端 粒 酶 活 性 的 分 析

实验步骤 基 本 方 案 I Southern 杂 交 检 测 传 统 凝 胶 电 泳 中 末 端 端 粒 D N A 限制性片段(TRF) 的端粒长度材 料基 因 组 D N A (试剂盒分离)和 限 制 性 内 切 核 酸 酶 和 反 应 缓 冲 液琼 脂 糖(D N A 级)1 〇 X T B

定量PCR仪引物长度设定

  ① 引物长度   一般引物长度为18~30碱基。总的说来,决定引物退火温度(Tm值)最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。   在引物长度小于20bp时:[4(G+C)+2(A+T)]-5℃   在引物长度大于20bp时:62.3℃+0.41℃(%G-C)-

定量PCR仪引物长度设定

  ① 引物长度   一般引物长度为18~30碱基。总的说来,决定引物退火温度(Tm值)最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。   在引物长度小于20bp时:[4(G+C)+2(A+T)]-5℃   在引物长度大于20bp时:62.3℃+0.41℃(%G-C)-

数字PCR新方法来测量端粒长度

近日,新加坡国立大学利用数字PCR技术,开发出一种新颖、快速的端粒测量方法—单端粒绝对长度快速分析法(SATR),可在临床环境中快速确定癌症和年龄相关疾病中的端粒酶异常,有助于临床医生更快地为患者进行诊断与计划治疗对策。相关研究日前已发表在《Science Advances 》期刊上。STAR分

提高RT-PCR的灵敏度与产物长度

摘要RT-PCR 已经成为研究者确定感兴趣的器官、组织或细胞中mRNA 转录本出现、结构和表达水平的基本方法。RT-PCR的基本步骤包括:首先对样品中出现的所有mRNA 合成一个cDNA拷贝,接着扩增感兴趣的基因。因为两个步骤中使用的反应缓冲液不能兼容,所以这两个步骤(RT 和PCR)通常分别进行。

提高RT-PCR的灵敏度和产物长度

RT-PCR 已经成为研究者确定感兴趣的器官、组织或细胞中mRNA 转录本出现、结构和表达水平的基本方法。RT-PCR的基本步骤包括:首先对样品中出现的所有mRNA 合成一个cDNA拷贝,接着扩增感兴趣的基因。因为两个步骤中使用的反应缓冲液不能兼容,所以这两个步骤(RT 和PCR)通常分别进行。即使

PCR扩增产物的克隆——平端连接法

PCR扩增产物的克隆可以:(1)获得目的DNA片段;(2)用于原核表达的研究;(3)广泛应用于分子生物学相关研究。实验方法原理平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min(利用

以磁性顆粒为基础纯化 PCR 产物实验

            试剂、试剂盒 乙醇 PCR 样品 仪器、耗材 自动定位器 吸头

以磁性顆粒为基础纯化 PCR 产物实验

MagneSil 是一种顺磁性硅质顆粒,能够充当可移动的固相物质而用于捕获双链 DNA 片段。通过洗涤黏附于硅质顆粒上的靶复合物来去除残留污染,从而纯化的目的 DNA。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。 试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材

以磁性顆粒为基础纯化 PCR 产物实验

试剂、试剂盒 乙醇PCR 样品 仪器、耗材 自动定位器吸头液体处理自动机械分离装置平板密封条PCR 纯化系统 实验步骤 一、材料 1. 缓冲液、溶液和试剂 乙醇,80% 2. 核酸和寡核苷酸 在 96 孔板中的 PCR 样品(不多于100ul/孔)