细胞常见问题解答

1.原代细胞与细胞系有什么区别? 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。 细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。 需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除......阅读全文

细胞常见问题解答

  1.原代细胞与细胞系有什么区别?   细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.

细胞分离的常见问题解答

原代细胞(Primary cells):是指直接从机体取出的组织或细胞获得单个细胞并在体外进行培养的细胞。这里的组织主要指:组织器官、外周血及胚胎等。 原代细胞培养:由于原代细胞生长缓慢,繁殖一定的代数停止生长(一般10代以内)。所以一般认为:培养的原代的第1和传代到第10代以内的细胞统

细胞培养常见问题解答

1.如何选用特殊细胞系培养基? 培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。  2.何时须更换培养基? 视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更

细胞培养常见问题解答(三)

21 侦测出细胞株有支原体污染时, 该如何处理?直接灭菌后丢弃,以避免污染其它细胞株。22 CO2 培养箱之水盘如何保持清洁?定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。23 为何培养基保存于4 °C 冰箱中,颜色会偏暗红色, 且pH值会越来越偏碱性?培养基保存于4 °C 冰箱中,

单细胞测序前期常见问题解答

 目前,单细胞测序这项技术被应用的越来越多,领域包括了神经科学、肿瘤免疫、胚胎发育等等,您是否也计划着开展相关的研究呢?心中关于单细胞的疑惑就让古朵生物带您从常见问题出发,逐步拨开迷雾吧  1、为什么要做单细胞测序?  细胞与细胞之间的异质性,微环境里的细微差别,这些我们关注的信息都会被常规Bulk

细胞培养常见问题解答(一)

1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D

细胞培养常见问题解答(一)

1 冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO?除少数特别注明对D

细胞培养常见问题解答(二)

16 细胞欲冷冻保存时, 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。17 应如何避免细胞污染?细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室

细胞培养常见问题解答(二)

11 欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞, 其离心速率一般为300xg (约1,000rpm),5 - 10 分钟, 过高之转速, 将造成细胞死亡。12 细胞之接种密度为何?依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生

细胞培养常见问题解答(四)

另:这里补充一下培养用品的消毒,供参考:细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌,真菌和病毒等微生物的污染,污染主要是由于操作者的疏忽而引起,常见的原因有操作间或周围空间的不洁,培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底,由于有关培养的每个环节的失误均能导致培养失败,故细胞培养的每个环节都应严格遵守操作常规,防

细胞冻存中的常见问题解答

我们都知道,细胞如果要长期保存,需要冻存起来放液氮保存。那怎么样冻存细胞才能保证细胞能正常复苏,不至于冻存死亡呢?下面我们就来讲讲细胞冻存应该注意的一些地方。1. 保持冻存前细胞状态良好冻存前一定要保证细胞状态良好,细胞处于对数生长期,否则不管后面怎么处理,冻存后的细胞状态必然有影响。若细胞密度偏高

抗体常见问题解答

  Q&A   常见问题:   如何选择合适的一抗?   如何选择合适的二抗?   如何选择合适的同型对照?   如何选择阳性对照?   如何确定一抗的稀释比例?   如何选择合适的抗原修复方式?   为何WB检测条带大小与预期有差别?   抗体能够用于其他种属/实验

抗体常见问题解答

  常见问题:   如何选择合适的一抗?   如何选择合适的二抗?   如何选择合适的同型对照?   如何选择阳性对照?   如何确定一抗的稀释比例?   如何选择合适的抗原修复方式?   为何WB检测条带大小与预期有差别?   抗体能够用于其他种属/实验方法?  

qPCR-常见问题解答

  通常来讲,real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样,要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80~150 bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。   SYBR@Green 等染料法,最好在 PCR 扩增程序结束后,加一个溶解程序,来形成溶解曲线,判断 PC

气质常见问题解答

包括常见的气质问题和MSD质谱通讯中断问题 气质常见问题解答

重组细胞因子和蛋白常见问题解答(FAQ)

1.PeproTech细胞因子和蛋白产品的稳定性如何?答:除非在产品说明书中特别注明,PeproTech的所有产品均为冻干粉,它们在室温条件下非常稳定(至少1个月)。尽管如此,我们还是建议您在收到我们的产品后保存于-20oC,以确保蛋白100%的活性。对于大多数蛋白,重悬后在4oC仅能短期保存(约1

Sonifier超声波细胞破碎仪常见问题解答

美国必能信Sonifier超声波细胞破碎仪——我怎样处理小量样品?处理小量样品zui困难的就是提供好的焊头 / 取样。解决这一困难可以通过使用带有锥形底的处理容器。其可以增加液体深度使探头更容易浸没而液体体积不会变化。使用 3/32" 或 1/8" 微型探头时应该注意不要与容器壁接触。美国必能信So

贴壁、悬浮、原代细胞感染专用Protocol及常见问题解答

慢病毒是当前zui热门的基因操作工具,其感染谱广,可有效地感染肿瘤细胞、神经元细胞、心肌细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而为基因功能的研究提供了更强有力的工具。然而仍有一部分细胞,尤其是原代细胞和悬浮细胞由于细胞特性,很难获得高效的感染效率。为了提高细胞的感染效率,我们常常选择多加病毒或使

细胞培养板的选择与常见问题解答(一)

细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型);培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有Terasaki板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。(1)平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择:贴壁细胞一

细胞培养板的选择与常见问题解答(二)

(4)细胞分布不均及解决办法问:我的细胞接种培养板,细胞总是聚集在周边部分,该如何处理啊?我看园子里有的战友的细胞却是聚集在中间,是不是板子的质量问题啊?答:请问你的细胞是如何混匀的?是滴管吹打还是振荡培养板?如果是后者,而且是转圈摇匀的话,很有可能由于离心力的作用使细胞甩到周边部分,导致细胞中间少

常见问题解答:pH/ORP

  多久应该校准一次pH电极?  pH的校准间隔取决于各自的工艺。工艺条件越稳定(温度、压力、组分、无污垢等),pH的测量就越稳定而且校准间隔就越长。大多数的pH电极在每周或每月之间校正一次,根据经验更长或更短的校准间隔也是可能的。在保证准确度的前提下,最好刚开始校准频繁一些,然后慢慢延长校准间隔。

UF-应用常见问题解答

问:UF如果报告RBC阳性是否要用显微镜确认?如果RBC全部溶解,UF-100会怎样报告RBC? 答:UF作为尿有形成分检查的筛选工具,主要特征是快速定量、准确提供许多临床有用的信息。如果仅仅RBC阳性,略超出阴性设定值Negative limits,而无其他项目异常,RBC-info属正常红细胞,

IKA移液器常见问题解答

为了方便广大用户了解德国IKA艾卡移液器,莱贝作为IKA艾卡的代理商为大家整理了一些有关IKA艾卡移液器的常见问题及解答。1、所以的IKA艾卡移液器都是经过独立校准的吗?每一只IKA艾卡移液器在出厂前都经过严格校准,且随机提供品质合格保证书(QC)以及符合ISO 8655要求的校准报告。2、我可以自

消解仪常见问题解答

1、什么是红外加热?答:通过红外管的辐射对介质进行加热,其优点是升温速率快,使用寿命长,是目前市场上主流的加热方式。2、石墨消解仪和微波消解仪的区别?答:微波消解是高压高温条件密闭下进行的样品消化,优点是升温速度快、消化时间短。石墨消解仪是在高温条件下进行样品的消化,优点是处理样品量大、控温范围更为

涂层测厚仪常见问题解答

  涂层测厚仪常见问题解答问:涂层测厚仪开机异常、报警是怎么回事?答:涂层测厚仪在使用过程中,有时会出现开机报警的现象,一般有以下几种原因:1、 没有插探头就开机,开机后出现仪器故障报警,这是正常报警,必须关机插好探头再开机。   2、 插好探头开机后出现要求故障报警,首先关机重新插探头检查是否探头

COD测定常见问题解答

化学需氧量COD(ChemicalOxygenDemand)是以化学方法测量水样中需要被氧化的还原性物质的量。废水、废水处理厂出水和受污染的水中,能被强氧化剂氧化的物质(一般为有机物)的氧当量。在河流污染和工业废水性质的研究以及废水处理厂的运行管理中,它是一个重要的而且能较快测定的有机物污染参数,常

消解仪常见问题解答

1、什么是红外加热?答:通过红外管的辐射对介质进行加热,其优点是升温速率快,使用寿命长,是目前市场上主流的加热方式。2、石墨消解仪和微波消解仪的区别?答:微波消解是高压高温条件密闭下进行的样品消化,优点是升温速度快、消化时间短。石墨消解仪是在高温条件下进行样品的消化,优点是处理样品量大、控温范围更为

实验常见问题解答汇集

BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序,为什么需要构建TA克隆后测序?由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同,未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U,而C若发生甲基化则不变,这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图,无法确定甲基化的程度,必需通过回收PCR产物,进

UF-应用常见问题解答

问:UF如果报告RBC阳性是否要用显微镜确认?如果RBC全部溶解,UF-100会怎样报告RBC? 答:UF作为尿有形成分检查的筛选工具,主要特征是快速定量、准确提供许多临床有用的信息。如果仅仅RBC阳性,略超出阴性设定值Negative limits,而无其他项目异常,RBC-info属正常

薄层色谱:常见问题解答

  薄层色谱(TLC)作为一种快速、经济的分析技术,在化学、生物学和医药等领域中被广泛使用。尽管TLC操作简单,但在实际操作过程中,用户可能会遇到一些问题。本文将针对一些常见的问题进行解答,帮助用户更好地理解和应用TLC技术。  常见问题  1. 如何选择合适的固定相?  解答: 固定相的选择取决于