qPCR常见问题解答
通常来讲，real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样，要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80～150 bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断 PCR 产物的特异性扩增。而溶解程序，仪器都有默认设置，或稍有不同，但都是一个在产物进行溶解时候，进行荧光信号的收集。 精品PCR，国产PCR，就选朗基，热线：13066324063 今天给大家汇总一下 qPCR 常见问题。 1、无 Ct 值出现 检测荧光信号的步骤有误：一般 SG 法采用 72℃ 延伸时采集，Taqman 法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。 引物或探针降解：可通过 PAGE 电泳检测其完整性。 模板量不足：对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。 模板降解：避免样品......阅读全文
qPCR－常见问题解答
通常来讲，real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样，要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80～150 bp 之间，所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法，最好在 PCR 扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断 PC
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为10
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓度为100-400
QPCR常见问题及其分析
一般来讲，进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液，只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高，所以每个样品至少要做3个平行孔，以防在后面的数据分析中，由于Ct相差较多或者SD太大，无法进行统计分析。通常来讲，反应体系的引物终浓
qPCR常见异常曲线实战分析－（二）
图九：试剂蒸发引起扩增曲线抬升4确定实验过程中的操作细节如果以上都正常，还要确定下实验过程中的操作细节。比如在做标准曲线的时候是否是梯度稀释的标准品，如果不是梯度稀释标准品，可能会引起标准曲线扩增效率或者R2值异常；从冰箱冷冻中取出的试剂是否有混匀，如果试剂融化后没有混匀，这时候取出的试剂不是均一的
qPCR常见异常曲线实战分析－（一）
1确认软件设置是否正确对照试剂盒说明书，检查时间、温度、循环数、荧光采集等是否设置正确。有一个比较容易忽略的设置问题是，需要看下所选用的试剂中是否含有ROX来作为参比荧光染料。2确定耗材及配件是否使用正确 耗材对于荧光定量PCR来说比较重要，很多
气质常见问题解答
包括常见的气质问题和MSD质谱通讯中断问题 气质常见问题解答
抗体常见问题解答
常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验方法？
抗体常见问题解答
Q&A 常见问题： 如何选择合适的一抗？ 如何选择合适的二抗？ 如何选择合适的同型对照？ 如何选择阳性对照？ 如何确定一抗的稀释比例？ 如何选择合适的抗原修复方式？ 为何WB检测条带大小与预期有差别？ 抗体能够用于其他种属/实验
细胞常见问题解答
1.原代细胞与细胞系有什么区别？ 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义，第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
同科生物qPCR常见问题及分析
通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80～150 bp之间，所以只需要变性和退火就可以了。SYBR@Green等染料法，zui好在PCR扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断PCR产物的特异性扩增。而溶解程序
同科生物qPCR常见问题及分析
通常来讲，real-time qPCR的反应程序不需要像常规的PCR那样，要变性、退火、延伸3步。由于其产物长度在80～150 bp之间，所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green等染料法，zui好在PCR扩增程序结束后，加一个溶解程序，来形成溶解曲线，判断PCR产物
涂层测厚仪常见问题解答
涂层测厚仪常见问题解答问：涂层测厚仪开机异常、报警是怎么回事？答：涂层测厚仪在使用过程中，有时会出现开机报警的现象，一般有以下几种原因：1、 没有插探头就开机，开机后出现仪器故障报警，这是正常报警，必须关机插好探头再开机。 2、 插好探头开机后出现要求故障报警，首先关机重新插探头检查是否探头
消解仪常见问题解答
1、什么是红外加热？答：通过红外管的辐射对介质进行加热，其优点是升温速率快，使用寿命长，是目前市场上主流的加热方式。2、石墨消解仪和微波消解仪的区别？答：微波消解是高压高温条件密闭下进行的样品消化，优点是升温速度快、消化时间短。石墨消解仪是在高温条件下进行样品的消化，优点是处理样品量大、控温范围更为
UF－应用常见问题解答
问：UF如果报告RBC阳性是否要用显微镜确认？如果RBC全部溶解，UF-100会怎样报告RBC？ 答：UF作为尿有形成分检查的筛选工具，主要特征是快速定量、准确提供许多临床有用的信息。如果仅仅RBC阳性，略超出阴性设定值Negative limits，而无其他项目异常，RBC-info属正常红细胞，
COD测定常见问题解答
化学需氧量COD（ChemicalOxygenDemand）是以化学方法测量水样中需要被氧化的还原性物质的量。废水、废水处理厂出水和受污染的水中，能被强氧化剂氧化的物质（一般为有机物）的氧当量。在河流污染和工业废水性质的研究以及废水处理厂的运行管理中，它是一个重要的而且能较快测定的有机物污染参
IKA移液器常见问题解答
为了方便广大用户了解德国IKA艾卡移液器，莱贝作为IKA艾卡的代理商为大家整理了一些有关IKA艾卡移液器的常见问题及解答。1、所以的IKA艾卡移液器都是经过独立校准的吗？每一只IKA艾卡移液器在出厂前都经过严格校准，且随机提供品质合格保证书（QC）以及符合ISO 8655要求的校准报告。2、我可以自
WiMAX技术常见问题解答
什么是 WiMAX技术？ WiMAX 是一种基于标准的技术，可以替代现有的有线和DSL 连接方式，来提供最后一英里的无线宽带接入。WiMAX 将提供固定、移动、便携形式的无线宽带连接，并最终能够在不需要直接视距基站的情况下提供移动无线宽带连接。在典型的3 到10英里半径单元部署中，获得
消解仪常见问题解答
1、什么是红外加热？答：通过红外管的辐射对介质进行加热，其优点是升温速率快，使用寿命长，是目前市场上主流的加热方式。2、石墨消解仪和微波消解仪的区别？答：微波消解是高压高温条件密闭下进行的样品消化，优点是升温速度快、消化时间短。石墨消解仪是在高温条件下进行样品的消化，优点是处理样品量大、控温范围更为
sysmex设备常见问题解答
问：标本的采集部位不同结果有哪些差异? 答：按采血部位的不同，取得血常规检验标本，最常用的途径是静脉采血和末梢毛细血管采血。各类文献均表明，静脉血血样是最可靠的标本，手指血是末梢毛细血管血样中与静脉血差异最小且较为稳定的血样。有研究表明，与静脉血相比，手指血的准确性和可重复性仍然较差：白细胞计数明显
UF－应用常见问题解答
问：UF如果报告RBC阳性是否要用显微镜确认？如果RBC全部溶解，UF-100会怎样报告RBC？ 答：UF作为尿有形成分检查的筛选工具，主要特征是快速定量、准确提供许多临床有用的信息。如果仅仅RBC阳性，略超出阴性设定值Negative limits，而无其他项目异常，RBC-info属正常
PCR－Array－常见问题解答
PCR Array FAQ:任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗？QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。根据仪器采用的96孔或者384孔板，分为以下5种板型（plate format）：plate formatInstrument providerQPCR instr
实验常见问题解答汇集
BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序，为什么需要构建TA克隆后测序？由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同，未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U，而C若发生甲基化则不变，这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图，无法确定甲基化的程度，必需通过回收PCR产物，进
常见问题解答：pH/ORP
流速会对pH测量有什么影响？样品的pH值是不受流速影响的，但是pH的测量值会受影响。在大多数的应用中（非高纯水），流速对pH的测量有很小的影响。在样品以0-2 m/sec的流速通过电极表面时，会对参比电极的隔膜有一个很小的影响，pH测量值会有± 0.1的偏差。压力也会有一定的影响，由于直接作用参比的
薄层色谱：常见问题解答
薄层色谱（TLC）作为一种快速、经济的分析技术，在化学、生物学和医药等领域中被广泛使用。尽管TLC操作简单，但在实际操作过程中，用户可能会遇到一些问题。本文将针对一些常见的问题进行解答，帮助用户更好地理解和应用TLC技术。 常见问题 1. 如何选择合适的固定相？ 解答： 固定相的选择取决于
常见问题解答：pH/ORP
多久应该校准一次pH电极? pH的校准间隔取决于各自的工艺。工艺条件越稳定（温度、压力、组分、无污垢等），pH的测量就越稳定而且校准间隔就越长。大多数的pH电极在每周或每月之间校正一次，根据经验更长或更短的校准间隔也是可能的。在保证准确度的前提下，最好刚开始校准频繁一些，然后慢慢延长校准间隔。
COD测定常见问题解答
化学需氧量COD（ChemicalOxygenDemand）是以化学方法测量水样中需要被氧化的还原性物质的量。废水、废水处理厂出水和受污染的水中，能被强氧化剂氧化的物质（一般为有机物）的氧当量。在河流污染和工业废水性质的研究以及废水处理厂的运行管理中，它是一个重要的而且能较快测定的有机物污染参数，常
常见问题解答——pH计
测量问题: 同一样品，两次测量的pH值不一样？温度变化或样品本身发生了化学反应，都会引起pH值的变化。所以，应尽量保持温度一致，并且避免化学反应。测量问题: 同一样品，同时在两台pH计上测量，读数不一致 ？由于两台pH计的校正条件不一样（如不同时间做的校正），造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同
qPCR常见问题及其分析解决方法
常见问题 1. 无Ct值出现 检测荧光信号的步骤有误: 一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。 引物或探针降解: 可通过PAGE电泳检测其完整性。 模板量不足: 对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。 模板降解: 避免样品制备中杂